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公开(公告)号：CN112011495A
公开(公告)日：2020-12-01
申请号：CN202010631515.7
申请日：2020-07-03
Applicant: 江南大学 , 江苏汉光生物工程有限公司
Abstract: 本发明公开了一种表达嗜热菌蛋白酶突变体的重组大肠杆菌及其应用，本发明使用大肠杆菌表达含嗜热脂肪芽孢杆菌(Bacillus thermoproteolyticus)来源的嗜热菌蛋白酶Npr的突变体，突变体Npr-115M2的全细胞催化体系酶活为17U/mL，较突变前提高了55％。后续利用大肠杆菌BL21表达Npr-115M2，并进行全细胞转化合成阿斯巴甜前体苄氧羰基阿斯巴甜的温度优化，底物苄氧羰基天冬氨酸和苯丙氨酸甲酯在反应温度为34℃时的转化率为70％，最终得到的阿斯巴甜产率在95％以上。
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公开(公告)号：CN108018325B
公开(公告)日：2020-10-09
申请号：CN201710728461.4
申请日：2017-08-23
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种提高谷胱甘肽产量的方法，包括以下步骤：将巴斯德毕赤酵母(Pichiapastoris)JQ在种子培养基中培养至OD600达到1.0‑40.0，得到活化后的种子液，其中种子培养基的pH为3.0‑7.0；将活化后的种子液按1‑15％接种量接种至发酵培养基中进行发酵培养，其中发酵培养基的初始pH值为4.0‑7.0，发酵培养温度为25‑35℃；当发酵培养至OD600达到40‑80时，开始补加葡萄糖；继续发酵培养，当OD600达到100‑300时，补加氨基酸和/或氨基酸盐，其中氨基酸在发酵培养基中的终浓度为1‑50mmol/L。本发明还提供了上述方法在制备含谷胱甘肽的产品中的应用。采用本发明的方法可使谷胱甘肽产量达3369mg/L，与对照菌株相比，谷胱甘肽产量提高了15倍，说明利用此方法可以大大提高谷胱甘肽产量，为其工业化生产提供基础。
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公开(公告)号：CN111662857A
公开(公告)日：2020-09-15
申请号：CN202010537846.4
申请日：2020-06-12
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种人工甲基营养型枯草芽孢杆菌及其构建方法，本发明选用B.subtilis WB600通过异源表达Mdh构建了人工甲基营养型枯草芽孢杆菌，使其具有了利用甲醇的能力，并通过对甲醇代谢途径关键酶的表达进行调控，包括Mdh和Hps的RBS优化、表达质粒上5'-UTR突变的引入、Ndh的强化表达循环再生Mdh辅因子NAD+、质粒与基因组双表达系统以及基因组表达启动子的优化这几项策略，使人工甲基营养型枯草芽孢杆菌在含有甲醇的培养基中OD600增加34.74％，达到6.84。甲醇消耗量提高了38.79％，达4.09g/L。同时甲醛积累量降低26.83％，为3.05mg/L。
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公开(公告)号：CN111621457A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010531415.7
申请日：2020-06-11
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高效合成丙酮酸与D-丙氨酸的工程菌及其构建方法与应用。本发明在基因工程菌株BLK07(pET20b-pm1)的基础上，通过定点饱和突变筛选到了pm1酶活提高的菌株，并通过在pm1基因序列N端插入N端编码序列(NCS)，提高了pm1的蛋白表达量，提高了丙酮酸的产量，显著缩短了催化时间，提高了催化效率。当底物D,L-丙氨酸浓度为110g/L，细胞浓度为4g/L，催化体系在摇瓶中37℃、220rpm只催化8h时，丙酮酸的产量即可达到最大值46.5g/L，L-丙氨酸的转化率为84.5％，D/L-丙氨酸的拆分率达到84.5％。
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公开(公告)号：CN111616403A
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN202010470434.3
申请日：2020-05-28
Applicant: 江南大学 , 四川中烟工业有限责任公司
IPC: A24B15/20
