公开(公告)号：CN108998431A

公开(公告)日：2018-12-14

申请号：CN201810825284.6

申请日：2018-07-25

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  周烽华 ,  曹佳睿 ,  沈镇炎

IPC: C12N9/10 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种提高4-α-糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4-α-糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4-α-糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4-α-糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4-α-糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。

公开(公告)号：CN108998431B

公开(公告)日：2019-07-23

申请号：CN201810825284.6

申请日：2018-07-25

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  周烽华 ,  曹佳睿 ,  沈镇炎

IPC: C12N9/10 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种提高4‑α‑糖基转移酶可溶性表达水平的方法，属于发酵工程技术领域。本发明的方法从4‑α‑糖基转移酶的发酵生产工艺入手，通过在4‑α‑糖基转移酶生产菌株的发酵培养基中添加一定量的氧化三甲胺和/或脯氨酸，以提高其对4‑α‑糖基转移酶的表达水平；采用本发明的方法发酵48h，可成功将细胞破碎上清液中的4‑α‑糖基转移酶酶活提高至1302.6U/mL；且本发明的方法具有工艺简单易行，适合工业化生产的优点。

公开(公告)号：CN108865962B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201810745221.X

申请日：2018-07-09

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  周烽华 ,  苏二正

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。

公开(公告)号：CN108865962A

公开(公告)日：2018-11-23

申请号：CN201810745221.X

申请日：2018-07-09

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  周烽华 ,  苏二正

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/70 ,  C12P19/04 ,  C12R1/19

CPC classification number: C12N9/1048 ,  C12N15/70 ,  C12P19/04 ,  C12Y204/00

Abstract: 本发明公开了一种可高效可溶性表达4‑α‑糖基转移酶的大肠杆菌工程菌，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的工程菌以pETduet‑1载体或pET24a(+)载体为表达载体，以E.coli BL21(DE3)菌株为表达宿主菌株，同时表达来源于嗜热高温球菌(Thermococcus litoralis)的4‑α‑糖基转移酶以及分子伴侣蛋白GroES‑GroEL；将本发明的工程菌发酵培养24h，得到的发酵液中的酶活可高达82.2U/mL。