公开(公告)号：CN110283924B

公开(公告)日：2023-03-24

申请号：CN201910306500.0

申请日：2019-04-17

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  方鹏 ,  金立方 ,  彭菲 ,  黄圣禅 ,  祁巍巍 ,  唐远平

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种用于检测玉米3906H基因的特异性引物组及其应用。扩增该3906H基因左侧DNA片段的一对特异性引物3906HS1的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：AACAAGTGACGCTCGGAGATAC；反向引物从5′端至3′端为：GCCTGTTTGGTAAGCACTGGTG；扩增该3906H基因右侧DNA片段的一对特异性引物3906HS12的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TCGGAATCTCACACCAAACA；反向引物从5′端至3′端为：TTGCATCCAACTGTTTCCAA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中3906H基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用3906H基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

公开(公告)号：CN115386561A

公开(公告)日：2022-11-25

申请号：CN202210501552.5

申请日：2022-05-09

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  祁巍巍 ,  陈璇 ,  余坦特

IPC: C12N9/36 ,  C12N15/56 ,  C12N15/84 ,  C12N15/64 ,  A01H6/46 ,  A01H5/10

Abstract: 本发明涉及一种人源溶菌酶蛋白基因、其表达载体的构建方法及其应用，本发明运用PTF102载体与经过玉米密码子优化后人工合成的人源溶菌酶基因片段进行连接，通过农杆菌介导的玉米幼胚转化实验获得了表达人源溶菌酶蛋白的独立转基因事件。通过对后代样本进行生化成分的分析，发现人源溶菌酶蛋白可以在胚乳中稳定的表达，并且能够在成熟籽粒的胚乳中积累。经过密码子优化后的人源溶菌酶蛋白具有抑菌活性，对革兰氏阳性菌有明显的抑菌作用，而对革兰氏阴性菌的抑制作用不明显。

公开(公告)号：CN107400706B

公开(公告)日：2020-11-24

申请号：CN201710363434.1

申请日：2017-05-22

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  冯帆 ,  祁巍巍 ,  唐远平

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种扩增检测玉米opaque11基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该opaque11基因左侧DNA片段的一对特异性引物SSR946的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GTGCCTGATAAAGAAGCTGG；反向引物从5′端至3′端为：GAAAAAAATCGCTATGGCTAA；扩增该opaque10基因右侧DNA片段的一对特异性引物SSR456的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GCTAGGTCGTCGGAAGTT；反向引物从5′端至3′端为：ATGCCAGTATGAATGAGTGA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中opaque11基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用opaque11基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

公开(公告)号：CN108660242A

公开(公告)日：2018-10-16

申请号：CN201810400094.X

申请日：2018-04-28

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  卢磊 ,  许利明 ,  冯旭珍 ,  程丽军 ,  祁巍巍 ,  唐远平

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种扩增检测玉米dek10基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该dek10基因左侧DNA片段的一对特异性引物AC204.28的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：TGACGATGGTCCTTGATTCT；反向引物从5′端至3′端为：CCGTGGTCCGTAGCTC；扩增该dek10基因右侧DNA片段的一对特异性引物GM168.7的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：GTTTCACTTTCTACCCTCGC；反向引物从5′端至3′端为：ATTAATTAAGAACTGCAGCAGGA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中dek10基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用dek10基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

公开(公告)号：CN108411025A

公开(公告)日：2018-08-17

申请号：CN201810401187.4

申请日：2018-04-28

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  闫书美 ,  陈修足 ,  栾盛超 ,  仝红阳 ,  祁巍巍 ,  唐远平

IPC: C12Q1/6895 ,  C12N15/11

Abstract: 本发明涉及一种扩增检测玉米dek33基因用分子标记的特异性引物组及其应用。该特异性引物组中扩增该dek33基因左侧DNA片段的一对特异性引物AC208.4的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：CTACAGGAAGAGCACAAGCG；反向引物从5′端至3′端为：GGCAGAAGAACGACAAGGAA；扩增该dek33基因右侧DNA片段的一对特异性引物AC211.14的碱基序列为：正向引物从5′端至3′端为：AAATCAACGGGGAGAGCCG；反向引物从5′端至3′端为：GGTCGGACACACATTGGTTA。利用这两对特异性引物组能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中dek33基因的存在与否以及杂合或纯合状态。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用dek33基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

