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公开(公告)号:CN114561476A
公开(公告)日:2022-05-31
申请号:CN202210174823.0
申请日:2022-02-24
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了用于同时鉴别12种肉源食品的多重PCR检测用引物组和方法,特点是包括马特异性引物对、鸽子特异性引物对、骆驼特异性引物对、兔特异性引物对、鸵鸟特异性引物对、牛特异性引物对、火鸡特异性引物对、狗特异性引物对、鸡特异性引物对、鸭特异性引物对、猫特异性引物对和鹅特异性引物对,包括以下步骤1)样品DNA提取;2)根据马、鸽子、兔子、骆驼、鸵鸟、牛、猫、火鸡、狗、鸡、鸭和鹅基因序列分别设计物种特异性引物;3)多重PCR反应条件的建立;4)进行琼脂糖凝胶电泳检测判断是否掺杂以及掺杂的肉类,优点是操作简单、灵敏度高和特异性好。
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公开(公告)号:CN111387290A
公开(公告)日:2020-07-10
申请号:CN202010138550.5
申请日:2020-03-03
Applicant: 宁波大学
IPC: A23C9/13
Abstract: 本发明公开了一种具有抑制α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶活性的功能性酸乳制品及其制备方法,特点是将何首乌及葛根超微粉碎,再按一定比例与水、脱脂乳粉和白糖,经搅拌混合均匀、过滤、胶体磨乳化、杀菌、冷却、添加植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌发酵剂、混匀、灌装、发酵、冷却和后熟工艺,得到一种具有抑制α-葡萄糖苷酶和酪氨酸酶活性及抗疲劳功能的酸乳制品,优点是能显著提高多酚和黄酮苷元含量且提高小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶活性,降低丙二醛及尿素氮含量。
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公开(公告)号:CN111019958A
公开(公告)日:2020-04-17
申请号:CN201911263952.1
申请日:2019-12-11
Applicant: 宁波大学
Abstract: 本发明公开了过表达UTP-葡萄糖-1-磷酸-尿苷转移酶基因及其重组工程菌的构建方法和应用,特点是该基因来自于嗜酸乳杆菌ATCC 4356编码UTP-葡萄糖-1-磷酸-尿苷转移酶的基因,其核苷酸序列如序列表中SEQ ID No:1所示;构建方法包括以下步骤:通过克隆嗜酸乳杆菌ATCC4356的UTP-葡萄糖-1-磷酸-尿苷转移酶基因片段连接到pMG36e表达载体上,利用电转化的方法导入到肉葡萄球菌或者乳酸乳球菌中,通过红霉素抗性筛选并鉴定获得带有目的基因的重组工程菌,即过表达UTP-葡萄糖-1-磷酸-尿苷转移酶基因的工程菌,优点是显著提高菌体生长、酶活性、冻干存活率。
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公开(公告)号:CN114561476B
公开(公告)日:2024-01-23
申请号:CN202210174823.0
申请日:2022-02-24
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了用于同时鉴别12种肉源食品的多重PCR检测用引物组和方法,特点是包括马特异性引物对、鸽子特异性引物对、骆驼特异性引物对、兔特异性引物对、鸵鸟特异性引物对、牛特异性引物对、火鸡特异性引物对、狗特异性引物对、鸡特异性引物对、鸭特异性引物对、猫特异性引物对和鹅特异性引物对,包括以下步骤1)样品DNA提取;2)根据马、鸽子、兔子、骆驼、鸵鸟、牛、猫、火鸡、狗、鸡、鸭和鹅基因序列分别设计物种特异性引物;3)多重PCR反应条件的建立;4)进行琼脂糖凝胶电泳检测判断是否掺杂以及掺杂的肉类,优点是操作简单、灵敏度高和特异性好。
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公开(公告)号:CN114686600B
公开(公告)日:2023-12-12
申请号:CN202210176211.5
申请日:2022-02-24
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 作简单、灵敏度高和特异性好。本发明公开了基于七重PCR技术的肉类检测用引物组和方法,特点是包括骆驼特异性引物对、鸽子特异性引物对、鸡特异性引物对、鸭特异性引物对、马特异性引物对、牛肉特异性引物对和猪特异性引物对,其用于同时鉴别7种肉源食品的PCR检测方法,包括以下步骤1)样品DNA提取;2)根据骆驼细胞色素c氧化酶亚基Ⅲ、鸽子NADH脱氢酶6亚基、鸡D‑loop、鸭ATP酶6亚基、马NADH脱氢酶亚基4、牛肉细胞色素c氧化酶亚基Ⅱ(56)对比文件CN 102776183 A,2012.11.14杨冬燕等.用多重荧光PCR技术鉴别牛肉中掺入的猪马鸭成分的研究《.中国预防医学杂志》.2015,第第16卷卷(第第7期期),528-533.何嘉怡等.重叠PCR法构建嗜酸乳杆菌分选酶A基因外源打靶片段《.宁波大学学报(理工版)》.2017,第第30卷卷(第第6期期),21-27.
