公开(公告)号：CN109825489B

公开(公告)日：2021-03-02

申请号：CN201910249596.1

申请日：2019-03-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  朱秋雨 ,  沈镇炎 ,  郭双凤 ,  程欣 ,  陶钰清

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/12

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β‑淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β‑淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β‑淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β‑淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β‑淀粉酶适用于大规模工业化生产。

公开(公告)号：CN115651922A

公开(公告)日：2023-01-31

申请号：CN202210560601.2

申请日：2022-05-23

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  栾舒越 ,  朱秋雨

IPC: C12N9/38 ,  C12N15/56 ,  C12N15/70 ,  C12N1/21 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种β‑半乳糖苷酶突变体。属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明β‑半乳糖苷酶突变体的可溶性表达水平和热稳定性较野生型β‑半乳糖苷酶有了明显的提高。将携带编码本发明β‑半乳糖苷酶突变体lacZBf‑V181I、lacZBf‑I529Y和lacZBf‑V181I‑I529Y的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵36h，即可使胞内可溶部分酶活达9.06U·mL‑1、7.58U·mL‑1和7.30U·mL‑1，分别是野生型β‑半乳糖苷酶的1.5倍、1.25倍和1.2倍；β‑半乳糖苷酶突变体lacZBf‑V181I、lacZBf‑I529Y和lacZBf‑V181I‑I529Y在50℃下的半衰期是108h、72h、72h，分别是野生型β‑半乳糖苷酶的1.8倍、1.2倍、1.2倍。

公开(公告)号：CN109825489A

公开(公告)日：2019-05-31

申请号：CN201910249596.1

申请日：2019-03-29

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  张心怡 ,  朱秋雨 ,  沈镇炎 ,  郭双凤 ,  程欣 ,  陶钰清

IPC: C12N9/26 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/12

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的β-淀粉酶及其应用，属于基因工程以及微生物工程技术领域。本发明的β-淀粉酶具有高分泌能力，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌摇瓶发酵48h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达434.65U/mL，将携带本发明β-淀粉酶的大肠杆菌在3L发酵罐中诱导培养30h，可使发酵上清液中的β-淀粉酶酶活高达13063.8U/mL，因此，本发明的β-淀粉酶适用于大规模工业化生产。

公开(公告)号：CN110184258B

公开(公告)日：2020-11-06

申请号：CN201910501002.1

申请日：2019-06-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  栾舒越 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  朱秋雨 ,  赵林果 ,  史洁莹

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/20 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507‑13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s‑1·mg‑1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507‑11的Kcat/Km可达617.85s‑1·mg‑1·mL，是野生型的1.2倍。

公开(公告)号：CN110184258A

公开(公告)日：2019-08-30

申请号：CN201910501002.1

申请日：2019-06-11

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  栾舒越 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  朱秋雨 ,  赵林果 ,  史洁莹

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/22 ,  C12P19/20 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14

Abstract: 本发明公开了一种普鲁兰酶突变体，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明的普鲁兰酶突变体的热稳定性和催化效率较野生型有了明显的改善，其中，F513Y在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的81.96％，在40℃下的半衰期可达78h，Kcat/Km可达962.91s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.2倍、2.6倍和1.8倍；507-13在55℃下的酶活可达最适温度下酶活的84.60％，在40℃下的半衰期可达65h，Kcat/Km可达639.37s-1·mg-1·mL，分别为野生型的2.3倍、2.2倍和1.2倍；507-11的Kcat/Km可达617.85s-1·mg-1·mL，是野生型的1.2倍。

公开(公告)号：CN110343687B

公开(公告)日：2023-05-09

申请号：CN201910650235.8

申请日：2019-07-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  朱秋雨 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  金璐 ,  栾舒越 ,  史洁莹 ,  刘龙

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL‑1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd‑117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL‑1，是野生型的2.9倍。

公开(公告)号：CN110343687A

公开(公告)日：2019-10-18

申请号：CN201910650235.8

申请日：2019-07-18

Applicant: 南京林业大学

Inventor： 段绪果 ,  朱秋雨 ,  张心怡 ,  沈镇炎 ,  金璐 ,  栾舒越 ,  史洁莹 ,  刘龙

IPC: C12N9/44 ,  C12N15/56 ,  C12P19/16 ,  C12P19/14 ,  C12P19/04

Abstract: 本发明公开了一种具有高分泌能力的普鲁兰酶突变体及其应用，属于酶工程和微生物工程技术领域。本发明普鲁兰酶突变体胞外分泌能力较野生型有了明显的提高，将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-306的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达38.9U·mL-1，是野生型的2.3倍；将携带编码本发明普鲁兰酶突变体PulBd-117的基因的大肠杆菌摇瓶诱导发酵44h，即可使发酵液上清液中的胞外酶活达49.6U·mL-1，是野生型的2.9倍。