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公开(公告)号:CN110512010B
公开(公告)日:2023-04-07
申请号:CN201910768363.2
申请日:2019-08-20
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测大肠杆菌rRNA转录速率的试剂盒及方法,属于分子生物学检测领域。本发明提供的试剂盒包括第一分子信标、第二分子信标和第三分子信标;另外,本发明通过利用上述试剂盒可以通过大肠杆菌体内转录检测方法或大肠杆菌体外转录检测方法对大肠杆菌rRNA的转录速度以及转录产物的量进行精确的检测,其检测灵敏度可以达到0.5mg;相比于其他RNA转录速率检测方法来说,本发明实施例利用分子信标的检测方法造价低廉,操作简单,可以被广泛的应用。另外,本发明实施例提供的各个分子信标无毒无害,对环境无污染。
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公开(公告)号:CN105671016B
公开(公告)日:2019-07-26
申请号:CN201610115975.8
申请日:2016-03-02
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 提高S‑腺苷‑L‑半胱氨酸水解酶免疫原性的方法及六糖修饰ahcy蛋白,涉及蛋白免疫原性领域,其目的是为了给布鲁氏菌提供更好的疫苗候选抗原。该方法为:4℃将六糖与高碘酸钠按摩尔比1:1混合在pH 6.0的PBS中反应1h;室温将EDC与NHS按摩尔比1:1加入上述体系中反应6h;室温将ahcy蛋白按ahcy蛋白与六糖摩尔比1:1000加入上述体系中过夜反应;4℃在50mmol/L、pH8.0~9.6的碳酸盐溶液中透析5h,再在50mmol/L、pH7.0~8.0的PBS中透析一天。获得的六糖修饰ahcy蛋白的刺激增殖指数、抗体效价、刺激小鼠脾淋巴细胞后产生的IFN‑γ和IL‑2的量都大大提高。
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公开(公告)号:CN105002195B
公开(公告)日:2018-08-10
申请号:CN201510462709.8
申请日:2015-08-01
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种猪蓝耳病重组疫苗,将猪蓝耳病病毒ORF3基因和ORF5基因串联,构建了融合基因ORF3‑ORF5,插入真菌特异性双T‑DNA安全表达载体pCB130NG中,获得一种表达载体pCB130NG‑ORF3‑ORF5,利用PEG法、农杆菌介导法或电击法转化食药用真菌原生质体,经鉴定为阳性的菌丝体,培养获得T1代子实体,利用PCR筛选出只含目的基因而不含选择标记基因的子实体个体,培养至T2代,获得稳定表达猪蓝耳病病毒基因的转基因食药用真菌。通过转基因真菌菌丝的发酵培养,离心收集菌丝,烘干或冻干后,粉碎制备猪蓝耳病重组疫苗。利用本发明生产的猪蓝耳病疫苗各批次间质量差异小、产量大、成本低,且可以直接通过口服饲喂动物,具有广泛的社会效益和经济效益。
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公开(公告)号:CN116251178A
公开(公告)日:2023-06-13
申请号:CN202310312524.3
申请日:2023-03-28
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 一种铜绿假单胞菌疫苗,涉及疫苗制备领域,由铜绿假单胞菌PAO1 OMV与重组蛋白PcrV组成;使用时用铜绿假单胞菌PAO1 OMV与重组蛋白PcrV联合免疫接种。本发明通过试验证实重组蛋白PcrV和OprF/I可平衡和/或降低铜绿假单胞菌PAO1 OMV引起的毒性,重组蛋白PcrV能增强铜绿假单胞菌PAO1 OMV的免疫保护作用,同时铜绿假单胞菌PAO1 OMV能提高重组蛋白PcrV和OprF/I的免疫保护作用;铜绿假单胞菌PAO1 OMV能提高重组蛋白PcrV和OprF/I的IgG2a、IgM、IgA水平,并引起Th1和Th2平衡的免疫保护作用。该疫苗保护作用强,毒性低。
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公开(公告)号:CN112410181B
公开(公告)日:2023-03-24
申请号:CN202011266845.7
申请日:2020-11-13
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于酵母培养物的高破壁率发酵装置,包括固定桶,所述固定桶内侧安装有翻料防堆积机构,所述翻料防堆积机构包括搅拌棒、搅拌电机、固定柱、复位弹簧、圆盘、限位柱、刮板、通风管、通风孔和螺旋板,所述固定桶内侧顶部转动连接有搅拌棒,本发明通过翻料防堆积机构,一方面便于工作人员对固定桶内的酵母液进行搅拌处理,从而使得酵母液与糖蜜等添加物充分接触,进而提高了酵母液的繁殖效率,另一方面,便于工作人员对底部和边部的酵母液进行翻料处理,从而避免底部和边部的酵母液长时间堆积造成酵母液处于休眠状态,其次,便于工作人员对发酵后的酵母液进行下料处理,避免残留的酵母液附着在固定桶内壁。
