公开(公告)号：CN116064267B

公开(公告)日：2024-06-21

申请号：CN202211438823.3

申请日：2022-11-17

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 林源 ,  杨生超 ,  张广辉 ,  郝冰 ,  卢迎春 ,  王益娜

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12P33/20 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。本发明将糖基转移酶PnUGT50和糖基转移酶PnUGT31进行酵母密码子优化，分别在组合型启动子和G418抗性标签的作用下，插入ZW04BY酵母基因组的δ序列多拷贝位点，获得生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌。本发明通过在起始菌株ZW04BY酿酒酵母中异源过表达人参皂苷Rg3通路合成的2个关键酶实现了人参皂苷Rg3在酿酒酵母中的生产，使其产量达到254.07±56.49mg/L，本发明的方法为人工细胞高效合成人参皂苷Rg3奠定了基础。

公开(公告)号：CN118165972A

公开(公告)日：2024-06-11

申请号：CN202410031792.2

申请日：2024-01-09

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 杨生超 ,  李晓波 ,  丁靖洋 ,  郝冰 ,  张广辉 ,  卢迎春 ,  刘冠泽 ,  和四梅 ,  王雪 ,  张迎

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/00 ,  A61K38/52 ,  A61K31/575 ,  A61P9/00 ,  A61P9/10 ,  A61P5/00 ,  A61P25/00 ,  A61P35/00 ,  A61P3/10 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC4和其编码产物达玛烯二醇‑Ⅱ的应用，属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜（Neoalsomitra integrifoliola）出发，克隆并功能鉴定了一个合成达玛烯二醇‑Ⅱ的三萜合酶NiOSC4编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞，实现了酿酒酵母异源高效合成化合物达玛烯二醇‑Ⅱ，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC4产物达玛烯二醇‑Ⅱ可用于制备抗心脑血管疾病、内分泌系统疾病、中枢神经系统疾病、抗癌、抗糖尿病的药物。

公开(公告)号：CN117866932A

公开(公告)日：2024-04-12

申请号：CN202410031795.6

申请日：2024-01-09

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张广辉 ,  李晓波 ,  杨生超 ,  王雪 ,  郝冰 ,  丁靖洋 ,  张迎 ,  卢迎春 ,  和四梅 ,  刘冠泽

IPC: C12N9/90 ,  C12N15/61 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/00 ,  A61K38/52 ,  A61K31/575 ,  A61P37/08 ,  A61P17/00 ,  A61P35/00 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了氧化鲨烯环化酶NiOSC6和其编码产物葫芦二烯醇的应用，属于合成生物学和天然药物技术领域。本发明从葫芦科植物棒锤瓜（Neoalsomitra integrifoliola）出发，克隆并功能鉴定了一个合成葫芦二烯醇的三萜合酶NiOSC6编码基因，其核苷酸序列如Seq ID No.2所示，对其进行基因克隆后与表达载体pYES2连接，构建成为能够在大肠杆菌中表达的重组质粒，再将重组质粒转化至酿酒酵母中构建成为工程细胞，实现了酿酒酵母异源高效合成化合物葫芦二烯醇，本发明构建的该基因工程细胞安全稳定，生产周期短，显示出其在应用开发中的重大价值。本发明提供的NiOSC6产物葫芦二烯醇在制备抗过敏、保湿、促进皮肤细胞生长、抑制黑色素细胞增长、抗肿瘤的药物中的应用。

公开(公告)号：CN117821490A

公开(公告)日：2024-04-05

申请号：CN202311746115.0

申请日：2023-12-19

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张广辉 ,  冯孝林 ,  杨生超 ,  郝冰 ,  陈庚 ,  舒彦宇 ,  李志远 ,  马迪娜 ,  和四梅 ,  卢迎春 ,  贺雪颖 ,  张建丽 ,  黄春丽

