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公开(公告)号：CN106635895B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201611071308.0
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种绵羊肺炎支原体低血清高效培养基，含有以下组分：MEM、丙酮酸钠、葡萄糖、Hank’s液、新鲜酵母浸出液、L‑谷氨酰胺、L‑半胱氨酸、水解乳蛋白、小牛胸腺DNA、胰岛素、转铁蛋白、青霉素、马血清、酚红、去离子水；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的绵羊肺炎支原体培养基血清含量仅为5%，是现有技术培养基血清含量的1/4；用本发明方法制备的绵羊肺炎支原体半成品菌液滴度达1010 CCU/ml，明显高于现有技术培养基。低血清高效培养基培养绵羊肺炎支原体，既减轻了异源血清对羊体的过敏应激反应，提高了生物安全，也提高了活菌菌液滴度，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN106222109B
公开(公告)日：2019-07-26
申请号：CN201610690169.3
申请日：2016-08-19
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种用于殊异支原体分离培养的培养基，每1000ml培养基中包括有以下组分：PPLO肉汤8.5g、脑心浸出液8.5g、葡萄糖2.0g、Hank’s平衡盐溶液500 ml、25%新鲜酵母浸出液60 ml、无菌猪血清100 ml、无菌马血清100 ml、氨苄青霉素100 mg、10%醋酸铊1 ml；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的殊异支原体培养基与现有技术相比，活菌滴度可达1010 CCU/ml，而现有技术培养基生长滴度为107‑109 CCU/ml；继代培养殊异支原体，本发明培养基2‑3天可传代一次，而现有技术传代一次一般需要3‑5天，充分说明本发明提供的培养基具有生长快速、培养滴度高的特点，适用于殊异支原体的分离培养。
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公开(公告)号：CN107099608A
公开(公告)日：2017-08-29
申请号：CN201710443863.X
申请日：2017-06-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所 , 金瑞鸿捷(厦门)生物科技有限公司 , 北京华安瑞基生物科技有限公司
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q2600/166
Abstract: 本发明公开了一种检测山羊支原体山羊肺炎亚种的iiPCR试剂盒，它属于分子生物学检测领域。所述试剂盒包括：Premix Ex Taq引物Mccp‑specific‑Forward和Mccp‑specific‑Revers，探针Mccp‑specific‑Probe，阴性对照和阳性对照。本发明将检测结果同之前建立的山羊支原体山羊肺炎亚种实时荧光定量PCR检测结果进行比较，发现两种方法的符合率为100％。同时，本发明也对试剂盒的稳定性进行了检测，发现在‑20℃条件下，试剂盒至少可以保存一个月，这为山羊支原体山羊肺炎亚种的现场检测提供了极大的便利，省去了现场操作带来的交叉污染以及费时费力等问题。
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公开(公告)号：CN107083441A
公开(公告)日：2017-08-22
申请号：CN201710444371.2
申请日：2017-06-13
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
CPC classification number: C12Q1/689 , C12Q1/686 , C12Q2600/156 , C12Q2561/113 , C12Q2563/107 , C12Q2545/114 , C12Q2561/101
Abstract: 本发明公开了检测山羊支原体山羊肺炎亚种的荧光定量PCR试剂盒，它属于分子生物学检测领域。PCR试剂盒包含引物和探针,引物为：Mccp‑specific‑Forward：5′‑GTAGCAGCTATATTCTTAATCA‑3′，Mccp‑specific‑Reverse：5′‑GCTACAAATAATTCTTGCATAC‑3′，探针为：Mccp‑specific‑Probe：5′‑F‑AAGTAATACCAGCAGCAACAGCAAG‑Q‑3′，F为荧光报告基团，Q为荧光淬灭基团，探针5′端标记有荧光报告基团FAM，3′端标记有荧光淬灭基团TAMRA。试剂盒检测结果重复性较好，检测方法稳定，数据可靠。
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公开(公告)号：CN106591177A
公开(公告)日：2017-04-26
申请号：CN201611070622.7
