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公开(公告)号：CN110563837A
公开(公告)日：2019-12-13
申请号：CN201910707837.2
申请日：2019-08-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/81 , C07K14/465 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/30
Abstract: 本发明涉及一种从鸡蛋清中高效提取卵类黏蛋白的方法，该方法包括鸡蛋清溶液的样品制备、利用乙醇预处理蛋清溶液除杂蛋白、微波辅助硫酸铵第一步沉淀、微波辅助硫酸铵第二步沉淀四个步骤；所述的卵类黏蛋白提取工艺是采用微波功率140W、微波时间20s的参数来辅助硫酸铵沉淀过程。本发明解决了卵类黏蛋白分离纯化操作复杂、周期长、纯度及得率低等问题，利用微波技术诱导蛋白分子极化，及促进传质的效应，建立了一种新兴、简单、快速和高效的卵类黏蛋白提取方法，该方法大大缩短了普通盐析过程中的静置时间，简化操作过程，降低提取成本，提高分离效率，适用于大范围生产，为微波技术在禽蛋类蛋白提纯中的应用提供支持。
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公开(公告)号：CN107354172A
公开(公告)日：2017-11-17
申请号：CN201710371937.3
申请日：2017-05-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/66 , C12N5/10 , A61K38/17 , A61P29/00
CPC classification number: C07K14/47 , A61K38/17 , C12N15/86 , C12N2710/14043 , C12N2830/34
Abstract: 本发明公开了一种优化的动物蛋白基因OCX-36及其原核表达载体的构建方法和应用，采取的技术方案是对OCX-36基因稀有密码子进行改造优化，并切除了信号肽，将优化的OCX-36基因与载体连接，构建重组质粒pMD-19T-OCX-36，转入到大肠杆菌C41(DE3)感受态细胞中，筛选阳性克隆进行培养、蛋白表达，菌体细胞超声破碎、离心、收集上清液经一次镍柱亲和层析即可获得蛋白rOCX-36。本发明通过对OCX-36基因序列的优化，实现了蛋白rOCX-36的可溶性表达，解决了其难于原核表达的技术问题，表达蛋白对患有结肠炎的小鼠具有明显改善病情的效果，显示rOCX-36可用于制备治疗结肠炎的药物。
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公开(公告)号：CN110563837B
公开(公告)日：2021-07-30
申请号：CN201910707837.2
申请日：2019-08-01
Applicant: 华中农业大学
IPC: C07K14/81 , C07K14/465 , C07K1/36 , C07K1/34 , C07K1/30
Abstract: 本发明涉及一种从鸡蛋清中高效提取卵类黏蛋白的方法，该方法包括鸡蛋清溶液的样品制备、利用乙醇预处理蛋清溶液除杂蛋白、微波辅助硫酸铵第一步沉淀、微波辅助硫酸铵第二步沉淀四个步骤；所述的卵类黏蛋白提取工艺是采用微波功率140W、微波时间20s的参数来辅助硫酸铵沉淀过程。本发明解决了卵类黏蛋白分离纯化操作复杂、周期长、纯度及得率低等问题，利用微波技术诱导蛋白分子极化，及促进传质的效应，建立了一种新兴、简单、快速和高效的卵类黏蛋白提取方法，该方法大大缩短了普通盐析过程中的静置时间，简化操作过程，降低提取成本，提高分离效率，适用于大范围生产，为微波技术在禽蛋类蛋白提纯中的应用提供支持。
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公开(公告)号：CN107354172B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201710371937.3
申请日：2017-05-24
Applicant: 华中农业大学
IPC: C12N15/866 , C12N15/66 , C12N5/10 , A61K38/17 , A61P29/00
Abstract: 本发明公开了一种优化的动物蛋白基因OCX‑36及其原核表达载体的构建方法和应用，采取的技术方案是对OCX‑36基因稀有密码子进行改造优化，并切除了信号肽，将优化的OCX‑36基因与载体连接，构建重组质粒pMD‑19T‑OCX‑36，转入到大肠杆菌C41(DE3)感受态细胞中，筛选阳性克隆进行培养、蛋白表达，菌体细胞超声破碎、离心、收集上清液经一次镍柱亲和层析即可获得蛋白rOCX‑36。本发明通过对OCX‑36基因序列的优化，实现了蛋白rOCX‑36的可溶性表达，解决了其难于原核表达的技术问题，表达蛋白对患有结肠炎的小鼠具有明显改善病情的效果，显示rOCX‑36可用于制备治疗结肠炎的药物。
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