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公开(公告)号:CN108410992A
公开(公告)日:2018-08-17
申请号:CN201810016955.4
申请日:2018-01-05
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888
Abstract: 本发明公开了一种牛源性成分鉴别的新标识性基因位点及其检测方法,属于分子生物学领域。该方法的靶标基因位点是将Genbank中检索获得不同牛种属的线粒体色素b(Cytb)基因,与其他畜类、植物等进行同源性分析比较后,选择了新标识性基因位点,进而设计了特异性引物,建立了高效新标识基因位点的扩增体系,提高了检测方法的灵敏性、适用性。所设计特异性引物的上游引物F的碱基序列为5’-GTGTAAGACCCGTAATATAAGCC-3’,下游引物R的碱基序列为5’-CATTCTCCTCTGTTACCCATATCT-3’,利用普通PCR方法、凝胶电泳检测建立了高效新标识基因位点的扩增体系。该方法具有良好的特异性,灵敏性为0.023pg牛DNA,重复性好,操作简单、快速、成本低等优点,可用于动物组织及其加工制品中牛源性成分的鉴别,也可以实现快速检测。
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公开(公告)号:CN117802207A
公开(公告)日:2024-04-02
申请号:CN202311538351.3
申请日:2023-11-17
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种基于自淬灭探针LAMP的可视化检测体系,包括自淬灭探针、互补寡核苷酸序列、特异性引物组、LAMP反应试剂、模板DNA和无菌去离子水。还包括一种基于自淬灭探针LAMP的可视化检测方法。本发明仅需要简单的恒温加热装置即可实现靶标的快速特异性扩增,缩短反应时间可缩短为30min内,有效避免假阳性,自淬灭探针仅在掺入反应产物中会表现出明亮的绿色荧光,而在阴性和假阳性时优先结合互补寡核苷酸序列表现出微弱的荧光,对结果的判定简单,反应后的溶液置于蓝光下,表现为微弱绿色荧光的即为阴性,出现明亮的绿色荧光才是阳性,明亮的绿色和微弱的绿色提供了较宽的视觉窗口,可以精准定性反应结果,对操作人员的要求较低。
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公开(公告)号:CN113355435A
公开(公告)日:2021-09-07
申请号:CN202110776557.4
申请日:2021-07-09
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种基于LAMP和自身猝灭荧光探针检测鲣鱼的引物组、方法和试剂盒,所述引物组包括一对外引物组,一对内引物组和一对环引物组;所述外引物组为F3和B3,其核苷酸序列如SEQ ID NO.1和SEQ ID NO.2所示;所述内引物组为FIP和BIP,其核苷酸序列如SEQ ID NO.3和SEQ ID NO.4所示;所述环引物组为LF和LB,其核苷酸序列如SEQ ID NO.5和SEQ ID NO.6所示。本发明所提供的方法,其灵敏度可达5fg/μL。
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公开(公告)号:CN113337620A
公开(公告)日:2021-09-03
申请号:CN202110800475.9
申请日:2021-07-15
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种基于FLOS‑LAMP检测大西洋鲑鱼的试剂盒及方法。本发明基于大西洋鲑鱼细胞色素b基因筛选了4条特异性引物,同时设计了1条环引物并在其3’末端倒数第2个碱基标记荧光探针。该探针与靶标特异性结合释放荧光信号,可以避免检测到由引物二聚体、发夹结构等造成的假阳性信号。本方法灵敏度高、特异性强,最低检测限可达5pg/μL。
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公开(公告)号:CN117730980A
公开(公告)日:2024-03-22
申请号:CN202410150441.3
申请日:2024-02-02
Applicant: 南京工业大学
Abstract: 本发明涉及食品加工技术领域,公开了一种猪头肉的加工方法,具体包括以下步骤:浸泡:将猪头肉在水中浸泡30~45min,得浸泡后的猪头肉;预煮:将浸泡后的猪头肉在100℃预煮15~20min,得预煮后的猪头肉;其中,猪头肉与水按比例为1g:2~3mL;卤汤煮制:向水中加入香辛料包,先煮沸15~20min,再95~97℃熬煮1~1.5h,捞出香辛料包,再加入调味料包熬煮15~30min,得卤汤;其中,香辛料包与水按比例为1g:50~200mL,调味料包与水按比例为1g:3~6mL;猪头肉煮制:将预煮后的猪头肉放入卤汤中煮沸后,95~97℃煮制1~1.5h后,添加食用吸油物料继续煮制0.2~0.5h;冷却后得卤制猪头肉,其中,猪头肉:卤汤=1g:1.5~2mL。本发明提供的猪头肉加工方法,按照比例将香辛料包、调味料包与水一同煮制,同时在煮制过程中加入食用吸油物料,提高了猪肉的瘦肉率、大大减少了油腻感、改善了风味、色泽、口感,提高了品质稳定性。