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种山羊支原体山羊肺炎亚种低血清高效培养基，含有以下组分：PPLO肉汤、丙酮酸钠、乳糖、胰蛋白胨、新鲜酵母浸出液、L‑谷氨酰胺、L‑半胱氨酸、水解乳蛋白、马血清、青霉素、酚红、去离子水；并提供了其制备方法。本发明的有益效果为：本发明提供的山羊支原体山羊肺炎亚种培养基血清含量仅为5%，仅为现有技术培养基血清量的1/5～1/4；此外，用本发明方法制备的半成品菌液滴度达1010 CCU/ml，明显高于现有技术培养基。本发明低血清高效培养基培养山羊支原体山羊肺炎亚种，既有利于减轻异源血清对羊体的过敏应激反应，提高生物安全，又提高了活菌滴度，降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106399207A
公开(公告)日：2017-02-15
申请号：CN201611072162.1
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了一种牛支原体培养基及其制备方法，属于兽医生物技术领域。本发明的牛支原体培养基由基础培养基和辅助培养基混合构成，其中培养基的组成为：PPLO肉汤、丙酮酸钠、葡萄糖、新鲜酵母浸出液、L-谷氨酰胺、L-半胱氨酸、水解乳蛋白、马血清、青霉素、酚红、去离子水。本发明既能减少血清用量，还明显提高了牛支原体的活菌滴度，为牛支原体优质疫苗的研制奠定了基础。
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公开(公告)号：CN106350472A
公开(公告)日：2017-01-25
申请号：CN201611072164.0
申请日：2016-11-29
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开一种牛支原体液体培养基及其制备方法，涉及兽医生物技术领域。本发明的牛支原体液体培养基由基础培养基和辅助培养基混合构成，培养基的组成为：蛋白胨、葡萄糖、丙酮酸钠、新鲜酵母浸出液、L-谷氨酰胺、L-半胱氨酸、水解乳蛋白、转铁蛋白、胰岛素、少量马血清、青霉素、酚红、去离子水。本发明的牛支原体培养基有利于牛支原体的生长，活菌滴度达1010CCU/ml，明显高于现有技术培养基。此外，本发明培养基中血清含量仅为5%，为现有技术培养基血清含量的1/4～1/2。与现有技术相比，本发明培养基具有血清含量低、生长迅速和活菌滴度高的特点。
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公开(公告)号：CN104062439B
公开(公告)日：2016-06-08
申请号：CN201410327648.X
申请日：2014-07-10
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
IPC: G01N33/68 , G01N33/531 , C12N15/31 , C12N15/70 , C07K14/30
Abstract: 本发明涉及一种生物检测试剂，以及这种检测试剂的制备方法，确切讲本发明涉及一种牛支原体抗体检测试剂及其制备方法。本发明的牛支原体抗体检测试剂由混合均匀的1份牛支原体P48重组表达的融合蛋白抗原和1份10%醛化-鞣酸化绵羊红细胞（v/v）构成。本发明的牛支原体抗体检测试剂所用的P48重组表达的融合蛋白抗原基因序列为SEQ ID №1。本发明可真实地检测牛支原体抗体；具有保存时间长、致敏效价高、易于长时间保存，血凝效价高，以及操作简单、方便快速，且价格低廉，安全稳定，无毒性，无环境污染。等优点。
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公开(公告)号：CN105462884A
公开(公告)日：2016-04-06
申请号：CN201510950317.6
申请日：2015-12-18
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明提供鸭支原体培养基，由液体培养基和固体培养基组成，液体培养基由以下组分组成：去离子水，10%的醋酸铊溶液，PPLO肉汤，葡萄糖，蛋白胨，胰蛋白胨，1%的酚红，含L-谷氨酰胺的CMRL-1066培养基，灭活的马血清，酵母浸出液，青霉素，L-半胱氨酸盐酸盐和烟酰胺腺嘌呤二核苷酸；除添加琼脂粉，去掉酚红外，固体培养基其余组分与液体培养基相同。利用上述培养基对鸭支原体分离纯化：在固体培养基上分离菌落，将分离的菌落置于液体培养基中生长，然后进行液体培养物的过滤、稀释、涂板和挑单菌落增殖的纯化步骤，重复上述步骤直至得到纯化的鸭支原体。本发明的培养基可促进鸭支原体的生长，且分离纯化鸭支原体的成功率高。
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公开(公告)号：CN103193872B
公开(公告)日：2016-03-02
申请号：CN201310090191.0
申请日：2013-03-20
Applicant: 中国农业科学院兰州兽医研究所
Abstract: 本发明公开了提供了一种检测快速方便，实用性强的含有副猪嗜血杆菌OppA重组蛋白抗原的副猪嗜血杆菌病正向间接血凝诊断试剂及其制备方法，并提供了副猪嗜血杆菌OppA重组蛋白抗原及其编码基因。本发明的有益效果为：①检测过程简便、快速、准确，实用性强，具有较强的推广与应用价值；②敏感性高、特异性强、稳定性好；③用该诊断试剂可以检测副猪嗜血杆菌15血清型的抗体；④安全简便，不需要复杂的检测仪器和设备，检测结果直观。
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