公开(公告)号：CN106084019A

公开(公告)日：2016-11-09

申请号：CN201610277276.3

申请日：2016-05-01

Applicant: 上海大学

Inventor： 王桂凤 ,  王佳佳 ,  孙晓亮 ,  韩亮 ,  王刚 ,  宋任涛

IPC: C07K14/415 ,  C07K1/14

Abstract: 本发明涉及一种玉米胚乳蛋白体的分离方法。步骤如下：将授粉20‑25天的新鲜玉米籽粒液氮研磨至粉末，重悬于溶液A(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl,5 mM MgCl2,7.2% sucrose,add 1 mM DTT,1mM PMSF and 罗氏混合蛋白酶抑制剂)，300 g离心30分钟去除细胞碎片，上清经2轮粗级不连续蔗糖密度梯度(1.0 M/L→1.5 M/L→2.0 M/L)离心，取1.5 M→2.0 M蔗糖界面的组分2倍溶液B(10 mM Tris‑HCl pH 8.5,10 mM KCl)稀释后，经2轮细级不连续蔗糖密度梯度(40% w/w → 45% → 50% → 55% → 60%)离心，取50%‑55%之间的组分2倍溶液B稀释后，经30‑60%连续密度梯度离心，收集第14层组分10倍溶液B稀释，13 000 rpm 离心15 min去除蔗糖后，得到高纯活性蛋白体。本方法提取纯度极高且保持生物活性，为利用蛋白体生物反应器生产活性物质提供了重要技术手段。

公开(公告)号：CN105441459A

公开(公告)日：2016-03-30

申请号：CN201511002504.8

申请日：2015-12-29

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  乔祯逸 ,  王茜 ,  金颖 ,  祁巍巍 ,  梅冰 ,  唐远平

IPC: C12N15/29 ,  C12N15/63 ,  C12N1/19 ,  C12N15/10

CPC classification number: C07K14/415 ,  C12N15/102

Abstract: 本发明涉及一种玉米转录因子ZmMADS47基因及其应用。该基因为SEQ ID NO：1所示的碱基序列。该序列编码的蛋白可与bZIP类转录因子Opaque2发生蛋白互作。利用RNA干扰技术将ZmMADS47基因片段转化玉米幼胚，并获得基因沉默的转基因植株。相对野生型籽粒而言，RNAi转基因玉米籽粒含有较小且不规则的蛋白体，以及α醇溶蛋白与50kD醇溶蛋白含量下降。

公开(公告)号：CN105316338A

公开(公告)日：2016-02-10

申请号：CN201510826510.9

申请日：2015-11-25

Applicant: 上海大学

Inventor： 宋任涛 ,  张伟 ,  田忠瑞 ,  祁巍巍 ,  梅冰 ,  唐远平

IPC: C12N15/113 ,  C12N15/10 ,  C12N1/21 ,  C12N15/82

Abstract: 本发明涉及一种玉米胚乳特异表达启动子PMAP启动子、其克隆方法及其应用。本发明首次分离到一个可在玉米胚乳中特异性表达的启动子——plasma membrane associated protein (PMAP)启动子。该启动子具有SEQ ID NO.1所示的核苷酸序列，或该序列经取代、缺失和／或添加一个或几个核苷酸且具有同等功能的由其衍生的核苷酸序列。本发明从克隆玉米胚乳特异表达启动子PMAP启动子入手，通过对PMAP启动子的功能分析，从实验水平验证了该启动子适用于启动目标基因在玉米胚乳中特异性表达，而在其他组织中低表达或不表达。为植物基因工程表达载体构建提供了合适的调控元件，为实验室其他课题的研究进行提供了新的材料。

公开(公告)号：CN103695550A

公开(公告)日：2014-04-02

申请号：CN201310718089.0

申请日：2013-12-24

Applicant: 上海大学

Inventor： 王桂凤 ,  王芳 ,  钟鸣宇 ,  王佳佳 ,  王刚 ,  宋任涛 ,  许政暟

IPC: C12Q1/68 ,  C12N15/11

CPC classification number: C12Q1/6895 ,  C12Q2600/156

Abstract: 本发明涉及一种玉米Opaque1基因的分子标记及其应用。该分子标记是通过PCR扩增特异性引物，得到的一种共显性分子标记MYO-PD，所述的特异性引物为SEQIDNO.1～SEQIDNO.2所示的碱基序列。利用这个与o1基因完全连锁的分子标记能对玉米任何时期和任何组织的DNA进行基因型鉴定，检测杂交育种子代各单株中o1基因的存在与否以及杂合或纯合状态。同时，利用这个分子标记能区分突变体与10种国内主要育种亲本，能够在任何育种背景群体中准确检测到o1基因的存在，且错选率为0。这种检测方法的准确性高，操作简单，为利用o1基因的DNA分子标记辅助育种提供重要的技术手段。

公开(公告)号：CN102612890B

公开(公告)日：2013-10-16

申请号：CN201210102312.4

申请日：2012-04-09

Applicant: 上海大学

Inventor： 李平 ,  高超 ,  李芸 ,  王珊珊 ,  宋任涛 ,  许政暟

IPC: A01C1/00

Abstract: 本发明公开了一种提高玉米种子活力和抗寒能力的方法。玉米种子按常规方法表面消毒后，清水洗净，18-30℃浸种12-24小时，所用浸种液为5-10μg/ml Hrf蛋白溶液。然后按常规方法播种。本发明使用的浸种方法简单易行，纯生物制剂绿色环保，无农药或化学试剂污染，是理想的浸种液及浸种处理方法。