IPC: C12N15/81 ,  C12N9/04 ,  C12N9/02 ,  C12N9/10 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12P33/02 ,  C12N9/90 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明公开了一种编码细胞色素P450酶的多功能基因CYP87D20构建基因工程菌DNHc87‑03的方法，该基因工程菌能催化葫芦二烯醇的C11氧化和C20位羟化生成葫芦素中间体11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol；一种短链脱氢酶synHcSDR3构建的基因工程菌DNHc87‑S‑01能在11‑carbonyl‑Cuol和11‑carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cuol的C3位进行脱氢反应形成酮基分别生成为11‑Carbonyl‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one和11‑Carbonyl‑20β‑hydroxy‑Cucurbita‑5,24‑dien‑3‑one，它们是合成葫芦素C/B/D/E/I等的重要中间体，采用酵母同源重组组装构建酿酒酵母底盘细胞生产目标化合物，极大地推动了对葫芦素生物合成分子机理的认知，也将为雪胆甲素和葫芦素的全合成奠定基础。

公开(公告)号：CN117417833A

公开(公告)日：2024-01-19

申请号：CN202311361011.8

申请日：2023-10-20

Applicant: 昆明鸿垚农业开发投资有限公司 ,  云南农业大学

Inventor： 冷洪松 ,  李姝娴 ,  蒋真 ,  梁艳丽 ,  郝冰 ,  冷洪勇 ,  杨生超 ,  陈丽 ,  毛柯轶

IPC: C12N1/04 ,  C12N1/14 ,  C12R1/645

Abstract: 天麻共生蜜环菌菌株的保藏与复壮方法。包括选择对天麻生长作用显著的蜜环菌菌株。将蜜环菌菌丝用无菌水冲洗两遍，75％酒精浸泡20s，0.1％升汞浸泡30s，无菌水冲洗3次；之后将菌丝放在无菌滤纸上吸干表面水分。接种：去除菌丝上多余水分之后，将菌丝接种到PDA培养基上，每个培养皿接种2‑3根菌丝，长度约1cm；培养并观察；十五天之后挑取白色成熟菌索0.5cm‑0.7cm，放入灭菌后的1.5mL离心管中，以20％甘油做保护剂,每一管加入1ml灭菌后的甘油,用封口膜密封离心管口，先将密封好的菌种放入液氮中快速冰冻，再放入－80℃冰箱低温保藏。

公开(公告)号：CN117327715A

公开(公告)日：2024-01-02

申请号：CN202311077715.2

申请日：2023-08-25

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 张广辉 ,  张双艳 ,  刘祥宇 ,  杨生超 ,  赵艳 ,  和四梅 ,  郝冰 ,  卢迎春 ,  向贵生 ,  冯垒

IPC: C12N15/53 ,  C12N9/02 ,  C12N15/81 ,  C12N1/19 ,  C12P33/06 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种假马齿苋P450酶基因BmCYP068及在制备23‑OH‑Dammarenediol II和25‑OH‑Dammarenediol II中的应用，属于生物技术领域。该假马齿苋P450酶基因BmCYP068核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示，序列全长1554bp；编码蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示，编码了518个氨基酸残基。本发明假马齿苋P450酶基因BmCYP068可作为23‑OH‑Dammarenediol II和25‑OH‑Dammarenediol II的生物合成调控基因，并应用于对其的制备，应用前景显著，易于推广应用。

公开(公告)号：CN116875471A

公开(公告)日：2023-10-13

申请号：CN202311044072.1

申请日：2023-08-18

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 郝冰 ,  王慧明 ,  陈小巧 ,  杨景栋 ,  胡浩洋 ,  刘彦中 ,  彭小祠 ,  孙晨 ,  孟金朋 ,  罗杰 ,  杨皓若 ,  杜江顺 ,  康乐怡

IPC: C12N1/14 ,  C12N1/02 ,  A01N63/30 ,  A01P21/00 ,  A01G7/06 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明公开了具有显著抗旱作用的烟草内生真菌X‑5及其应用。烟草是我国的重要的经济作物之一，对于我国的经济发展有着至关重要的作用，但近年来烟草种植生产往往会受到病虫害、重金属胁迫、干旱胁迫等多重因素的限制，导致烟草植株在苗期或大田期生长缓慢，严重威胁烟叶的产质量。通过将云烟87中分离出的这1种内生真菌菌液浇施于不同品种烟苗的上部及根部土壤，能显著提高烟苗的生物量及农艺性状。

