公开(公告)号：CN113005102A

公开(公告)日：2021-06-22

申请号：CN202110332457.2

申请日：2021-03-29

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  谢泉 ,  穆雅茹 ,  秦爱建 ,  邵红霞 ,  万志敏 ,  李拓凡

IPC: C12N7/01 ,  C12N7/04 ,  C12N15/85 ,  C12N15/65 ,  C12N15/55 ,  C12N15/34 ,  C12R1/93

Abstract: 本发明涉及一种绿色荧光蛋白替换Fiber‑2的重组血清4型禽腺病毒及其制备方法，本发明利用当下流行的血清4型禽腺病毒作为载体，将病毒的毒力基因之一F2进行删除，纯化后成功获得了表达EGFP的F2完全缺失的重组FAdV4病毒，在体内及体外实验结果均显示，FAV4‑EGFP‑rF2重组病毒毒力显著降低，且攻毒后保护率很好，由此可见，本发明提供的F2完全缺失型重组病毒不仅能够为FAdV‑4的防控提供生物材料，同时EGFP替换F2的位置可以作为插入其他病原保护性抗原的插入位点，为构建FAdV‑4重组多价苗提供了坚实的理论依据。

公开(公告)号：CN112881688A

公开(公告)日：2021-06-01

申请号：CN202110321454.9

申请日：2021-03-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  任丹 ,  高巍 ,  李拓凡 ,  万志敏 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: G01N33/569 ,  G01N33/533 ,  G01N33/577

Abstract: 本发明涉及一种快速检测鹅星状病毒的免疫荧光方法，利用鸡肝细胞对鹅星状病毒感染的组织样品或者已经分离到的病毒进行培养，培养基为含1μg/mL TPCK‑胰蛋白酶的DMEM‑F12培养基，用针对鹅星状病毒P2蛋白的6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测；或者直接取新鲜的组织进行冰冻切片，用针对鹅星状病毒P2蛋白的6C6单抗作为一抗，FITC标记的羊抗鼠IgG作为二抗进行IFA检测。所述一抗是杂交瘤细胞株6C6分泌的抗星状病毒P2蛋白单克隆抗体6C6制备而成。通过本发明，本发明的快速检测鹅星状病毒的免疫荧光技术可以特异性的检测鹅星状病毒，且阴性背景低，效果显著。

公开(公告)号：CN112852756A

公开(公告)日：2021-05-28

申请号：CN202110321451.5

申请日：2021-03-25

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  任丹 ,  高巍 ,  李拓凡 ,  万志敏 ,  秦爱建 ,  邵红霞

IPC: C12N7/00 ,  C12N7/02 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种利用鸡肝细胞快速分离扩增新型鹅星状病毒的方法，包括以下步骤：（1）利用鸡肝细胞对鹅星状病毒进行培养；（2）鸡肝细胞快速扩增鹅星状病毒，利用鸡肝细胞对鹅星状病毒进行培养扩增的培养基为含1μg/mL TPCK‑胰蛋白酶的DMEM‑F12培养基；（3）鸡肝细胞能扩增鹅星状病毒，第三天病毒效价可达1.08×106TCID50/ml。通过本发明，这种快速分离扩增方法的建立为快速病毒检测和疫苗的研制提供技术平台，节约时间、成本。因此，本发明在GAstV的病毒检测及疫苗研制中具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN106520809A

公开(公告)日：2017-03-22

申请号：CN201610889152.0

申请日：2016-10-12

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  王萍 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  田晓彦 ,  王伟康 ,  万志敏

IPC: C12N15/70 ,  C07K19/00

CPC classification number: C12N15/70 ,  C07K14/005 ,  C07K2319/00 ,  C12N2750/10022 ,  C12N2800/101

Abstract: 一种GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白的制备方法，涉及GyV3新型环形病毒的诊断用融合蛋白的制备技术领域。本发明设计了扩增出pGEX-6p-1线性化载体以及GyV3病毒VP3基因片段的两对引物，利用商品化的重组酶ExnaseTM II，不经酶切连接反应，直接在体外快速重组取得阳性克隆体，并转化BL21细菌，经IPTG诱导下即获得GyV3新型环形病毒VP3融合蛋白。本发明简化了克隆过程，实现VP3基因快速克隆表达。

公开(公告)号：CN106443015A

公开(公告)日：2017-02-22

申请号：CN201610837860.X

申请日：2016-09-21

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  谢泉 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  田晓彦 ,  梁广成 ,  王伟康 ,  万志敏

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/569 ,  G01N33/535

CPC classification number: G01N33/6857 ,  G01N33/535 ,  G01N33/56983 ,  G01N2333/075

Abstract: 本发明属于生物技术检测领域，具体涉及一种基于hexon蛋白N端保守区的检测禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒。该试剂盒包括包被有hexon蛋白N端保守区表达产物的ELISA酶标板，HRP标记的兔抗鸡抗体，样品稀释液，洗涤液；所述的hexon蛋白N端保守区序列如SEQ ID NO.5所示。本发明建立的禽腺病毒抗体的间接ELISA试剂盒能特异性的检测出抗禽腺病毒抗体，而不能检测出抗其它病原的抗体。因此，该试剂盒具有良好禽腺病毒的特异性，能用于禽腺病毒感染状况流行病学调查。