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公开(公告)号:CN106543277B
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201610926894.6
申请日:2016-10-31
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。
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公开(公告)号:CN106543277A
公开(公告)日:2017-03-29
申请号:CN201610926894.6
申请日:2016-10-31
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。
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公开(公告)号:CN114292337B
公开(公告)日:2023-07-14
申请号:CN202111553464.1
申请日:2021-12-17
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性NK‑CAR融合蛋白及制备方法和在介导免疫细胞靶向杀肿瘤细胞药物中应用,所述融合蛋白包括从氨基端至羧基端由MICA胞外区、单链抗体和人IgG Fc端三部分构成。将编码该蛋白核苷酸序列插入真核表达载体中,转染至HEK293悬浮细胞进行蛋白表达,再通过SPA柱纯化,该蛋白在水溶液中呈二聚体状态,其CD20单链抗体可以结合靶细胞上的CD20抗原,MICA端与NK细胞上的NKG2D受体结合激活NK细胞发挥特异性杀伤靶细胞作用,本发明为开发介导NK细胞和CD8+T细胞特异性杀伤肿瘤靶细胞的生物药物与应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN105907783B
公开(公告)日:2019-06-18
申请号:CN201610274268.3
申请日:2016-04-28
Applicant: 中南大学
Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL‑ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。
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公开(公告)号:CN114292337A
公开(公告)日:2022-04-08
申请号:CN202111553464.1
申请日:2021-12-17
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种可溶性NK‑CAR融合蛋白及制备方法和在介导免疫细胞靶向杀肿瘤细胞药物中应用,所述融合蛋白包括从氨基端至羧基端由MICA胞外区、单链抗体和人IgG Fc端三部分构成。将编码该蛋白核苷酸序列插入真核表达载体中,转染至HEK293悬浮细胞进行蛋白表达,再通过SPA柱纯化,该蛋白在水溶液中呈二聚体状态,其CD20单链抗体可以结合靶细胞上的CD20抗原,MICA端与NK细胞上的NKG2D受体结合激活NK细胞发挥特异性杀伤靶细胞作用,本发明为开发介导NK细胞和CD8+T细胞特异性杀伤肿瘤靶细胞的生物药物与应用奠定基础。
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公开(公告)号:CN105907783A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610274268.3
申请日:2016-04-28
Applicant: 中南大学
CPC classification number: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N2800/107
Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL?ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。
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