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公开(公告)号：CN118813658A
公开(公告)日：2024-10-22
申请号：CN202411007064.4
申请日：2024-07-25
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明提供一种改进噬菌体热稳定性的方法，其包括对所述噬菌体的衣壳蛋白进行突变，以获得热稳定性改进的突变衣壳蛋白。所述方法优选包括以下步骤：S1，从数据库中获得噬菌体衣壳蛋白的三维晶体构象；S2，使用蛋白设计软件对噬菌体衣壳蛋白的非保守区序列进行基于热稳定性的虚拟氨基酸突变和分子动力学模拟；S3，根据折叠自由能的差值△△Gmut变化筛选突变氨基酸位点，并通过分子动力学模拟确定可用的突变氨基酸位点。本发明另一方面还提供热稳定性改进的Qβ噬菌体以及病毒样颗粒，可用作食源性病毒分子检测的阳性标准参考样品。
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公开(公告)号：CN110514776A
公开(公告)日：2019-11-29
申请号：CN201910827733.5
申请日：2019-09-03
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种南极磷虾油中磷脂的检测方法，属于水产品检测技术领域。采用氨基固相萃取柱对南极磷虾油进行净化并富集磷脂，利用高效液相色谱-蒸发光散射检测器（HPLC-ELSD），选用正相硅整体胶柱，正己烷-异丙醇-乙酸溶液为流动相进行梯度洗脱，该方法操作简单、准确度高，可以对南极磷虾油中磷脂酰乙醇胺（PE）、磷脂酰胆碱（PC）、溶血磷脂酰胆碱（LPC）三种主要磷脂的进行准确定性和定量分析。
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公开(公告)号：CN105907727A
公开(公告)日：2016-08-31
申请号：CN201610287080.2
申请日：2016-05-03
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
CPC classification number: C12N7/00 , C12N15/70 , C12N2720/12321 , C12N2770/16021 , C12N2770/32421 , C12N2800/101
Abstract: 本发明提供一种内含三种食源性病毒核酸片段的假病毒颗粒及其制备方法。所述假病毒颗粒含有甲型肝炎病毒、轮状病毒和诺如病毒三种病毒的核酸片段。所述假病毒颗粒的制备方法包括步骤：(1)制备包括Qbeta噬菌体的成熟酶编码基因、衣壳蛋白编码基因、包装位点序列以及甲型肝炎病毒、轮状病毒、诺如病毒核酸片段对应的cDNA序列在内的DNA片段；(2)将所述DNA片段克隆至大肠杆菌原核表达载体中，获得质粒载体；(3)将质粒载体转化入大肠杆菌感受态细胞中；(4)诱导DNA片段在大肠杆菌细胞中转录和/或翻译表达；(5)收集步骤(4)的大肠杆菌细胞，并进行破碎，从中纯化得到假病毒颗粒。
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公开(公告)号：CN103966204A
公开(公告)日：2014-08-06
申请号：CN201410225537.8
申请日：2014-05-27
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: C12N15/10
Abstract: 一种提取高质量鱼翅制品DNA的方法，属于分子生物学相关研究领域，步骤如下(1)对鱼翅制品样品进行预处理，包括在弱碱溶液中软化鱼翅和破碎鱼翅；(2)用CTAB裂解液裂解预处理后的鱼翅制品样品；(3)用平衡酚和氯仿-异戊醇分步抽提DNA(4)在含有DNA的水相中加入两倍体积的异丙醇高盐溶液，得到DNA沉淀；用体积分数为75％的乙醇溶液洗涤DNA沉淀，充分干燥，再将DNA沉淀溶解，并保存。利用本发明所提供的提取鱼翅制品DNA的方法，能够方便快捷地获得高质量的鱼翅组织DNA，避免了多糖、胶原蛋白和其他杂质的污染。
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公开(公告)号：CN102539606A
公开(公告)日：2012-07-04
申请号：CN201110456752.5
申请日：2011-12-31
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: G01N30/88
Abstract: 一种水产品及其制品中三价铝的测定方法，水产品及其制品中的三价铝用0.0040mol/L的氢氧化锂，0.0060mol/L的吡啶-2.6-二羧酸，0.090mol/L冰醋酸的混合液提取后，通过高效液相色谱仪进行分离，由于阳离子交换色谱柱对Al的各种形态的吸附能力不同，流动相将其依次洗脱，洗脱液经电感耦合等离子质谱仪对27AL进行分析检测，给出了水产品中的铝更为完整的生物学特性；该实验条件选择合理，检测数据准确可靠，不受浸提时间和温度影响，能准确测定水产品及其制品中的三价铝的含量。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN119193558A
