公开(公告)号：CN104818309A

公开(公告)日：2015-08-05

申请号：CN201510208876.X

申请日：2015-04-28

Applicant: 暨南大学

Inventor： 熊盛 ,  温家明 ,  谢秋玲 ,  钱垂文 ,  邹纯彬

IPC: C12P21/00 ,  C12P21/02

Abstract: 本发明公开了MG-132在CHO工程细胞表达外源蛋白中的应用。在含有外源蛋白表达基因的CHO细胞，即CHO工程细胞表达外源蛋白时加入MG-132，能提高外源蛋白的表达量。本发明提供了MG-132的一种新用途，也提供了一种提高CHO工程细胞外源蛋白表达量的方法。

公开(公告)号：CN103361355A

公开(公告)日：2013-10-23

申请号：CN201310323234.5

申请日：2013-07-29

Applicant: 暨南大学

Inventor： 谢秋玲 ,  熊盛 ,  洪岸 ,  黄亚东 ,  陈志南 ,  陈慧萍

IPC: C12N15/13 ,  C12N15/85 ,  C12N5/10 ,  C12P21/08

Abstract: 本发明公开一种编码重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的基因及其应用。该基因包含如SEQ ID NO.1所示的编码轻链的核苷酸序列和如SEQ ID NO.2所示的编码重链的核苷酸序列。分别在前述两个序列上设计信号肽、起始密码子和终止密码子；将设计好的序列分别克隆至真核表达载体中，共同转染CHO细胞，得到表达重组rhHER2-mAb人源化单克隆抗体的CHO细胞，再对该CHO细胞进行发酵。本发明由于对密码子进行优化，转基因后的CHO细胞表达重组人rhHER2-mAb的表达量高；且本发明提供的发酵方法，特别是在添加补料培养基后，延长细胞生长时间，提高表达水平，降低生产成本，获得高纯度的目的蛋白。

公开(公告)号：CN103266105A

公开(公告)日：2013-08-28

申请号：CN201310164454.8

申请日：2013-05-07

Applicant: 暨南大学

Inventor： 张弓 ,  陈伟 ,  熊盛 ,  金静洁

IPC: C12N15/10 ,  C12N15/31 ,  C12N15/70 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开了一种通过翻译暂停序列理性重设计改善蛋白质可溶性表达的方法。该方法包括如下步骤：根据蛋白质结构，确定翻译暂停位点应存在的位置；将翻译暂停范围外的缓慢翻译密码子突变为氨基酸相同的高频密码子；在翻译暂停范围内按照选择2～6个密码子进行同义突变，产生翻译暂停位点。该方法是在不改变蛋白质氨基酸序列的前提下，重新设计编码蛋白质的核苷酸序列，增强其可溶性表达的效率。适用性广，前景潜力大。

公开(公告)号：CN103255151A

公开(公告)日：2013-08-21

申请号：CN201310164451.4

申请日：2013-05-07

Applicant: 暨南大学

Inventor： 陈伟 ,  张弓 ,  熊盛 ,  金静洁

IPC: C12N15/31 ,  C07K14/195 ,  C12N15/70 ,  A61K38/16 ,  A61P31/12 ,  A61P31/16 ,  A61P31/18 ,  C12R1/01

Abstract: 本发明公开一种表达量高和活性强的CVN突变体的编码序列及其应用。该编码序列如SEQ ID NO.1所示。该编码序列用于CVN突变体，包括如下步骤：将上述编码核苷酸序列克隆到表达载体上，得到重组载体；将重组载体转化到宿主细胞中进行表达，纯化，得到表达量高和活性强的CVN突变体。该编码序列显著促进了CVN在大肠杆菌中的可溶性表达，CVN突变体在大肠杆菌中可溶性表达的量显著高于野生型CVN。此外，由该编码序列得到的CVN突变体的体外抗流感病毒活性要好于野生型CVN，说明通过翻译暂停理论对蛋白质编码核苷酸序列理性设计和优化，不仅能够提高CVN的表达量，更为重要的是显著促进CVN可溶性表达，得到生物活性更好的CVN蛋白。