靶向清除allo-B淋巴细胞的CAR-T细胞的构建方法及其应用

    公开(公告)号:CN117987374A

    公开(公告)日:2024-05-07

    申请号:CN202311792446.8

    申请日:2023-12-25

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞的构建方法和应用,属于移植排斥治疗领域。本发明结合第二代CAR结构,构建靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞。Allo‑B细胞的BCR可与上述构建的靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞结合,可通过CAR‑T细胞的作用特异性杀伤产生抗HLA抗体的Allo‑B淋巴细胞。本发明制备的CAR‑T细胞通过减轻或消除抗HLA抗体介导的移植排斥反应,从而实现移植免疫耐受的目的。本发明为开发靶向清除allo‑B淋巴细胞的CAR‑T细胞杀伤Allo‑B细胞在移植排斥领域中的应用奠定基础。

    一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN105907783A

    公开(公告)日:2016-08-31

    申请号:CN201610274268.3

    申请日:2016-04-28

    Applicant: 中南大学

    CPC classification number: C12N15/85 C12N15/65 C12N15/66 C12N2800/107

    Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL?ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。

    一种与移植排斥相关的内皮细胞抗原及其应用、试剂盒

    公开(公告)号:CN106543277A

    公开(公告)日:2017-03-29

    申请号:CN201610926894.6

    申请日:2016-10-31

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。

    靶向Allo-B细胞的HLA-Ⅰ类分子-Fc融合蛋白的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN117866109A

    公开(公告)日:2024-04-12

    申请号:CN202311822339.5

    申请日:2023-12-27

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种靶向Allo‑B细胞的HLA‑Ⅰ类分子‑Fc融合蛋白的构建方法及应用,所述HLA‑Ⅰ类分子‑Fc融合蛋白包括HLA‑Ⅰ类分子的胞外结构域和人IgG1的Fc段两部分。构建HLA‑Ⅰ类分子‑Fc重组质粒,将构建好的HLA‑Ⅰ类分子‑Fc重组质粒转染悬浮HEK293细胞,收集细胞上清,并通过蛋白A层析柱纯化,收集HLA‑Ⅰ类分子‑Fc融合蛋白。该HLA‑Ⅰ类分子‑Fc融合蛋白在结合产生抗HLA‑Ⅰ类分子抗体的allo‑B淋巴细胞的同时,还可通过Fc段结合NK细胞表面的Fc受体,从而介导NK细胞杀伤分泌HLA‑Ⅰ类分子抗体的allo‑B淋巴细胞。本发明为构建HLA‑Ⅰ类分子‑Fc融合蛋白及其在肾移植领域用于杀伤分泌抗HLA‑Ⅰ类分子抗体的allo‑B淋巴细胞奠定了基础。

    用于判断自身免疫性脑炎预后的XGBoost机器学习模型的构建方法及系统

    公开(公告)号:CN118039173A

    公开(公告)日:2024-05-14

    申请号:CN202410237249.8

    申请日:2024-03-01

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明涉及用于判断自身免疫性脑炎预后的XGBoost机器学习模型的构建方法及系统,属于医疗诊断技术领域,包括如下步骤:依据预设筛选标准将患者筛选,提取符合预设筛选标准的临床指标数据,通过XGBoost机器学习算法对处理后的临床指标数据进行XGBoost机器学习模型构建,基于已构建的XGBoost机器学习模型,输入某个患者的临床指标,输出此患者的预后好坏,包括数据采集和存储部分、数据处理部分、XGBoost机器学习模型构建部分、XGBoost机器学习模型性能评估部分、自身免疫性脑炎预后好坏输出显示部分,能快速准确获得对自身免疫性脑炎患者预后好坏的判断,从而能够及时采取预防和治疗措施,避免病情进一步恶化,改善患者预后,减少医疗支出,减轻家庭和社会负担。

    一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用

    公开(公告)号:CN105907783B

    公开(公告)日:2019-06-18

    申请号:CN201610274268.3

    申请日:2016-04-28

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL‑ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。

    一种与移植排斥相关的内皮细胞抗原及其应用、试剂盒

    公开(公告)号:CN106543277B

    公开(公告)日:2020-02-14

    申请号:CN201610926894.6

    申请日:2016-10-31

    Applicant: 中南大学

    Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。

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