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公开(公告)号：CN100577817C
公开(公告)日：2010-01-06
申请号：CN200710144570.8
申请日：2007-11-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法，它属于基础生物学及医学领域。本发明解决了DNA残留，及菌体生长过程中管家基因表达不稳定和当PCR效率不高或多种基因间PCR效率差别较大时，所分析出的结果误差较大，致使现有基因表达相对定量在实际应用中具有一定局限性的问题。本发明的分析方法是将RNA提取物中的并存DNA作为内标，制备RT、RT-样品，通过相对定量公式计算出原核生物基因表达量，其中Q表示目的基因的表达量，Q'表示参照基因的表达量，，，，Ct值是指荧光信号达到阈值时的循环数，RT表示反转录，RT-表示非反转录。本发明具有过程简单、易操作、一次性可进行大量样品检测、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN101260423A
公开(公告)日：2008-09-10
申请号：CN200810064397.5
申请日：2008-04-28
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种检测单核细胞增生李斯特活菌的方法，它涉及一种检测李斯特菌的方法。本发明解决了现有检测单增李斯特活菌的方法容易产生假阳性的问题。本发明检测单核细胞增生李斯特菌的方法按如下步骤进行：从待测物品中提取菌泥后提取RNA进行反转录及实时PCR；即得到可以判断待测物品是否含有单增李斯特活菌的图谱。本发明具有灵敏度高，特异性好，操作简便，周期较短的优点，适应食品工业中致病菌快速检测的需求。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN101196463A
公开(公告)日：2008-06-11
申请号：CN200710144833.5
申请日：2007-12-14
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种动物源性成分的鉴别方法，它涉及一种食品成分的鉴别方法。它解决了目前动物源性成分鉴别的方法存在检测灵敏度低和无法检测热加工处理的肉制品的缺陷。动物源性成分按以下方法鉴别：提取待鉴别动物源性样品DNA，PCR检测和凝胶电泳；即可鉴别动物源性样品的成分。本发明动物源性成分的鉴别方法检测灵敏度高，鉴别检数限可在1％以下。本发明动物源性成分的鉴别方法可检测经热加工处理的肉制品、混合肉制品和骨粉制品，鉴别检数限同样达1％以下。本发明动物源性成分的鉴别方法在鉴别过程中不使用液氮，不但降低了成本，也提高了操作的安全性。
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公开(公告)号：CN101168776A
公开(公告)日：2008-04-30
申请号：CN200710144570.8
申请日：2007-11-07
Applicant: 东北农业大学
IPC: C12Q1/68
Abstract: 一种利用实时荧光反转录PCR分析原核生物基因表达的相对定量方法，它属于基础生物学及医学领域。本发明解决了DNA残留，及菌体生长过程中管家基因表达不稳定和当PCR效率不高或多种基因间PCR效率差别较大时，所分析出的结果误差较大，致使现有基因表达相对定量在实际应用中具有一定局限性的问题。本发明的分析方法是将RNA提取物中的并存DNA作为内标，制备RT、RT－样品，通过相对定量公式计算出原核生物基因表达量，其中Q表示目的基因的表达量，Q′表示参照基因的表达量，ΔCt＝CtRT－CtRT－，ΔCt′＝ CtRT′－CtRT－′，E＝10[－1/slope]－1，Ct值是指荧光信号达到阈值时的循环数，RT表示反转录，RT－表示非反转录。本发明具有过程简单、易操作、一次性可进行大量样品检测、结果直观、敏感性高、特异性强、重复性好等优点。
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公开(公告)号：CN101386884B
公开(公告)日：2011-07-27
申请号：CN200810137442.5
申请日：2008-10-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法，它涉及了一种检测原料乳中细菌的方法。本发明解决了现有检测原料乳中致病菌的方法中存在不能同时检测多种致病菌、耗时长、费用高或不适用于检测牛乳的问题。本发明同时检测原料乳中多种致病菌的方法按照如下步骤进行：一、将待检测的原料乳去除脂肪；二、将步骤一保温后的样品过滤；三、收集洗脱液；四、进行多重PCR并对凝胶成像系统进行分析；即得到检测结果。本发明的试剂盒由Taq酶溶液、多重PCR反应液、阴性对照液和阳性对照液组成。本发明的方法具有耗时短、费用低、适用于检测牛乳和检测结果准确的优点。本发明的试剂盒使用方便。
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公开(公告)号：CN101196463B
公开(公告)日：2010-10-27
申请号：CN200710144833.5
申请日：2007-12-14
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种动物源性成分的鉴别方法，它涉及一种食品成分的鉴别方法。它解决了目前动物源性成分鉴别的方法存在检测灵敏度低和无法检测热加工处理的肉制品的缺陷。动物源性成分按以下方法鉴别：提取待鉴别动物源性样品DNA，PCR检测和凝胶电泳；既可鉴别动物源性样品的成分。本发明动物源性成分的鉴别方法检测灵敏度高，鉴别检数限可在1％以下。本发明动物源性成分的鉴别方法可检测经热加工处理的肉制品、混合肉制品和骨粉制品，鉴别检数限同样达1％以下。本发明动物源性成分的鉴别方法在鉴别过程中不使用液氮，不但降低了成本，也提高了操作的安全性。
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公开(公告)号：CN101386884A
公开(公告)日：2009-03-18
申请号：CN200810137442.5
申请日：2008-10-31
Applicant: 东北农业大学
Abstract: 一种同时检测原料乳中多种致病菌的方法及检测试剂盒，它涉及了一种检测原料乳中细菌的方法及检测试剂盒。本发明解决了现有检测原料乳中致病菌的方法中存在不能同时检测多种致病菌、耗时长、费用高或不适用于检测牛乳的问题。本发明同时检测原料乳中多种致病菌的方法按照如下步骤进行：一、将待检测的原料乳去除脂肪；二、将步骤一保温后的样品过滤；三、收集洗脱液；四、进行多重PCR并对凝胶成像系统进行分析；即得到检测结果。本发明的试剂盒由Taq酶溶液、多重PCR反应液、阴性对照液和阳性对照液组成。本发明的方法具有耗时短、费用低、适用于检测牛乳和检测结果准确的优点。本发明的试剂盒使用方便。
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