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公开(公告)号：CN116953232A
公开(公告)日：2023-10-27
申请号：CN202310658716.X
申请日：2023-06-06
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
IPC: G01N33/569 , C07K14/14 , C12N15/46 , C12N15/70
Abstract: 本发明公开了一种基于兔轮状病毒VP8*蛋白的间接ELISA抗体检测试剂盒，包括兔轮状病毒VP8*蛋白包被的ELISA板；所述兔轮状病毒VP8*蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。还包括样品稀释液，浓缩洗涤液，酶结合物工作液等。所述间接ELISA抗体检测试剂盒在检测兔轮状病毒抗体中的应用。本发明以兔轮状病毒VP8*蛋白为包被抗原，其对于RVs抗体的特异性高，安全性好，只与RVs阳性血清特异结合，不与兔其它病毒的阳性血清发生交叉反应，具有良好的抗原性。本发明的间接ELISA抗体检测试剂盒具有很高的特异性和敏感性，可实现对兔轮状病毒抗体的高通量检测，为兔轮状病毒的综合防控提供了技术支撑。
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公开(公告)号：CN105754959A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610141600.9
申请日：2016-03-13
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
CPC classification number: C12N7/00 , A61K39/12 , A61K2039/5256 , A61K2039/70 , C07K14/005 , C12N2760/18121 , C12N2760/18134 , C12N2760/18151 , C12N2770/32422 , C12N2770/32434
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种共表达DHAV?1型和DHAV?3型的VP1基因的NDV重组病毒。所述重组病毒记为rLS?1VP1?2A?3VP1，是将DHAV?1型和DHAV?3型VP1基因串联后插入到NDV为载体，经拯救获得的重组病毒。本发明所述重组病毒选择NDV(Lasota株)为载体，将DHAV?1型和DHAV?3型的VP1基因串联后插入到NDV(Lasota株)为载体，并通过确定DHAV VP1基因插入的最佳插入位点，获得共表达DHAV?1型和DHAV?3型的VP1基因的NDV重组病毒，可用于鸭甲肝病毒(1型、3型)和鸭新城疫的预防，弥补当前DHAV?3疫苗的空白。
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公开(公告)号：CN105754959B
公开(公告)日：2019-05-31
申请号：CN201610141600.9
申请日：2016-03-13
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种共表达DHAV‑1型和DHAV‑3型的VP1基因的NDV重组病毒。所述重组病毒记为rLS‑1VP1‑2A‑3VP1，是将DHAV‑1型和DHAV‑3型VP1基因串联后插入到NDV为载体，经拯救获得的重组病毒。本发明所述重组病毒选择NDV(Lasota株)为载体，将DHAV‑1型和DHAV‑3型的VP1基因串联后插入到NDV(Lasota株)为载体，并通过确定DHAV VP1基因插入的最佳插入位点，获得共表达DHAV‑1型和DHAV‑3型的VP1基因的NDV重组病毒，可用于鸭甲肝病毒(1型、3型)和鸭新城疫的预防，弥补当前DHAV‑3疫苗的空白。
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公开(公告)号：CN112322765B
公开(公告)日：2022-11-22
申请号：CN202011100878.4
申请日：2020-10-15
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的特异性引物，包括CO5S/5A和TR11S/11A，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示。还公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的试剂盒，包括上述特异性引物。还公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的双重PCR方法：提取待检测样品的DNA；以DNA为模板，利用上述特异性引物或试剂盒进行PCR扩增，得扩增产物；扩增产物进行凝胶电泳，依据凝胶电泳结果进行判断：若同时扩增出428bp和176bp的产物，则该样品为球虫和组织滴虫阳性；若单独扩增出428bp的产物，则该样品为球虫阳性；若单独扩增出176bp的产物，则该样品为组织滴虫阳性。本发明的能够快速准确的对鸡球虫和组织滴虫进行检出，可最低检测到0.026ng球虫DNA和0.35ng组织滴虫DNA，敏感性高。
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公开(公告)号：CN112322765A
公开(公告)日：2021-02-05
申请号：CN202011100878.4
申请日：2020-10-15
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
IPC: C12Q1/6893 , C12Q1/686 , C12N15/11
