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公开(公告)号：CN109370997B
公开(公告)日：2020-07-03
申请号：CN201811415904.5
申请日：2018-11-26
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种苯丙氨酸氨基变位酶突变体，属于酶工程技术领域。本发明的苯丙氨酸氨基变位酶的突变体序列如SEQ ID NO.2所示，该突变酶的比酶活相对于野生型提高了1.13倍，在50℃处理1小时仍有50％残留酶活性，温度稳定性相比野生酶有了较大的提高。同时该突变体也具备了更好的pH稳定性，有利于以后的工业生产。
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公开(公告)号：CN110804602A
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201911127316.6
申请日：2019-11-18
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种L-天冬氨酸β-脱羧酶突变体及其应用，属于生物工程技术领域。本发明提供的L-天冬氨酸β-脱羧酶突变体N35D、A179E，pH 7.0条件下催化酶活性分别提高238％、244％。pH 4.5条件下处理12h酶活分别剩余83.9％、85.5％，相比对照野生型酶残余酶活24.8％，突变体酸稳定性有明显提高。因此，本发明提供的L-天冬氨酸β-脱羧酶突变体N35D、A179E具有较好的酶学性质。
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公开(公告)号：CN109593750B
公开(公告)日：2020-01-21
申请号：CN201910039981.3
申请日：2019-01-16
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种腈水合酶突变体、含该突变体的基因工程菌及其应用，属于酶工程技术领域。本发明是将腈水合酶突变体αL6T/A19V/F126Y‑βM46K/E108R/S212Y(公开于发明专利CN102216455A)的第47位甘氨酸突变为天冬酰胺，获得的新突变酶具有更好的温度耐受性和产物耐受性，有利于以后的工业生产。将含该腈水合酶突变体的重组菌株高密度发酵，以烟腈为底物，进行全细胞催化反应制备烟酰胺。此法与化学生产法相比，生产工艺安全清洁，无环境污染，与酶法相比，底物价格便宜，催化效率高，终产物烟酰胺产率95％以上，浓度达到680g/L，简化了产物的分离纯化步骤。
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公开(公告)号：CN106636052B
公开(公告)日：2019-06-21
申请号：CN201611108889.0
申请日：2016-12-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种马来酸顺反异构酶的热稳定性改造及其应用，属于酶工程领域。本发明将来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶基因maiA通过半理性设计的方法进行了热稳定改造，得到的突变体与野生型的马来酸顺反异构酶相比，突变体G27A‑G171A在55℃的半衰期是野生型的2.9倍，酶活是野生型的1.96倍；突变体G27A‑K104R在55℃的半衰期是野生型的4.18倍，酶活是野生型的1.59倍。
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公开(公告)号：CN107828714A
公开(公告)日：2018-03-23
申请号：CN201711376385.1
申请日：2017-12-19
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C12P13/06 , C12Y401/01011
Abstract: 本发明公开了一株异源表达L-天冬氨酸-α-脱羧酶的大肠杆菌重组菌，属于生物工程领域。本发明通过构建重组大肠杆菌，获得具有高酶活的L-天冬氨酸α-脱羧酶菌株，将重组菌株高密度发酵，以L-Asp-Na作为底物，进行全细胞催化反应制备β-丙氨酸。此法与化学生产法相比，生产工艺安全清洁，无环境污染，与酶法相比，底物价格便宜，催化效率高，终产物β-丙氨酸产率95％以上，简化产物的分离纯化步骤。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN104830747B
公开(公告)日：2018-01-16
申请号：CN201510244547.0
申请日：2015-05-13
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效表达高分子量型腈水合酶的基因工程菌及其应用，属于微生物基因工程技术领域。本发明所述的高分子量型腈水合酶基因nhhB(rbs)A(rbs)G是基于R.rhodochrous J1来源的腈水合酶基因bag，经密码子优化及表达元件改造之后化学合成得到，该基因全长1645bp，编码533个氨基酸，能够在大肠杆菌中成功表达。该方法高效安全，在24℃诱导16h即可获得96.7U/mL可溶性腈水合酶，纯化后比酶活高达234U/mg。该方法有利于生产过程中腈水合酶的提取纯化以及酰胺类物质的高效酶法合成。
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公开(公告)号：CN104862296B
公开(公告)日：2017-12-12
申请号：CN201510226690.7
申请日：2015-04-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C07K2319/00 , C12P13/02 , C12P21/02 , C12Y402/01084
Abstract: 本发明公开了一种比酶活和稳定性提高的融合型腈水合酶，属于基因工程领域。本发明将来源于恶臭假单胞菌的腈水合酶在大肠杆菌中高效表达并采用亚基融合策略提高稳定性及产物耐受性。本发明方法简单高效安全，能够在较短的表达周期里获得稳定性高，产物耐受性强的大量可溶性腈水合酶，有利于在简单条件下进行大规模工业生产，以及进一步对融合型腈水合酶成熟机制的理论研究。
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公开(公告)号：CN106222122A
公开(公告)日：2016-12-14
申请号：CN201610575998.7
申请日：2016-07-20
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12P7/46 , C12R1/19 , C12N9/88 , C12N9/90 , C12Y402/01002 , C12Y502/01001
Abstract: 本发明涉及一种可高产富马酸的大肠杆菌工程菌，通过敲除大肠杆菌的延胡索酸酶编码基因fumA和fumC，并转化来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶基因得到。本发明还公开了上述大肠杆菌工程菌催化马来酸合成富马酸的方法：发酵培养大肠杆菌工程菌，当OD600达到40-80时对大肠杆菌工程菌进行高密度诱导表达，将得到的发酵液生化催化马来酸，得到富马酸。本发明利用Red同源重组技术敲除大肠杆菌中的fumA和fumC基因，切断其富马酸到L-苹果酸的代谢通路，然后表达来源于粘质沙雷氏菌的马来酸顺反异构酶，获得的基因工程菌株可高效转化马来酸底物合成高纯度富马酸，几乎不合成L-苹果酸副产物，为全细胞法催化马来酸生产富马酸的工业化提供依据。
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公开(公告)号：CN104862296A
公开(公告)日：2015-08-26
申请号：CN201510226690.7
申请日：2015-04-22
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N9/88 , C07K2319/00 , C12P13/02 , C12P21/02 , C12Y402/01084
Abstract: 本发明公开了一种比酶活和稳定性提高的融合型腈水合酶，属于基因工程领域。本发明将来源于恶臭假单胞菌的腈水合酶在大肠杆菌中高效表达并采用亚基融合策略提高稳定性及产物耐受性。本发明方法简单高效安全，能够在较短的表达周期里获得稳定性高，产物耐受性强的大量可溶性腈水合酶，有利于在简单条件下进行大规模工业生产，以及进一步对融合型腈水合酶成熟机制的理论研究。
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