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公开(公告)号:CN101149355B
公开(公告)日:2010-07-21
申请号:CN200710144578.4
申请日:2007-11-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N27/447 , G01N21/00 , G01N33/04 , C12Q1/02
Abstract: 一种检测牛乳中沙门氏菌的方法,它涉及一种检测牛乳中细菌的方法。它解决了传统的沙门氏菌检验方法存在繁琐、费时费力、特异性低的缺陷及现有的PCR技术或LAMP技术必需预增菌,无法快速检测牛乳的问题。检测方法:一、牛乳脱脂;二、加入EDTA溶液水浴;三、过滤;四、提取样品DNA;五、LAMP扩增;六、鉴定。本发明方法简单、省时,检测操作仅需约3小时,大大的提高了被检牛乳产品的新鲜度和货架期;而且本发明方法不需要预增菌,具有快速灵敏的优点。本发明方法利用沙门氏菌特异性引物,采用优化的LAMP反应系统,成功地以沙门氏菌invA基因为靶基因进行扩增,特异性强,准确率高达99.6%。
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公开(公告)号:CN100577817C
公开(公告)日:2010-01-06
申请号:CN200710144570.8
申请日:2007-11-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法,它属于基础生物学及医学领域。本发明解决了DNA残留,及菌体生长过程中管家基因表达不稳定和当PCR效率不高或多种基因间PCR效率差别较大时,所分析出的结果误差较大,致使现有基因表达相对定量在实际应用中具有一定局限性的问题。本发明的分析方法是将RNA提取物中的并存DNA作为内标,制备RT、RT-样品,通过相对定量公式计算出原核生物基因表达量,其中Q表示目的基因的表达量,Q'表示参照基因的表达量,,,,Ct值是指荧光信号达到阈值时的循环数,RT表示反转录,RT-表示非反转录。本发明具有过程简单、易操作、一次性可进行大量样品检测、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN118600088A
公开(公告)日:2024-09-06
申请号:CN202410826367.2
申请日:2024-06-25
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记及其应用,属于植物育种技术领域。为了快速、准确的筛选出叶片蔗糖含量高的大豆品种。本发明提供一种大豆叶片蔗糖含量相关的分子标记,所述分子标记的基因为Glyma.14G029100,且在2131531位上的核苷酸位点为T或C。该标记在实际生产过程中具有很高的实用价值,可以在苗期时对材料进行早期筛选,有助于缩短育种时间,但单一标记的效应有限,后期可开发更多相关的分子标记辅助选育优良大豆种质。
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公开(公告)号:CN101386884B
公开(公告)日:2011-07-27
申请号:CN200810137442.5
申请日:2008-10-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法,它涉及了一种检测原料乳中细菌的方法。本发明解决了现有检测原料乳中致病菌的方法中存在不能同时检测多种致病菌、耗时长、费用高或不适用于检测牛乳的问题。本发明同时检测原料乳中多种致病菌的方法按照如下步骤进行:一、将待检测的原料乳去除脂肪;二、将步骤一保温后的样品过滤;三、收集洗脱液;四、进行多重PCR并对凝胶成像系统进行分析;即得到检测结果。本发明的试剂盒由Taq酶溶液、多重PCR反应液、阴性对照液和阳性对照液组成。本发明的方法具有耗时短、费用低、适用于检测牛乳和检测结果准确的优点。本发明的试剂盒使用方便。
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公开(公告)号:CN101386884A
公开(公告)日:2009-03-18
申请号:CN200810137442.5
申请日:2008-10-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法及检测试剂盒,它涉及了一种检测原料乳中细菌的方法及检测试剂盒。本发明解决了现有检测原料乳中致病菌的方法中存在不能同时检测多种致病菌、耗时长、费用高或不适用于检测牛乳的问题。本发明同时检测原料乳中多种致病菌的方法按照如下步骤进行:一、将待检测的原料乳去除脂肪;二、将步骤一保温后的样品过滤;三、收集洗脱液;四、进行多重PCR并对凝胶成像系统进行分析;即得到检测结果。本发明的试剂盒由Taq酶溶液、多重PCR反应液、阴性对照液和阳性对照液组成。本发明的方法具有耗时短、费用低、适用于检测牛乳和检测结果准确的优点。本发明的试剂盒使用方便。
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公开(公告)号:CN101168776A
公开(公告)日:2008-04-30
申请号:CN200710144570.8
申请日:2007-11-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法,它属于基础生物学及医学领域。本发明解决了DNA残留,及菌体生长过程中管家基因表达不稳定和当PCR效率不高或多种基因间PCR效率差别较大时,所分析出的结果误差较大,致使现有基因表达相对定量在实际应用中具有一定局限性的问题。本发明的分析方法是将RNA提取物中的并存DNA作为内标,制备RT、RT-样品,通过相对定量公式计算出原核生物基因表达量,其中Q表示目的基因的表达量,Q′表示参照基因的表达量,ΔCt=CtRT-CtRT-,ΔCt′= CtRT′-CtRT-′,E=10[-1/slope]-1,Ct值是指荧光信号达到阈值时的循环数,RT表示反转录,RT-表示非反转录。本发明具有过程简单、易操作、一次性可进行大量样品检测、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点。
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公开(公告)号:CN101149355A
公开(公告)日:2008-03-26
申请号:CN200710144578.4
申请日:2007-11-09
Applicant: 东北农业大学
IPC: G01N27/447 , G01N21/00 , G01N33/04 , C12Q1/02
Abstract: 一种检测牛乳中沙门氏菌的方法,它涉及一种检测牛乳中细菌的方法。它解决了传统的沙门氏菌检验方法存在繁琐、费时费力、特异性低的缺陷及现有的PCR技术或LAMP技术必需预增菌,无法快速检测牛乳的问题。检测方法:一、牛乳脱脂;二、加入EDTA溶液水浴;三、过滤;四、提取样品DNA;五、LAMP扩增;六、鉴定。本发明方法简单、省时,检测操作仅需约3小时,大大的提高了被检牛乳产品的新鲜度和货架期;而且本发明方法不需要预增菌,具有快速灵敏的优点。本发明方法利用沙门氏菌特异性引物,采用优化的LAMP反应系统,成功地以沙门氏菌invA基因为靶基因进行扩增,特异性强,准确率高达99.6%。
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