适用于双向电泳的亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白样品制备方法

    公开(公告)号:CN102928278A

    公开(公告)日:2013-02-13

    申请号:CN201210450768.X

    申请日:2012-11-12

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 适用于双向电泳的亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白样品制备方法属农田害虫防控技术领域,本发明包括:将亚洲玉米螟幼虫体表消毒,收集血淋巴,每200ul血淋巴中加入10mgN-苯基硫脲;将血淋巴离心取上清分装,每管中加入80ul 50%的PEG,终浓度为40%,震荡混匀,冰浴1h;离心弃上清,沉淀中加入4倍体积冷丙酮悬浮震荡混匀,冰浴30min;将亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白粗提物溶解于水化/裂解缓冲液后,离心取上清液,得到亚洲玉米螟幼虫蛋白双向电泳样品液。采用本发明制备亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白样品快速、简易,且可获得高质量、重复性好的双向电泳图谱,便于进行后续生物质谱分析鉴定蛋白的研究,本发明可广泛应用于亚洲玉米螟幼虫血浆蛋白质组学研究,具有较高的实用价值。

    一种适用于双向电泳的蚜虫蛋白样品制备方法

    公开(公告)号:CN102721592A

    公开(公告)日:2012-10-10

    申请号:CN201210241428.6

    申请日:2012-07-12

    Applicant: 吉林大学

    Abstract: 一种适用于双向电泳的蚜虫蛋白样品制备方法属农田害虫防控技术领域,包括:将蚜虫加入液氮一起研磨成粉末,加1.5ml冷丙酮,混匀震荡,离心收集沉淀;干燥后的沉淀放入液氮和石英砂后再一次进行研磨,然后加入等体积的饱和酚溶液和SDS缓冲液;离心后吸取的酚相加入5倍体积的0.1M甲醇溶解的乙酸铵溶液,把混合液放到-20℃冰箱中沉淀2小时,沉淀先用甲醇溶解的0.1M乙酸铵溶液洗涤,然后用80%的冷丙酮洗涤,获得蚜虫蛋白粗提物;将蚜虫蛋白粗提物溶解于水化/裂解缓冲液后,离心取上清液,得到蚜虫蛋白双向电泳样品。本发明制备蚜虫蛋白样品简单快速,可获高质量、重复性好的双向电泳图谱,便于生物质谱分析鉴定蛋白,广泛用于蚜虫蛋白质组学研究。

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