公开(公告)号：CN102719479A

公开(公告)日：2012-10-10

申请号：CN201210069489.9

申请日：2012-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 丁壮 ,  樊娇 ,  丛彦龙 ,  李鑫 ,  杨建新 ,  韩明明 ,  郭育培 ,  刘慧 ,  朱利塞 ,  黄志强

IPC: C12N15/861 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明涉及一种共表达两种亚型猪流感病毒HA基因重组腺病毒的制备，其特征在于：首先分别设计针对H1N1和H3N2亚型SIVHA及FMD2A引物序列，然后将其与酶切后的腺病毒穿梭载体pAdTrack连接，进行同源重组，经PCR和酶切鉴定得重组腺病毒质粒；将得到的重组腺病毒质粒线性化后转染293T细胞，包装后将得到的病毒原液感染293T细胞或MDCK细胞。该重组腺病毒为H3、H1亚型猪流感病毒双价核酸疫苗的研制提供病毒模型，也为进一步研究开发基因工程疫苗奠定了基础。2009年3月至今，流行于全球许多国家人群中的H1N1亚型流感进一步突出了SI在人类公共卫生方面具有的潜在危害性，研制高效、安全的疫苗为SI的防制提供物质储备。

公开(公告)号：CN102618581A

公开(公告)日：2012-08-01

申请号：CN201210069488.4

申请日：2012-03-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 丁壮 ,  王泽 ,  丛彦龙 ,  党源 ,  郭育培 ,  杨建新 ,  姜翠翠 ,  李想 ,  朱利塞 ,  韩明明

IPC: C12N15/867 ,  C12N15/66

Abstract: 本发明是一种利用慢病毒载体介导RNAi的方法，具体是：先对鹅源副粘病毒NA-1株NP、M基因的核酸序列进行同源性分析，找出保守区域，设计出针对保守区的siRNA；将siRNA克隆到慢病毒表达质粒pLKD-EGFP后，再与pCMV-dR8.2和pCMV-VSV-G共同转染293T细胞中，收集转染后细胞上清，经超速离心、纯化、浓缩后形成了表达siRNA的高滴度的慢病毒载体，然后将其转导入靶细胞，使其在细胞内稳定表达，发挥抗病毒效应。本发明因其高效的转导率及严格的控制体系可以真实的评价siRNA在体内的抗病毒作用，可为禽类动物分子抗病育种奠定分子生物学基础；同时为新城疫等动物源性病毒病的防治提供新的途径。

公开(公告)号：CN102495216A

公开(公告)日：2012-06-13

申请号：CN201110423389.7

申请日：2011-12-16

Applicant: 吉林大学

Inventor： 丁壮 ,  黄志强 ,  张晓东 ,  郭育培 ,  杨建新 ,  母连志

IPC: G01N33/68 ,  G01N33/531

Abstract: 本发明涉及一种猪繁殖与呼吸综合征毒病抗体胶体金快速诊断试纸条，其特征在于：试纸条由样品垫、结合垫、硝酸纤维素膜、吸收垫依次粘附在不吸水的支撑薄片上；其中结合垫上包被有胶体金标记的PRRSVNsp9蛋白；硝酸纤维素膜上分别包被有葡萄球菌蛋白A(SPA)构成的检测线T线和PRRSVNsp9单克隆抗体2D6构成的质控线C线。其利用免疫学抗原抗体能特异性结合原理，胶体金标记抗原与相应抗体结合，这种抗原抗体结合物再与葡萄球菌蛋白A(SPA)结合，形成抗原-抗体-SPA结合物在硝酸纤维素膜(NC膜)上出现颜色反应，可以肉眼观察；具有简单、快速、敏感和特异性好等特点。并且价格低廉，适用于基层或临床检测猪繁殖与呼吸综合征毒病抗体。具有特异性强、灵敏度高、操作简单和诊断快速的显著优点，可用于猪繁殖与呼吸综合征毒病的快速诊断。