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公开(公告)号:CN111387290B
公开(公告)日:2023-01-31
申请号:CN202010138550.5
申请日:2020-03-03
Applicant: 宁波大学
IPC: A23C9/13
Abstract: 本发明公开了一种具有抑制α‑葡萄糖苷酶和酪氨酸酶活性的功能性酸乳制品及其制备方法,特点是将何首乌及葛根超微粉碎,再按一定比例与水、脱脂乳粉和白糖,经搅拌混合均匀、过滤、胶体磨乳化、杀菌、冷却、添加植物乳杆菌、嗜酸乳杆菌和嗜热链球菌发酵剂、混匀、灌装、发酵、冷却和后熟工艺,得到一种具有抑制α‑葡萄糖苷酶和酪氨酸酶活性及抗疲劳功能的酸乳制品,优点是能显著提高多酚和黄酮苷元含量且提高小鼠血清谷胱甘肽过氧化物酶、超氧化物歧化酶和乳酸脱氢酶活性,降低丙二醛及尿素氮含量。
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公开(公告)号:CN115068510A
公开(公告)日:2022-09-20
申请号:CN202210566930.8
申请日:2022-05-24
Applicant: 宁波大学
IPC: A61K35/747 , A61P29/00 , A23L33/135 , A23L33/12
Abstract: 本发明公开了一种乳杆菌脂磷壁酸的提取方法及其抗炎活性应用,特点是包括以下步骤:(1)将乳杆菌通过三氯乙酸法、TritonX‑114法或正丁醇法进行提取,获得乳杆菌脂磷壁酸粗体物;(2)将乳杆菌脂磷壁酸粗体进行疏水层析和阴离子交换层析进行纯化,得到乳杆菌脂磷壁酸产品,该乳杆菌为植物乳杆菌、罗伊氏乳杆菌或嗜酸乳杆菌,其具有在抑制LPS诱导的RAW 264.7细胞的细胞因子表达方面、制备TNF‑α和/或IL‑6抑制剂方面的应用和/或抗炎因子IL‑10的分泌激活剂方面以及以浓度依赖的方式减弱LPS诱导的p65磷酸化的应用,优点是提取方法快速高效且证明多种乳杆菌LTA均能降低LPS引起的炎症反应。
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公开(公告)号:CN113073140A
公开(公告)日:2021-07-06
申请号:CN202110433969.8
申请日:2021-04-22
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种用于同时鉴别7种肉源食品的PCR检测用引物组和方法,特点是包括火鸡特异性引物对、鹅特异性引物对、猪特异性引物对、羊特异性引物对、牛特异性引物对、鸡特异性引物对和鸭特异性引物对,其用于同时鉴别7种肉源食品的PCR检测方法,包括以下步骤:(1)样品DNA提取;(2)根据火鸡16S rRNA、鹅16S rRNA、猪细胞色素c氧化酶亚基I、绵羊细胞色素c氧化酶亚基I、黄牛16S rRNA、鸡细胞色素c氧化酶亚基I和鸭12S rRNA基因序列分别设计物种特异性引物;(3)多重PCR反应条件的建立;(4)进行琼脂糖凝胶电泳检测判断是否掺杂以及掺杂的肉类,优点是操作简单、灵敏度高和特异性好。
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公开(公告)号:CN114686600A
公开(公告)日:2022-07-01
申请号:CN202210176211.5
申请日:2022-02-24
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6888 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了基于七重PCR技术的肉类检测用引物组和方法,特点是包括骆驼特异性引物对、鸽子特异性引物对、鸡特异性引物对、鸭特异性引物对、马特异性引物对、牛肉特异性引物对和猪特异性引物对,其用于同时鉴别7种肉源食品的PCR检测方法,包括以下步骤1)样品DNA提取;2)根据骆驼细胞色素c氧化酶亚基Ⅲ、鸽子NADH脱氢酶6亚基、鸡D‑loop、鸭ATP酶6亚基、马NADH脱氢酶亚基4、牛肉细胞色素c氧化酶亚基Ⅱ和猪16SrRNA基因序列分别设计物种特异性引物;3)多重PCR反应的建立;4)进行琼脂糖凝胶电泳检测判断是否掺杂以及掺杂的肉类,优点是操作简单、灵敏度高和特异性好。
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公开(公告)号:CN113817810A
公开(公告)日:2021-12-21
申请号:CN202110905979.7
申请日:2021-08-09
Applicant: 宁波大学
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/689 , C12Q1/06 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种检测发酵乳中乳酸菌的新型qPCR方法,包括以下步骤:S1.提取6株乳酸菌的DNA,测定其浓度及纯度;S2.引物的设计和合成;S3.质粒的提取、酶切、连接与转化;S4.建立qPCR标准曲线;S5.分别测定单菌种发酵液和混合发酵酸奶中乳酸菌的含量;S6.使用流式细胞术对酸奶中乳酸菌进行计数;S7.SYTO9与PI染色剂结合激光共聚焦,区分活菌和死菌;与现有技术相比,本发明可以对酸奶中6种不同的乳酸菌进行定性定量计数,解决了现有技术中一次qPCR法只能计数一种乳酸菌的缺点,还可以对酸奶中活死菌分布进行统计,并对qPCR法计数结果中活死菌分布进行矫正,解决了qPCR法不区分活死菌的问题。
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