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公开(公告)号:CN107384582B
公开(公告)日:2020-10-09
申请号:CN201710793460.8
申请日:2017-09-06
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明提供一种红花油体的提取方法,属于红花油体提取方法领域。该方法包括:先将红花种子进行水洗,然后在PBS缓冲液中浸泡;将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理;将处理后的溶液进行离心,然后加入NaCl溶液,在室温下静置2‑8h,得到分层后的油体液;提取得到的上层油体液,然后加入PBS乳化机中搅拌混匀,放置在室温中静置2‑4h,取上层油体,然后离心,得到红花油体。本发明的提取方法快速简单、提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。
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公开(公告)号:CN110512010A
公开(公告)日:2019-11-29
申请号:CN201910768363.2
申请日:2019-08-20
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种检测大肠杆菌rRNA转录速率的试剂盒及方法,属于分子生物学检测领域。本发明提供的试剂盒包括第一分子信标、第二分子信标和第三分子信标;另外,本发明通过利用上述试剂盒可以通过大肠杆菌体内转录检测方法或大肠杆菌体外转录检测方法对大肠杆菌rRNA的转录速度以及转录产物的量进行精确的检测,其检测灵敏度可以达到0.5mg;相比于其他RNA转录速率检测方法来说,本发明实施例利用分子信标的检测方法造价低廉,操作简单,可以被广泛的应用。另外,本发明实施例提供的各个分子信标无毒无害,对环境无污染。
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公开(公告)号:CN108314709A
公开(公告)日:2018-07-24
申请号:CN201810239679.8
申请日:2018-03-22
Applicant: 吉林农业大学
IPC: C07K14/23 , C07K1/36 , C07K1/30 , C07K1/22 , C07K1/16 , C12N15/31 , C12N15/81 , A61K39/39 , A61K39/10 , A61P31/04
Abstract: 一种重组糖基化蛋白P39及其制备方法和应用,涉及重组蛋白领域。本发明包括:对p39基因进行克隆,将PCR片段与克隆载体pMD-19T(Simple)相连,经测序和酶切验证正确后将目的片段与真核表达载体pPICZαA相连构建重组表达质粒pPICZαA-P39;电转化法将质粒pPICZαA-P39转化至毕赤酵母GS115感受态细胞,经诱导表达,亲和层析纯化,分子筛进一步分离纯化后经western blot验证即为目的蛋白,最佳发酵条件为:pH6、磷酸盐浓度0.02M、甲醇诱导浓度1%、诱导72h,纯化后的重组蛋白P39浓度为5mg/ml。本发明为布鲁氏菌流行性疾病免疫预防奠定基础。
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公开(公告)号:CN107384582A
公开(公告)日:2017-11-24
申请号:CN201710793460.8
申请日:2017-09-06
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明提供一种红花油体的提取方法,属于红花油体提取方法领域。该方法包括:先将红花种子进行水洗,然后在PBS缓冲液中浸泡;将浸泡后的种子和PBS缓冲溶液进行胶体磨研磨处理;将处理后的溶液进行离心,然后加入NaCl溶液,在室温下静置2-8h,得到分层后的油体液;提取得到的上层油体液,然后加入PBS乳化机中搅拌混匀,放置在室温中静置2-4h,取上层油体,然后离心,得到红花油体。本发明的提取方法快速简单、提取量大、提取效率高、用料简单、适合工业生产。
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公开(公告)号:CN112410181A
公开(公告)日:2021-02-26
申请号:CN202011266845.7
申请日:2020-11-13
Applicant: 吉林农业大学
Abstract: 本发明公开了一种基于酵母培养物的高破壁率发酵装置,包括固定桶,所述固定桶内侧安装有翻料防堆积机构,所述翻料防堆积机构包括搅拌棒、搅拌电机、固定柱、复位弹簧、圆盘、限位柱、刮板、通风管、通风孔和螺旋板,所述固定桶内侧顶部转动连接有搅拌棒,本发明通过翻料防堆积机构,一方面便于工作人员对固定桶内的酵母液进行搅拌处理,从而使得酵母液与糖蜜等添加物充分接触,进而提高了酵母液的繁殖效率,另一方面,便于工作人员对底部和边部的酵母液进行翻料处理,从而避免底部和边部的酵母液长时间堆积造成酵母液处于休眠状态,其次,便于工作人员对发酵后的酵母液进行下料处理,避免残留的酵母液附着在固定桶内壁。
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