Abstract: 发明公开了一种加速烟叶醇化及提升烟叶品质的生物制剂及其应用，属于烟草醇化技术领域。本发明从醇化烟叶上分离获得一株能产多种酶的解淀粉芽孢杆菌(Bacillusamyloliquefaciens)。该菌株适合烤烟发酵，有利于促进不同香型、品质的烟叶醇化过程，提高品质，缩短醇化时间。本发明菌株易培养、生长速度快，能够耐受苛条件、高活性、能产多种酶具备降解高分子物质的能力等特点。通过适当调节生物制剂处理烟叶的条件，可获得降低烟叶刺激性、减弱杂气、增加甜味等效果。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111394410A
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN202010238268.4
申请日：2020-03-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种高催化活性神经氨酸合酶及应用，属于遗传工程领域。本发明通过筛选不同来源的N-乙酰神经氨酸合酶，并以5个不同强度启动子优化N-乙酰神经氨酸合酶在基因组上的表达水平，将最佳表达强度的NeuB整合到可以合成NeuAc前体物质ManNAc的菌株中，提高了枯草芽孢杆菌的N-乙酰神经氨酸产量使N-乙酰神经氨酸在摇瓶中产量达到7.6g/L。
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公开(公告)号：CN109486794B
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201811484682.2
申请日：2018-12-06
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种酶活提高的甲壳素酶突变体，属于基因工程和酶工程技术领域。本发明通过定点突变的方式，将甲壳素酶分子催化结构域附近的第43位半胱氨酸突变为天冬氨酸，第273位苯丙氨酸突变为色氨酸、第336位谷氨酸突变为精氨酸，显著提高了菌株表达甲壳素酶的酶活力，其中单突变株F273W和E336R较出发菌株酶活分别提高了1.37倍和1.22倍。改造后的菌株产酶能力和催化效率都得到了提高，通过HPLC检测纯化后突变体中几丁寡糖的含量发现，催化3h，F273W突变株产糖量为1.65g/L，其中GlcNAc为0.12g/L，(GlcNAc)2为1.53g/L，相比野生菌株提高了49.7％。
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公开(公告)号：CN111172091A
公开(公告)日：2020-05-19
申请号：CN202010096078.3
申请日：2020-02-17
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种5-甲基四氢叶酸产量提高的枯草芽孢杆菌及其应用，属于基因工程领域。本发明通过代谢改造对DHF合成途径进行强化，增加前体供给；再通过将dCas9蛋白整合到枯草芽孢杆菌基因组中，并诱导表达dCas9蛋白与关键基因序列中的sgRNA结合，阻断前体供给途径、竞争途径及分解代谢途径中的关键基因的转录起始，使基因表达水平下调，得到的一株高产5-MTHF的重组菌株，产量达到1.58mg/L，是出发菌株的3.9倍，为枯草芽孢杆菌代谢工程高效生产5-MTHF奠定了基础。
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公开(公告)号：CN111004762A
公开(公告)日：2020-04-14
申请号：CN201911358303.X
申请日：2019-12-25
Applicant: 江南大学 , 山东润德生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及一种提高乙酰氨基葡萄糖产量的重组谷氨酸棒杆菌，该重组谷氨酸棒杆菌通过敲除谷氨酸棒杆菌的L-乳酸脱氢酶的编码基因ldh得到；重组谷氨酸棒杆菌中还表达有来源于秀丽隐杆线虫的氨基葡萄糖脱乙酰化酶编码基因GNA1。本发明的重组谷氨酸棒杆菌发酵葡萄糖72h的乙酰氨基葡萄糖产量可高达28.6g/L。
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公开(公告)号：CN105274153B
公开(公告)日：2020-02-18
申请号：CN201510812799.9
申请日：2015-11-20
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高土曲霉发酵生产衣康酸产量的方法，属于生物工程技术领域。本发明方法利用黑曲霉来源的酸诱导的启动子，在土曲霉中引入黑曲霉的侧呼吸链蛋白AOX，增强胞内NAD+库的供给，进而增强糖酵解途径，从而提高衣康酸的产量。本发明方法得到的重组土曲霉菌株，其衣康酸产量提高了20％左右，达到60g/L。本发明为衣康酸的生产提供了新思路。
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