一种慢病毒转染囊胚滋养层细胞研究其基因功能的方法

    公开(公告)号:CN109975264B

    公开(公告)日:2022-04-08

    申请号:CN201910315163.1

    申请日:2019-04-18

    Abstract: 本发明公开了一种慢病毒转染囊胚滋养层细胞研究其基因功能的方法,包括如下步骤:培养碟的制备:取20.83uL胚胎培养液置于离心管中,加入1uL慢病毒,吹打混匀;再将胚胎培养液在培养皿中做培养滴,并加入3mL矿物油,将培养皿放在培养箱平衡3‑5h。慢病毒转染囊胚:用胚胎培养液将去除透明带后的囊胚清洗干净;清洗好的囊胚置于培养碟中,转染10‑14h;用DPBS液体将囊胚清洗干净,并用4%PFA固定10‑30min,再用DPBS清洗干净;DAPI染核,压片。本发明通过慢病毒转染实现干扰滋养层细胞中目的基因表达,从而有效地解决滋养层细胞中基因不能敲低或过表达的问题。

    一种以凡士林柱为支撑的胚胎立体结构的荧光成像方法

    公开(公告)号:CN109406471A

    公开(公告)日:2019-03-01

    申请号:CN201811260712.1

    申请日:2018-10-26

    Abstract: 本发明公开了以凡士林柱为支撑的胚胎立体结构的荧光成像方法,包括如下步骤:胚胎准备;DAPI染核;制备凡士林柱支撑柱及添加抗淬灭剂:首先,用凡士林在载玻片一侧方形区域的四角点四个柱,且四个凡士林柱所围成的面积要小于盖玻片的面积;在四个凡士林柱围成区域内的正中央滴加15μL抗淬灭剂;压片、封片;激光共聚焦显微镜扫描成像;将制备凡士林柱为支撑的载玻片分别在激光共聚焦显微镜的普通光和紫外光激发下观察猪第七天囊胚的立体结构。本发明的以凡士林柱为支撑保持胚胎立体结构的荧光成像技术,通过降低胚胎立体荧光成像时耗材使用的成本而代替商业化耗材依赖的成像技术,使胚胎立体成像技术的应用更加广泛。

    油菜基因BnBPR1及其在根肿病防控中的应用

    公开(公告)号:CN118374508B

    公开(公告)日:2025-05-02

    申请号:CN202410578060.5

    申请日:2024-05-10

    Abstract: 本发明属于植物生物技术领域,具体的,本发明提供了油菜BnBPR1基因及其在油菜根肿病抗性中的应用。本发明通过基因编辑技术敲除油菜中的两个同源拷贝BnaA10.PBR1和BnaC09.PBR1,获得了BnBPR1基因突变的纯合双突变体并分析其抗病功能,揭示了该基因对油菜抗根肿病具有负调控作用,明确可以通过对油菜BnBPR1基因的两个同源拷贝BnaA10.PBR1和BnaC09.PBR1进行基因编辑获得对根肿病抗性增强的纯合双突变体转基因油菜新材料。本发明的发现对于油菜根肿病防治具有重要的意义以及应用价值,可用于油菜抗根肿病新品种的育种中。

    一种深度取土的土壤取样装置
    4.
    发明公开

    公开(公告)号:CN119666455A

    公开(公告)日:2025-03-21

    申请号:CN202510182121.0

    申请日:2025-02-19

    Abstract: 本发明公开了一种深度取土的土壤取样装置,涉及土壤取样技术领域,包括土壤深钻机构,所述土壤深钻机构包含有钻杆升降组件、钻台、钻杆轴承和中空螺旋钻杆,所述钻杆升降组件上安装有钻台,所述钻台的中部通过钻杆轴承转动连接中空螺旋钻杆的顶部,中空螺旋钻杆的顶部连接动力组件,还包括无扰动土壤取样机构、遮光土壤取样机构和遮光土壤盛放机构,该深度取土的土壤取样装置,先采用中空螺旋钻杆钻入土层内,避开土壤上层中石头等杂物的影响,让无扰动土壤取样筒能够取到土层深处的无扰动土样,遮光土壤取样机构和遮光土壤盛放机构配合在地下完成对深层土样较为封闭的采集取样,利于提升深层土样采集的准确性。