Abstract: 本发明公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的特异性引物，包括CO5S/5A和TR11S/11A，其核苷酸序列如SEQ ID NO.1～4所示。还公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的试剂盒，包括上述特异性引物。还公开了一种快速检测鸡球虫与组织滴虫的双重PCR方法：提取待检测样品的DNA；以DNA为模板，利用上述特异性引物或试剂盒进行PCR扩增，得扩增产物；扩增产物进行凝胶电泳，依据凝胶电泳结果进行判断：若同时扩增出428bp和176bp的产物，则该样品为球虫和组织滴虫阳性；若单独扩增出428bp的产物，则该样品为球虫阳性；若单独扩增出176bp的产物，则该样品为组织滴虫阳性。本发明的能够快速准确的对鸡球虫和组织滴虫进行检出，可最低检测到0.026ng球虫DNA和0.35ng组织滴虫DNA，敏感性高。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN111961754A
公开(公告)日：2020-11-20
申请号：CN202010783904.1
申请日：2020-08-06
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
IPC: C12Q1/70 , C12Q1/6844 , C12N15/11
Abstract: 本发明提供了一种LaRV重组聚合酶等温扩增检测方法，包括特异性检测兔轮状病毒(Lapine Rotavirus，LaRV)的RPA引物，所述引物对应的特异性扩增片段位于LaRV NSP5基因的第117-324位点之间，大小为208bp；本发明还包括利用重组酶聚合酶的非诊断目的的LaRV检测方法。本发明所述检测LaRV的特异性引物，是根据LaRV的NSP5基因序列设计的引物，并基于该特异性引物的性质，本发明进一步优化建立了适宜于快速准确进行LaRV检测的等温扩增基因方法。最低检出病毒量为0.1LD50。该方法操作简单、快速，适用于临床生产和实验室的快速诊断。
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公开(公告)号：CN111254187A
公开(公告)日：2020-06-09
申请号：CN201811459047.9
申请日：2018-11-30
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌多重PCR检测方法。本发明根据兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌的保守基因序列设计的特异性引物，并进一步优化建立了适宜于快速准确进行兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌检测的多重PCR扩增方法。该方法可特异性地检测出混合感染的兔肺炎克雷伯氏菌、沙门氏菌、波氏杆菌，检测成本低、效率高，适用于相关临床病例的快速诊断及流行病学调查。
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公开(公告)号：CN118668009A
公开(公告)日：2024-09-20
申请号：CN202410679443.1
申请日：2024-05-29
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
Abstract: 本发明公开一种兔轮状病毒基因分型的多重RT‑PCR检测的引物及检测方法，属于生物技术领域。所述引物包含以下3对特异性引物对，其核苷酸序列分别如SEQ ID NO.1～6所示。检测的基因型包括G3、P[22]和P[41]。本发明能够快速高效地检测出兔轮状病毒的3种基因型，可以有效的节约稀少样本，同时节省试剂，具有较高的灵敏度和特异性，结果判断简单，应用方便，检测成本低、效率高，适用于相关临床病例的快速基因分型及流行病学调查，为兔轮状病毒分型的特异性检测及兔轮状病毒的监测提供参考。
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公开(公告)号：CN111676198A
公开(公告)日：2020-09-18
申请号：CN202010426547.3
申请日：2020-05-19
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心) , 山东和康源生物育种股份有限公司
Abstract: 本发明公开了一种快速构建鸭坦布苏病毒反向遗传株的方法：(1)将鸭坦布苏病毒亲本病毒株全基因组分为三个片段进行PCR扩增，在第一个片段的5'端添加巨细胞病毒早期启动子序列，在第三个片段的3'端添加丁型肝炎病毒核酶序列和猿猴病毒40多腺苷酸化信号序列；纯化，构成鸭坦布苏病毒感染性亚基因组复制子；(2)转染鸭胚成纤维细胞，在细胞内自发进行同源重组，并转录形成具有感染性的完整病毒转录本，继而包装出成熟的病毒粒子，获得反向遗传株病毒。本发明获得的含有遗传标记的拯救病毒在DEF细胞上的增殖能力和病毒滴度与亲本病毒相似，且遗传稳定性良好。本发明为研究该病毒的基因功能、致病机理、新型疫苗开发等提供了有利的工具。
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公开(公告)号：CN109161604A
公开(公告)日：2019-01-08
申请号：CN201810982747.X
申请日：2018-08-27
Applicant: 山东省农业科学院家禽研究所(山东省无特定病原鸡研究中心)
IPC: C12Q1/689 , C12Q1/6844 , C12Q1/10 , C12N15/11 , C12R1/22
Abstract: 本发明属于分子生物学技术领域，具体涉及一种兔肺炎克雷伯氏菌重组聚合酶等温扩增检测方法。本发明根据兔肺炎克雷伯氏菌的PhoE基因序列设计的特异性引物，并进一步优化建立了适宜于快速准确进行兔肺炎克雷伯氏菌检测的重组酶聚合酶等温扩增方法。该方法可特异性地检测出兔肺炎克雷伯氏菌，其最低检出细菌量为83CFU/mL，灵敏度比传统PCR高出100倍。由于整个基因扩增只需一个温度，不需要特殊的仪器设备，操作更简单、快速，适用于生产中兔肺炎克雷伯氏菌的现场快速检测。
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