公开(公告)号：CN116114559A

公开(公告)日：2023-05-16

申请号：CN202310252018.X

申请日：2023-03-16

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 何澍然 ,  马俏冉 ,  杨生超 ,  陈军文 ,  字淑慧 ,  沙本才 ,  卢迎春 ,  张广辉 ,  梁艳丽 ,  范伟 ,  刘冠泽 ,  郝冰 ,  龙光强 ,  和四梅 ,  刘家敏

IPC: A01G22/25 ,  A01G7/06

Abstract: 本发明提供一种林下栽培西洋参的方法，包括：(1)选择适宜生长的林地；(2)整地；(3)根据林地树木种植方向进行起垄；(4)选择二年生种苗，采用斜栽方式进行移栽；(5)在林下采用纤维杆作为支撑材料间隔1.5m起拱搭建避雨棚；(6)分别在西洋参展叶期、开花期、结果期时期结合灌溉进行海藻提取物的施用。本发明提供的林下栽培西洋参的方法，通过施用海藻提取物对西洋参进行追肥，提高了林下栽培的西洋参的产量。

公开(公告)号：CN116064267A

公开(公告)日：2023-05-05

申请号：CN202211438823.3

申请日：2022-11-17

Applicant: 云南农业大学

Inventor： 林源 ,  杨生超 ,  张广辉 ,  郝冰 ,  卢迎春 ,  王益娜

IPC: C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12N15/54 ,  C12P33/20 ,  C12R1/865

Abstract: 本发明涉及一种生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌及其构建方法，属于分子生物学和生物工程技术领域。本发明将糖基转移酶PnUGT50和糖基转移酶PnUGT31进行酵母密码子优化，分别在组合型启动子和G418抗性标签的作用下，插入ZW04BY酵母基因组的δ序列多拷贝位点，获得生产人参皂苷Rg3的酿酒酵母工程菌。本发明通过在起始菌株ZW04BY酿酒酵母中异源过表达人参皂苷Rg3通路合成的2个关键酶实现了人参皂苷Rg3在酿酒酵母中的生产，使其产量达到254.07±56.49mg/L，本发明的方法为人工细胞高效合成人参皂苷Rg3奠定了基础。

公开(公告)号：CN114857869A

公开(公告)日：2022-08-05

申请号：CN202210228910.X

申请日：2022-03-10

Applicant: 云南农业大学 ,  红塔烟草(集团)有限责任公司楚雄卷烟厂

Inventor： 刘彦中 ,  吕芬 ,  王丽萍 ,  郝冰 ,  林云红 ,  熊茜 ,  张岚清

IPC: F26B9/06 ,  F26B21/08 ,  F26B23/00 ,  F26B25/12 ,  F26B25/00 ,  F25B21/02 ,  F28B9/08 ,  A24B3/10

Abstract: 本发明属于烤烟生产技术领域，尤其为一种便于蒸发烟草水分的烘烤装置，包括烤烟房本体，所述烤烟房本体的表面开设有进出口，所述进出口的一侧设置有进出机构，所述进出机构的一端设置有闭合门，所述闭合门的表面设置有连接块。可以使用第一风机通过抽取管道抽取烤烟房本体内部的空气输送到除湿装置内部，除湿装置是采用半导体制冷除湿方式，主动将密闭空间的潮湿空气在第一风机的作用下吸入除湿装置内部，空气中的水汽经过半导体制冷机构后冷凝成水，再通过冷凝水管道排入到蓄水箱，可以达到很好的除湿效果，通过减低烤烟房本体内空气中含水量，使相对湿度和绝对湿度同时下降，几乎不提高温度，不产生温差带来的负面影响。