    一种能够维持囊胚立体结构的移胚针

    公开(公告)号:CN110013292A

    公开(公告)日:2019-07-16

    申请号:CN201910426993.1

    申请日:2019-05-21

    Abstract: 本发明公开了一种能够维持囊胚立体结构的移胚针。该移胚针包括细开口端和粗开口端,且粗开口端的开口直径大于细开口端的开口直径;细开口端的内圆直径为0.20mm~0.28mm,壁厚为0.01mm~0.05mm,且细开口端的端口平齐光滑。将移胚针的粗开口端与口吸管的一端连接,口吸管的另一端与移液吸头连接,由此组装构成一种口吸式移胚器。将移胚针的粗开口端与注射器的管嘴通过连接管连接,则构成一种手持式移胚器。本发明提供了一种用于收集囊胚且能维持囊胚立体结构的专用工具——移胚针。该移胚针系采用常见易得的试验材料制成,且制作方法简单便捷,易操作易掌握。使用该移胚针能够大大提高囊胚收集的工作效率。

    一种简易的斑点杂交加样方法

    公开(公告)号:CN109504742A

    公开(公告)日:2019-03-22

    申请号:CN201811311187.1

    申请日:2018-11-06

    Abstract: 本发明公开了一种简易的斑点杂交加样方法,包括如下步骤:猪耳缘成纤维细胞的培养;细胞RNA的提取、浓度的测定以及调整;添加样品:预热金属浴至85℃,并将硝酸纤维素膜裁剪至所需要的合适大小;通过美纹纸将硝酸纤维素膜固定于层板上;在硝酸纤维素膜上于85℃烘烤下进行加样;加样后用重物压住层板,以使硝酸纤维素膜和金属浴紧密接触;进行斑点杂交;分析结果,比较灰度值。本发明整合利用了实验室里现有的资源,仅仅利用了盛装白枪头的层板和恒温金属浴,节省了很多耗材,而且省下了安装多管吸印仪耗费的时间和人力,还对加样操作进行了简化,对于技术优化具有重大意义。

    一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法

    公开(公告)号:CN109280637A

    公开(公告)日:2019-01-29

    申请号:CN201811259177.8

    申请日:2018-10-26

    Abstract: 本发明公开了一种高效去除猪未成熟卵母细胞周围卵丘细胞的方法,包括以下步骤:配制以氯化钠作为溶质,TCM199作为溶剂配制成含有1wt%Nacl的液体,测量液体的渗透压,过滤,分装,加热至38.5℃备用;将卵泡液中的卵丘卵母细胞挑到盛有洗卵液的培养皿中,移入盛有400μL 1wt%Nacl液体的1.5mL离心管中,将离心管置涡旋振荡5分钟,再瞬时离心,转移到培养皿中;借助口吸管针将除去卵丘颗粒细胞的卵母细胞转移至TCM199操作液中,且快速清洗3遍,并置于盛有TCM199液滴中恢复5分钟,本发明通过1wt%Nacl处理去除猪未成熟卵母细胞外围卵丘细胞,具有省时、成本低、安全高效等优势。

    一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法

    公开(公告)号:CN109112100A

    公开(公告)日:2019-01-01

    申请号:CN201811027903.3

    申请日:2018-09-04

    Abstract: 本发明公开了一种猪小有腔的卵丘卵母细胞复合体的收集方法,以猪的卵巢为原材料,通过卵巢采集、器材消毒、卵泡吸取、卵母细胞收集等步骤,收集卵母细胞的效果最佳,回收效率最高,能够充分利用手中现有的资源,简单、经济、高效的回收猪小有腔卵泡的卵泡液以及卵丘卵母细胞复合体,对于今后有关于猪小有腔卵泡中的卵母细胞发育的研究以及畜牧业的发展提供了丰富的材料。

    一种早期妊娠诊断教学模型的制作方法及应用

    公开(公告)号:CN108806446A

    公开(公告)日:2018-11-13

    申请号:CN201711188749.3

    申请日:2017-11-24

    CPC classification number: G09B23/281 G09B23/286

    Abstract: 本发明提供了一种早期妊娠诊断教学模型的制作方法,包括以下步骤:步骤(1):根据不同胎龄胚胎的体尺数据制作相应的胚胎模型;步骤(2):基于上述的胚胎模型制作相应的胚胎教学模型;步骤(3):将上述的胚胎教学模型置于有第一种溶液的隔离装置中并整体没入盛有第二种溶液的盛放装置中;步骤(4):在兽用B超仪的探头上涂抹耦合剂,浸入盛放装置的第二种溶液中观察胚胎教学模型形态,以此模拟体外妊娠诊断,通过本发明的早期妊娠诊断教学模型对母牛进行早期妊娠诊断,可使母牛的妊娠诊断提早到配种后30d内,减少空怀率,降低因母牛空怀导致的饲草料资源浪费,提高繁殖效率,增加产业经济效益。

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