公开(公告)号：CN1986795A

公开(公告)日：2007-06-27

申请号：CN200610113098.7

申请日：2006-09-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 包满珠 ,  李志能 ,  刘国锋 ,  张俊卫 ,  黄文俊

IPC: C12N15/29

Abstract: 本发明属于悬铃木分子生物学技术领域，具体涉及林木组织RNA制备技术领域。本发明公开了一种从悬铃木组织中提取总RNA的方法。针对悬铃木组织中酚类和次生代谢物质含量较高影响提取高质量RNA样品的障碍，提出了从粗提到纯化悬铃木总RNA的关键步骤，制备了含有聚乙烯吡咯烷酮40和β－巯基乙醇的新型裂解液，用于抑制悬铃木组织中多酚类物质的氧化；利用氯仿/异戊醇和氯仿分别抽提以除去部分多糖，多酚和蛋白质；将粗提物用DEPC－H2O溶解后再用正丁醇－CTAB和水饱和CTAB以进行纯化，显著提高了悬铃木组织中RNA的提取效率。本发明经济、稳定，抽提的总RNA样品质量较高，为悬铃木植物的分子生物学的进一步操作提供了新的方法。

公开(公告)号：CN100445385C

公开(公告)日：2008-12-24

申请号：CN200610113098.7

申请日：2006-09-11

Applicant: 华中农业大学

Inventor： 包满珠 ,  李志能 ,  刘国锋 ,  张俊卫 ,  黄文俊

IPC: C12N15/29

Abstract: 本发明属于悬铃木分子生物学技术领域，具体涉及林木组织RNA制备技术领域。本发明公开了一种从悬铃木组织中提取总RNA的方法。针对悬铃木组织中酚类和次生代谢物质含量较高影响提取高质量RNA样品的障碍，提出了从粗提到纯化悬铃木总RNA的关键步骤，制备了含有聚乙烯吡咯烷酮40和β-巯基乙醇的新型裂解液，用于抑制悬铃木组织中多酚类物质的氧化；利用氯仿/异戊醇和氯仿分别抽提以除去部分多糖，多酚和蛋白质；将粗提物用DEPC-H2O溶解后再用正丁醇-CTAB和水饱和CTAB以进行纯化，显著提高了悬铃木组织中RNA的提取效率。本发明经济、稳定，抽提的总RNA样品质量较高，为悬铃木植物的分子生物学的进一步操作提供了新的方法。