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公开(公告)号：CN105441471A
公开(公告)日：2016-03-30
申请号：CN201510711749.1
申请日：2015-10-28
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种表达硫酸软骨素ABC酶融合蛋白的方法，该方法包括：1)分别克隆硫酸软骨素ABC酶基因和3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白基因，并连接上述基因，使得后续表达的3-磷酸甘油醛脱氢酶蛋白和硫酸软骨素ABC酶蛋白N端连接；2)将连接的硫酸软骨素ABC酶融合蛋白基因重组到表达载体；3)将含有硫酸软骨素ABC酶融合蛋白基因的表达载体转化到宿主细胞中，进行表达；以及4)收获并纯化表达的硫酸软骨素ABC酶融合蛋白。使用该方法得到的活性硫酸软骨素ABC酶融合蛋白占总表达蛋白量的70％，使得后序纯化过程大大简化。得到的ChSase ABC I融合蛋白具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN109777816B
公开(公告)日：2021-05-14
申请号：CN201711120265.5
申请日：2017-11-14
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种ChSaseABC酶蛋白的制备方法，该方法包括：分别克隆所述硫酸软骨素ABC酶基因和分子伴侣蛋白GroES基因，然后连接上述两个蛋白基因到同一个表达载体，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的重组载体；将所述重组载体转化到宿主细胞中进行表达，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的转化体；以及培养所述转化体，并进行物理破碎处理，制得所述硫酸软骨素ABC酶蛋白。本发明还提供一种ChSase ABC酶蛋白及其应用。上述ChSase ABC酶蛋白具有高酶活，能够用于生产低分子量硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN104711245B
公开(公告)日：2018-02-09
申请号：CN201510125696.5
申请日：2015-03-20
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种突变的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白、其编码基因以及其制备方法。本发明的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白采用一步纯化的方法，纯化方法简单，并且得到高纯度、高活性的ChSase ABC突变体。得到的ChSase ABC具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN103992993A
公开(公告)日：2014-08-20
申请号：CN201410222796.5
申请日：2014-05-23
Applicant: 北京电子科技职业学院
CPC classification number: C12N9/88 , C12P19/26 , C12Y402/02004
Abstract: 本发明提供了一种硫酸软骨素ABC酶融合蛋白、其编码基因以及其制备方法。此外本发明还涉及一种生产低分子量硫酸软骨素A，B或C的方法。本发明的硫酸软骨素ABC酶融合蛋白采用一步纯化的方法，纯化方法简单，并且得到高纯度的ChSase ABC。得到的ChSase ABC具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105441471B
公开(公告)日：2018-10-19
申请号：CN201510711749.1
申请日：2015-10-28
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种表达硫酸软骨素ABC酶融合蛋白的方法，该方法包括：1)分别克隆硫酸软骨素ABC酶基因和3‑磷酸甘油醛脱氢酶蛋白基因，并连接上述基因，使得后续表达的3‑磷酸甘油醛脱氢酶蛋白和硫酸软骨素ABC酶蛋白N端连接；2)将连接的硫酸软骨素ABC酶融合蛋白基因重组到表达载体；3)将含有硫酸软骨素ABC酶融合蛋白基因的表达载体转化到宿主细胞中，进行表达；以及4)收获并纯化表达的硫酸软骨素ABC酶融合蛋白。使用该方法得到的活性硫酸软骨素ABC酶融合蛋白占总表达蛋白量的70％，使得后序纯化过程大大简化。得到的ChSase ABC I融合蛋白具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN104711245A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510125696.5
申请日：2015-03-20
Applicant: 北京电子科技职业学院
CPC classification number: C12N9/88 , C07K14/245 , C12P19/26
Abstract: 本发明提供了一种突变的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白、其编码基因以及其制备方法。本发明的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白采用一步纯化的方法，纯化方法简单，并且得到高纯度、高活性的ChSase ABC突变体。得到的ChSase ABC具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN109777816A
公开(公告)日：2019-05-21
申请号：CN201711120265.5
申请日：2017-11-14
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种ChSaseABC酶蛋白的制备方法，该方法包括：分别克隆所述硫酸软骨素ABC酶基因和分子伴侣蛋白GroES基因，然后连接上述两个蛋白基因到同一个表达载体，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的重组载体；将所述重组载体转化到宿主细胞中进行表达，获得含有所述硫酸软骨素ABC酶蛋白和分子伴侣蛋白GroES的转化体；以及培养所述转化体，并进行物理破碎处理，制得所述硫酸软骨素ABC酶蛋白。本发明还提供一种ChSase ABC酶蛋白及其应用。上述ChSase ABC酶蛋白具有高酶活，能够用于生产低分子量硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN104710536B
公开(公告)日：2018-07-06
申请号：CN201510125697.X
申请日：2015-03-20
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白、其编码基因以及其制备方法。本发明的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白采用一步纯化的方法，纯化方法简单，并且得到高纯度、更高活性的ChSase ABC突变体。得到的ChSase ABC具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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公开(公告)号：CN104710536A
公开(公告)日：2015-06-17
申请号：CN201510125697.X
申请日：2015-03-20
Applicant: 北京电子科技职业学院
Abstract: 本发明提供了一种硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白、其编码基因以及其制备方法。本发明的硫酸软骨素ABC酶突变体融合蛋白采用一步纯化的方法，纯化方法简单，并且得到高纯度、更高活性的ChSase ABC突变体。得到的ChSase ABC具有高酶活，能够用于生产硫酸软骨素，并且硫酸软骨素的生成条件不高、方法简便且容易控制。
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