公开(公告)日：2024-12-27
申请号：CN202411576211.X
申请日：2024-11-06
Applicant: 青岛聚大洋海洋科技有限公司 , 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明属于酶领域，具体涉及一种热稳定性提高的褐藻胶裂解酶Alyw203突变体。本发明在褐藻胶裂解酶Alyw203的基础上进行突变，获得突变位点为D40W、S136I、L172V、T206W和D248L的突变体。突变体的热稳定性均有所提高，突变体L172V提升最为显著，在40℃下孵育1小时剩余活力由30.46％提高至76.59％；在40℃下的半衰期增加至388.78min，是原始酶的10.91倍，且孵育12h后仍有37.80％的残留酶活力。本发明还提供了突变体的编码基因、生产所述突变体的重组表达载体和基因工程菌。
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公开(公告)号：CN115541355A
公开(公告)日：2022-12-30
申请号：CN202210360710.X
申请日：2022-04-07
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明涉及一种琼脂凝胶强度检测方法，属于食品检测技术领域，所述方法为煮沸溶解琼脂粉，浓度为1.0g/100ml，倒入平皿中，冷却1h后形成凝胶，将凝胶置于电子天平上，待示数稳定后清零，再将已知底面直径的探头置于凝胶中间部位缓慢匀速垂直下压至凝胶表面破碎时显示的数值即为检测样品的凝胶强度值。本发明方法不需要质构仪，仅需要常规的设备即可检测，便于中小企业对凝胶强度进行自检，且稳定性好。
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公开(公告)号：CN112458184B
公开(公告)日：2022-05-06
申请号：CN202011400586.2
申请日：2020-12-03
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供基于蓝鳍金枪鱼的物种特异性SNP分子标记鉴定蓝鳍金枪鱼的成套引物，其包括基于所述SNP分子标记而设计的一对PCR扩增引物和一条循环探针。所述SNP分子标记包括位于SEQ ID No.1所示序列中第808位的G碱基或位于SEQ ID No.2所示序列中第220位的A碱基。本发明还提供基于成套引物建立的鉴定蓝鳍金枪鱼的方法和试剂盒。本发明的成套引物、方法以及试剂盒能够快速鉴定或鉴别蓝鳍金枪鱼，具有操作简便、取样量低、检测周期短、方法特异性好、灵敏度高等特点。
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公开(公告)号：CN112592982B
公开(公告)日：2022-04-26
申请号：CN202011395840.4
申请日：2020-12-03
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6858 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供基于SNP分子标记鉴定马苏金枪鱼的成套引物，其包括基于马苏金枪鱼的物种特异性SNP分子标记而设计的一对PCR扩增引物和一条探针。该SNP分子标记包括位于SEQ ID No.1所示序列中第255位的C碱基，一对PCR扩增引物中上游引物的序列是或包含5’‑CCACAACCTCTGAGTCTGAACCT‑3’，下游引物的序列是或包含5’‑GCAAAGGCTGATAGTAAACAACAAAT‑3’，探针是序列为5’‑TTTCATTCTGCCACTGTG‑3’的普通探针或者序列为5’‑cattctg(C)ca‑3’的循环探针，探针的5’端标记有荧光报告基团，3’端标记有荧光淬灭基团。
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公开(公告)号：CN111272895A
公开(公告)日：2020-06-12
申请号：CN202010139245.8
申请日：2020-03-03
Applicant: 中国水产科学研究院黄海水产研究所
Abstract: 本发明公开了一种海藻中氨基糖、中性糖和糖醛酸同时快速检测的方法，属于食品工业中糖类化合物的分析检测技术领域。本发明方法为：待测样品采用超声辅助水提醇沉的方法提取海藻多糖粗品；利用Sevage法去除提取的海藻多糖粗品中的蛋白后，采用三氟乙酸水解海藻多糖；水解完成后加入NaOH中和水解液的酸度，过0.22μm滤膜后用于离子色谱-脉冲安培检测器检测。本发明前处理方法简单快速，无需衍生，大幅提高方法的适用性、回收率，解决了目前采用多种检测技术、多种仪器、多种前处理方法进行多种组分测定时效率低的技术难题，大幅提高了检测效率，降低了检测成本。
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