公开(公告)号：CN112167244A

公开(公告)日：2021-01-05

申请号：CN202011095970.6

申请日：2020-10-14

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 曹祖兵 ,  杨贤树 ,  张翔栋 ,  汝振远 ,  郭腾龙 ,  刘传江 ,  齐德周 ,  张运海

IPC: A01N1/02

Abstract: 本发明公开了一种延长冻融精子存活时间的保存方法，所述方法具体包括以下步骤：配制解冻液，利用解冻液将冷冻精子解冻，将解冻后的冷冻精液装入集精瓶中，排去集精瓶中多余空气后，将集精瓶置于装有17℃水的保温杯中，旋紧保温杯瓶盖即可进行保存。该延长冻融精子存活时间的保存方法可以保证冻融精子储存24小时依然可以保持刚解冻时的活力，完全可以满足母畜配种需求。

公开(公告)号：CN109609445A

公开(公告)日：2019-04-12

申请号：CN201910014453.2

申请日：2019-01-07

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 曹祖兵 ,  宁伟 ,  程竹兵 ,  刘洪瑜 ,  王恒 ,  刘传江 ,  高迪 ,  许腾腾 ,  张运海

IPC: C12N5/073

Abstract: 本发明公开了一种囊胚中单个卵裂球的分离方法，包括如下步骤：口吸针的制备；分离针的制备；链霉蛋白酶和胰蛋白酶的准备；囊胚透明带的去除；囊胚单个卵裂球的分离收缩后的囊胚置于50μL的胰蛋白酶液滴中温育40min，温育后，先用细口口吸针将囊胚移入1g/L的BSA液滴中洗净后，用细口口吸针快速吹吸将囊胚吹散开，直到有一些细胞团无法通过吹吸进行分离，再用分离针的细段部分将细胞团中的单个细胞分开即可，本发明采用胰蛋白酶分离囊胚单卵裂球，细胞形态完整，细胞之间间隔分明，发明所需试剂耗材容易获得，经济，发明步骤简单易行，是一种可广泛推广的简单经济有效的实用方法。

公开(公告)号：CN110016483A

公开(公告)日：2019-07-16

申请号：CN201910315164.6

申请日：2019-04-18

Applicant: 安徽农业大学

Inventor： 曹祖兵 ,  童旭 ,  刘传江 ,  张丹丹 ,  高迪 ,  许腾腾 ,  王怡青 ,  张运海

IPC: C12N15/867 ,  G01N21/64

Abstract: 本发明公开了一种研究卵母细胞体外成熟中卵丘细胞基因功能的方法，包括如下步骤：成熟碟的制备：取20.83uL成熟液于200uL离心管中，再加入1uL慢病毒，吹打混匀；将混匀后的成熟液在培养皿中做培养滴，并加入3mL矿物油，将培养皿放在培养箱平衡3-5h；慢病毒转染COCs：从卵泡中的挑选出COCs，再用成熟液IVM将COCs清洗三遍；把清洗好的COCs转染30-50h，本发明的慢病毒转染卵丘-卵母细胞复合物来发明卵母细胞成熟中卵丘基因功能的方法，通过慢病毒转染实现干扰卵丘细胞中目的基因或蛋白的表达，有效地解决卵丘细胞不能进行显微注射的问题，又能很好地发挥卵丘基因在卵母细胞成熟过程中发挥的作用。