一种特定R-loop结构的检测方法以及检测试剂盒

    公开(公告)号:CN118957040A

    公开(公告)日:2024-11-15

    申请号:CN202411258260.9

    申请日:2024-09-09

    Abstract: 本发明公开了一种特定R‑loop结构的检测方法(DRIRP)以及检测试剂盒,该方法包括如下步骤:步骤一,提取基因组DNA;步骤二,采用S9.6抗体进行R‑loop结构抗体结合,磁珠吸附,洗涤、洗脱,得到细胞整体R‑loop样本;步骤三,针对特定的目标R‑loop结构设计靶向探针;步骤四,于变性后的细胞整体R‑loop样本中加入预处理后的靶向探针,杂交、变性、杂交,磁珠吸附,洗涤、洗脱,纯化得到ssDNA片段,并进行文库构建;步骤五,对构建的文库进行测序处理,并进行分析。本发明的方法针对RNA的特异性片段设计与之互补配对的寡核苷酸探针,该探针能够识别特定RNA并对目标RNA以及其所形成的R‑loop结构进行特异性的富集,从而能够实现对单个或多个特定RNA形成的R‑loop结构进行针对性检测以及高通量测序。

    一种用于临床诊断不明确胆管狭窄的试剂盒

    公开(公告)号:CN115747286A

    公开(公告)日:2023-03-07

    申请号:CN202211251927.3

    申请日:2022-10-13

    Abstract: 本发明涉及医学生物检测领域,具体是一种通过流式细胞术检测胆管刷检样本诊断不明确胆管狭窄的试剂盒及方法。本发明通过流式检测患者胆管刷检样本中B细胞亚群所占比例,诊断指标为浆母细胞(PBs)和记忆性B细胞(MBCs)所占比例的比值,即PBs/MBCs。诊断不明确狭窄患者的试剂盒包括B细胞亚群检测相关试剂。诊断不明确狭窄患者的方法包括以下步骤:1)流式检测患者胆管刷检样本中B细胞亚群的比例,主要为PBs和MBCs;2)与预先设定的PBs/MBCs阈值作比较,高于阈值评定为恶性狭窄,低于阈值评定为良性狭窄。比现有检测手段,本发明是一种全新的更为可靠、灵敏的技术方法。

    血液样本中GPC-3复合物的富集、检测方法及应用

    公开(公告)号:CN114813266A

    公开(公告)日:2022-07-29

    申请号:CN202210251108.2

    申请日:2022-03-15

    Abstract: 本发明提供了血液样本中GPC‑3复合物的富集、检测方法及应用。富集方法包括A、采集肝癌患者外周血置于抗凝管中并混匀全血;B、加入多倍体积的红细胞裂解液,吹打混匀,冰上裂解后,离心弃红色上清,若细胞沉淀仍有红色,重复该步骤;C、洗涤沉淀1‑2次,加入PBS或生理盐水重悬沉淀,离心弃上清;D、白细胞计数,加PBS重悬细胞沉淀,取适量充池,静置2‑3分钟,通过低倍镜四角4个大方格手工白细胞计数,计算公式如下:WBC/L=N/4*105*104,并计算每毫升原悬液中的白细胞数量,WBC/ml原悬液=N/4*104*稀释倍数;E、获取的细胞加入含1%蛋白酶抑制剂和1%磷酸酶抑制剂的裂解液,冷藏静置一定时间后,离心获取上清液作为待检测样本,实现GPC‑3富集。

    评估肝内胆管癌吉西他滨化疗敏感性的标志物及其应用

    公开(公告)号:CN111458507A

    公开(公告)日:2020-07-28

    申请号:CN202010291988.7

    申请日:2020-04-14

    Abstract: 本发明公开了一种评估肝内胆管癌吉西他滨化疗敏感性和/或预后的标志物及其应用。评估肝内胆管细胞癌吉西他滨化疗敏感性和/或预后的标志物为肝内胆管癌患者外周血白细胞或胆管癌组织中免疫细胞表面所表达的CXCR3。评估肝内胆管细胞癌吉西他滨化疗敏感性和/或预后的试剂盒包括CXCR3蛋白表达量的检测相关试剂。评估肝内胆管癌吉西他滨化疗敏感性和/或预后的方法包括以下步骤:1)检测肝内胆管癌患者外周血白细胞或胆管癌组织中免疫细胞表面CXCR3的表达量;2)与预先设定的CXCR3蛋白表达量阈值做比较,高于阈值评定为患者对吉西他滨化疗敏感和/或吉西他滨化疗治疗预后良好,否则评定为对吉西他滨化疗不敏感和/或吉西他滨化疗治疗预后不佳。

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