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公开(公告)号：CN115851568A
公开(公告)日：2023-03-28
申请号：CN202211581907.2
申请日：2022-12-09
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种高产普鲁兰酶的重组需钠弧菌，所述重组需钠弧菌由重组质粒OmpA‑PulA导入宿主需钠弧菌得到，所述重组质粒OmpA‑PulA由普鲁兰酶的编码基因和OmpA的信号肽编码基因与表达载体连接构建而成。本发明还公开了一种利用所述重组需钠弧菌高效发酵生产鲁兰酶的方法。本发明首次实现了普鲁兰酶PulA在需钠弧菌中的分泌表达，并且利用本发明的发酵方法生产普鲁兰酶PulA，胞外酶活高达83.3U·mL‑1，是大肠杆菌中酶活7.3U·mL‑1的11.4倍，活力提高显著。
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公开(公告)号：CN114990096A
公开(公告)日：2022-09-02
申请号：CN202210321836.6
申请日：2022-03-30
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种L‑天冬氨酸α‑脱羧酶及其应用。属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶具有高分泌能力，将携带本发明L‑天冬氨酸α‑脱羧酶的大肠杆菌摇瓶发酵36h，可使发酵破碎菌体上清液中的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶酶活12.34U/mL；将携带本发明L‑天冬氨酸α‑脱羧酶的大肠杆菌在摇瓶中进行全细胞转化，反应18h，产物摩尔转化率为98.54％。因此，本发明的L‑天冬氨酸α‑脱羧酶在工业转化中能够降低成本，在食品、医药、化工等行业中具有极高的潜在利用价值。
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公开(公告)号：CN109825489B
公开(公告)日：2021-03-02
申请号：CN201910249596.1
申请日：2019-03-29
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β‑淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β‑淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β‑淀粉酶适用于大规模工业化生产。
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公开(公告)号：CN107759556B
公开(公告)日：2019-07-02
申请号：CN201711063603.6
申请日：2017-11-02
Applicant: 南京林业大学
IPC: C07D311/62 , B01D11/02
Abstract: 本发明公开了一种提取银杏叶原花青素的深共熔溶剂(DESs)及其制备方法和提取方法，该深共熔溶剂是由氯化胆碱和丙二酸按摩尔比1:1‑2.5制备而成。本发明制备的深共熔溶剂为绿色溶剂，安全无污染，可重复利用，易生物降解，且制备工艺简单，成本低，具有蒸汽压低、不可燃、溶解性和导电性优良、电化学窗口稳定等性质；同时本发明制备的深共熔溶剂粘度小，氢键稳定，流动性好；采用本发明制备深共熔溶剂提取银杏叶原花青素的方法可以提高银杏叶中原花青素的提取率，减少提取时间，并且操作安全，对环境和人体不会产生危害。本发明深共熔溶剂的制备方法简单方便，原料来源广，成本低，生物可降解性高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN107043796B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201710352677.5
申请日：2017-05-18
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明涉及一种制备麦芽糖浆的方法，属于淀粉糖转化技术领域。本发明以淀粉为底物，采用高温淀粉普鲁兰酶进行同步液化与脱支反应，然后分步或同时加入耐热β‑淀粉酶和耐热麦芽糖淀粉酶进行糖化，经过脱色、浓缩，即可获得麦芽糖浆。本工艺底物浓度高、不易污染杂菌、工艺简单，可减少淀粉制糖后期的糖液蒸发能耗，简化提取工序，有利于提高麦芽糖浆的生产效率。
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公开(公告)号：CN107043796A
公开(公告)日：2017-08-15
申请号：CN201710352677.5
申请日：2017-05-18
Applicant: 南京林业大学
CPC classification number: C12P19/22 , C12N9/2457 , C12N15/70 , C12P19/12 , C12P19/14 , C12P19/16 , C12Y302/01041 , C13K7/00
Abstract: 本发明涉及一种制备麦芽糖浆的方法，属于淀粉糖转化技术领域。本发明以淀粉为底物，采用高温淀粉普鲁兰酶进行同步液化与脱支反应，然后分步或同时加入耐热β‑淀粉酶和耐热麦芽糖淀粉酶进行糖化，经过脱色、浓缩，即可获得麦芽糖浆。本工艺底物浓度高、不易污染杂菌、工艺简单，可减少淀粉制糖后期的糖液蒸发能耗，简化提取工序，有利于提高麦芽糖浆的生产效率。
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公开(公告)号：CN117987402A
公开(公告)日：2024-05-07
申请号：CN202311833635.5
申请日：2023-12-27
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了L‑天冬氨酸α‑脱羧酶突变体，属于基因工程和酶工程领域。本发明L‑天冬氨酸α‑脱羧酶突变体BaADC‑I46V‑I88M‑L92R‑I126R的比酶活为54.2U·mg‑1，是野生型的1.6倍。将表达BaADC‑I46V‑I88M‑L92R‑I126R的大肠杆菌全细胞进行L‑天冬氨酸转化，可获得298.2g·L‑1的β‑丙氨酸，L‑天冬氨酸的摩尔转化率为99％；将含有突变体BaADC‑I46V‑I88M‑L92R‑I126R的全细胞进行的DL‑天冬氨酸混合物转化，可获得137.6g·L‑1的β‑丙氨酸，DL‑天冬氨酸混合物中L‑天冬氨酸的摩尔转化率为100％。
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公开(公告)号：CN110184258B
公开(公告)日：2020-11-06
申请号：CN201910501002.1
申请日：2019-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507‑13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507‑11的Kcat/Km可达617.85s‑1·mg‑1·mL，是野生型的1.2倍。
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公开(公告)号：CN110184258A
公开(公告)日：2019-08-30
申请号：CN201910501002.1
申请日：2019-06-11
Applicant: 南京林业大学
Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507-13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507-11的Kcat/Km可达617.85s-1·mg-1·mL，是野生型的1.2倍。
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