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公开(公告)号:CN106543277A
公开(公告)日:2017-03-29
申请号:CN201610926894.6
申请日:2016-10-31
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。
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公开(公告)号:CN105907783B
公开(公告)日:2019-06-18
申请号:CN201610274268.3
申请日:2016-04-28
Applicant: 中南大学
Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7‑hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL‑ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。
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公开(公告)号:CN105907783A
公开(公告)日:2016-08-31
申请号:CN201610274268.3
申请日:2016-04-28
Applicant: 中南大学
CPC classification number: C12N15/85 , C12N15/65 , C12N15/66 , C12N2800/107
Abstract: 一种测试NK细胞活化的受体信号通路NKG2D荧光报告系统的构建方法及应用。A、应用PCR技术获得人NKG2D的胞外区基因序列和鼠NKG2D的跨膜区和胞质区基因序列,再采用重叠PCR技术将人和鼠的NKG2D基因序列连接在一起,将构建的人鼠杂合的NKG2D序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?mhNKG2D。B、应用PCR技术获得人DAP12基因序列,将构建的人DAP12基因序列插入pLXSN16E6E7载体,成载体pLXSN16E6E7?hDAP12。将上述两种载体质粒与逆转录病毒系统的辅助质粒pCL?ECO共转染HEK293T细胞,获得具有再感染小鼠细胞3A9的病毒颗粒。C、将含有病毒颗粒的细胞培养上清感染3A9细胞,经过多次流式分选和再培养,筛选出稳定表达鼠人融合NKG2D和人DAP12的细胞系12A9,可在人的NKG2D配体MICA/MICB刺激下能够激活NKG2D的下游信号,使得GFP蛋白表达,可检测到细胞发绿色荧光。
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公开(公告)号:CN106543277B
公开(公告)日:2020-02-14
申请号:CN201610926894.6
申请日:2016-10-31
Applicant: 中南大学
Abstract: 本发明公开了一种与移植排斥相关的人体内皮细胞移植抗原及其应用和临床检测试剂盒。该内皮细胞抗原为角蛋白1。检测角蛋白1抗体的试剂盒用于评估临床移植排斥的风险和状态。本发明为探究临床器官移植排斥发生的原因与如何预测排斥反应的发生提供新的研究目标,为建立新的临床器官移植风险评估系统提供新思路。
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