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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN106434529A
公开(公告)日：2017-02-22
申请号：CN201610932351.5
申请日：2016-10-25
Applicant: 中南林业科技大学
IPC: C12N5/071
CPC classification number: C12N5/0692 , C12N2501/115 , C12N2501/165 , C12N2501/998
Abstract: 本发明涉及一种内皮祖细胞氧化应激模型的构建方法，将购买的人外周血单个核细胞接种在人纤连蛋白涂层(FN)的培养皿中培养，加入M199培养基，培养箱中培养。3天后洗去未贴壁细胞，添加培养液继续培养，以后每隔3天换培养液。用胰酶消化细胞制成细胞悬液，取适量的内皮祖细胞悬液，加入等体积的氧化低密度脂蛋白，其终浓度为100μg/mL，培养箱中培养24h。将细胞再次用胰酶消化，离心后，细胞样用MTT法测定其生长抑制率，用流式细胞仪测定凋亡情况，并测定活性氧，GSH-Px和线粒体膜电位等代表其氧化应激情况的参数。本发明提供了一种在细胞水平研究抗氧化物质及其机理的模型，且是首次用氧化低密度脂蛋白作为诱导物建立内皮祖细胞氧化应激模型。
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公开(公告)号：CN106636274B
公开(公告)日：2021-06-11
申请号：CN201611071570.5
申请日：2016-11-29
Applicant: 中南林业科技大学
Abstract: 本发明提供了一种米糠谷蛋白来源的生物活性肽，其序列为KHNRGDEF；本发明的活性肽具有抗氧化活性，可用于制备增加抗氧化功效的食品和保健品。本发明从米糠谷蛋白的酶解产物中分离获得一种具有体外抗氧化活性的多肽，通过碱提酸沉法提取粗谷蛋白，之后再分级提取，接着选用离子交换层析和凝胶层析技术对米糠谷蛋白进行分离纯化，再将所得米糠谷蛋白用碱性蛋白酶水解、离心、真空浓缩、冷冻干燥，得到抗氧化活性肽产品，其酶解条件为[E]/[S]1.5%‑1.8%、pH10.0、温度50℃、时间4.2h，之后利用离子交换层析、凝胶层析、制备RP‑HPLC及分析型RP‑HPLC分离纯化得到所需的抗氧化活性肽纯品。本发明生产成本低、工艺简便、绿色环保，所得米糠活性肽具有合理氨基酸组成、低过敏性、安全可靠等特点，且其具有较好的自由基清除能力，具有良好的抗氧化功效。
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公开(公告)号：CN106636274A
公开(公告)日：2017-05-10
申请号：CN201611071570.5
申请日：2016-11-29
Applicant: 中南林业科技大学
CPC classification number: C12P21/06 , C07K14/415
Abstract: 本发明提供了一种米糠谷蛋白来源的生物活性肽，其序列为KHNRGDEF；本发明的活性肽具有抗氧化活性，可用于制备增加抗氧化功效的食品和保健品。本发明从米糠谷蛋白的酶解产物中分离获得一种具有体外抗氧化活性的多肽，通过碱提酸沉法提取粗谷蛋白，之后再分级提取，接着选用离子交换层析和凝胶层析技术对米糠谷蛋白进行分离纯化，再将所得米糠谷蛋白用碱性蛋白酶水解、离心、真空浓缩、冷冻干燥，得到抗氧化活性肽产品，其酶解条件为[E]/[S]1.5%‑1.8%、pH10.0、温度50℃、时间4.2h，之后利用离子交换层析、凝胶层析、制备RP‑HPLC及分析型RP‑HPLC分离纯化得到所需的抗氧化活性肽纯品。本发明生产成本低、工艺简便、绿色环保，所得米糠活性肽具有合理氨基酸组成、低过敏性、安全可靠等特点，且其具有较好的自由基清除能力，具有良好的抗氧化功效。
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