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公开(公告)号：CN111684067A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN201880080998.7
申请日：2018-06-21
Applicant: 三井化学株式会社 , 国立大学法人富山大学
Abstract: 本发明的课题在于提供能够使用PCR法迅速且精度良好地定量被检样品中的细菌菌数的方法。作为解决上述课题的方法，利用以下的工序进行被检样品中的细菌的鉴定及定量。(1)第一PCR工序，以来源于被检样品的核酸作为模板，使用用于扩增细菌的16S rRNA基因的通用引物对，利用PCR法得到第一扩增产物；(2)第二PCR工序，使用用于扩增利用前述第一PCR工序得到的第一扩增产物所具有的序列的内部序列的引物对，利用巢式PCR法得到第二扩增产物；以及(3)菌数定量工序，使用校准用的数据，从由前述第二PCR工序得到的第二扩增产物的量求出前述被检样品中的细菌数。另外，也可以在上述的工序(1)～(3)的基础上追加以下的工序(4)及(5)。(4)菌种鉴定工序，对前述被检样品中的细菌的菌种进行鉴定。(5)细菌数校正工序，以由前述菌数定量工序求出的细菌数作为暂定细菌数，基于前述对照细菌及由前述菌种鉴定工序鉴定出的菌种的16S rRNA操纵子拷贝数来校正暂定细菌数，从而确定前述被检样品中的细菌数。
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公开(公告)号：CN102282257B
公开(公告)日：2015-04-01
申请号：CN201080004647.1
申请日：2010-01-15
Applicant: 北海道三井化学株式会社 , 国立大学法人富山大学
IPC: C12N15/09
CPC classification number: C12Q1/689 , C12N9/1252 , C12P19/34 , C12Q1/68 , C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Y207/07007
Abstract: 根据本发明能够提供一种耐热性DNA聚合酶制品，所述制品在利用基因扩增反应的样品微生物的检测中无限地降低假阳性的风险，因此即使在样品微生物的量较少、从其中提取的DNA也为微量的情况下也能够对用于样品微生物检测的DNA进行选择性扩增，并且可以降低制造成本。进而，能够提供一种使用本发明的制品迅速·简便地以高灵敏度对检测对象生物进行定量或定量鉴定的方法。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105612254B
公开(公告)日：2020-06-23
申请号：CN201480055468.9
申请日：2014-10-07
Applicant: 三井化学株式会社
Abstract: 本发明的目的在于，提供对于进一步提高利用PCR法检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的灵敏度有用的引物组，使用了其的用于PCR的试剂盒及检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法，以及通过使细菌来源的核酸的混入量为最小限度、并进行使用了上述的引物组的PCR法，从而达成检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法的灵敏度的进一步的提高。为了达成上述目的，本发明涉及的用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组包含：从包含特定的引物对的第S1组～第S7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。此外，本发明涉及的用于检出细菌菌种的试剂盒包含：从包含特定的引物对的第K1组～第K7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。
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公开(公告)号：CN105612254A
公开(公告)日：2016-05-25
申请号：CN201480055468.9
申请日：2014-10-07
Applicant: 三井化学株式会社
Abstract: 本发明的目的在于，提供对于进一步提高利用PCR法检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的灵敏度有用的引物组，使用了其的用于PCR的试剂盒及检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法，以及通过使细菌来源的核酸的混入量为最小限度、并进行使用了上述的引物组的PCR法，从而达成检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法的灵敏度的进一步的提高。为了达成上述目的，本发明涉及的用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组包含：从包含特定的引物对的第S1组～第S7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。此外，本发明涉及的用于检出细菌菌种的试剂盒包含：从包含特定的引物对的第K1组～第K7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。
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公开(公告)号：CN102282257A
公开(公告)日：2011-12-14
申请号：CN201080004647.1
申请日：2010-01-15
Applicant: 北海道三井化学株式会社 , 国立大学法人富山大学
CPC classification number: C12Q1/689 , C12N9/1252 , C12P19/34 , C12Q1/68 , C12Q1/686 , C12Q1/6895 , C12Y207/07007
Abstract: 根据本发明能够提供一种耐热性DNA聚合酶制品，所述制品在利用基因扩增反应的样品微生物的检测中无限地降低假阳性的风险，因此即使在样品微生物的量较少、从其中提取的DNA也为微量的情况下也能够对用于样品微生物检测的DNA进行选择性扩增，并且可以降低制造成本。进而，能够提供一种使用本发明的制品迅速简便地以高灵敏度对检测对象生物进行定量或定量鉴定的方法。
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公开(公告)号：CN111534623B
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202010497413.0
申请日：2014-10-07
Applicant: 三井化学株式会社
Abstract: 本发明涉及用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组及其试剂盒和方法。本发明的目的在于，提供对于进一步提高利用PCR法检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的灵敏度有用的引物组，使用了其的用于PCR的试剂盒及检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法，以及达成该方法的灵敏度的进一步的提高。为了达成上述目的，本发明涉及的用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组包含：从包含特定的引物对的第S1组～第S7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。此外，本发明涉及的用于检出细菌菌种的试剂盒包含：从包含特定的引物对的第K1组～第K7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。
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公开(公告)号：CN111534623A
公开(公告)日：2020-08-14
申请号：CN202010497413.0
申请日：2014-10-07
Applicant: 三井化学株式会社
Abstract: 本发明涉及用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组及其试剂盒和方法。本发明的目的在于，提供对于进一步提高利用PCR法检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的灵敏度有用的引物组，使用了其的用于PCR的试剂盒及检出或鉴定被检样品中的细菌菌种的方法，以及达成该方法的灵敏度的进一步的提高。为了达成上述目的，本发明涉及的用于扩增细菌DNA的PCR中使用的引物组包含：从包含特定的引物对的第S1组～第S7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。此外，本发明涉及的用于检出细菌菌种的试剂盒包含：从包含特定的引物对的第K1组～第K7组的各组中分别选择1对引物对而得到的7对引物对中的至少1对引物对。
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