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公开(公告)号:CN112195256A
公开(公告)日:2021-01-08
申请号:CN202011261466.9
申请日:2020-11-12
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测正鲣的引物组、试剂盒和检测方法,所述的引物组是由以下4条特异性引物构成的:核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游外引物F3、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游外引物B3、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游内引物FIP、核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的下游内引物BIP。本发明所建立LAMP反应体系具有良好的特异性、准确性和灵敏度,且检测时间短,操作简便。相较荧光定量PCR反应,LAMP反应是在恒温条件下进行,所以可以在简单的恒温仪器如水浴锅、金属浴中反应,成本更低,更适用于金枪鱼及其相关产品的现场快速检测。
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公开(公告)号:CN113444809A
公开(公告)日:2021-09-28
申请号:CN202110855135.6
申请日:2021-07-28
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/6844
Abstract: 本发明公开了一种基于MB‑LAMP检测鲣鱼的试剂盒及方法。本发明基于鲣鱼细胞色素b基因筛选了4条特异性引物,同时设计了1组环引物,并对其中1条环引物进行分子信标设计。当没有靶序列存在时,分子信标的荧光和淬灭基团靠得很近,荧光被淬灭。分子信标与靶序列结合后,分子信标的空间构型发生改变,导致荧光恢复,从而可以避免检测到由引物二聚体、发夹结构等造成的假阳性信号。本方法灵敏度高、特异性强,最低检测限可达0.5pg/μL。
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公开(公告)号:CN112760386A
公开(公告)日:2021-05-07
申请号:CN202110123772.4
申请日:2021-01-29
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了鉴定大西洋鳕鱼、狭鳕和黑线鳕的引物组、试剂盒和方法,鉴定鱼种类的引物组,包含如下至少一组引物组:第一组:如SEQ ID NO:1所示的正向引物和如SEQ ID NO:2所示的反向引物,用于鉴定黑线鳕;第二组:如SEQ ID NO:3所示的正向引物和如SEQ ID NO:4所示的反向引物,用于鉴定狭鳕;第三组:如SEQ ID NO:5所示的正向引物和如SEQ ID NO:6所示的反向引物,用于鉴定大西洋鳕。本发明提供的多重PCR具有较低的检测限,最低检测限为0.1ng。
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公开(公告)号:CN111254202A
公开(公告)日:2020-06-09
申请号:CN202010093317.X
申请日:2020-02-14
Applicant: 南京工业大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种检测大西洋三文鱼的引物组、试剂盒和检测方法,所述的引物组是由以下4条特异性引物构成的:核苷酸序列如SEQ ID NO.1所示的上游外引物F3、核苷酸序列如SEQ ID NO.2所示的下游外引物B3、核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示的上游内引物FIP、核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示的下游内引物BIP。与现有技术相比,本发明具有如下优势:(1)本发明基于大西洋三文鱼的线粒体cytb基因设计特异性引物,可以对大西洋三文鱼进行定性检测,检测限达5pg。(2)本发明检测时间大约仅需30min。
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