一种人源肺炎支原体培养基及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113637613B

    公开(公告)日:2023-02-28

    申请号:CN202111089602.5

    申请日:2021-09-17

    Abstract: 本发明属于微生物技术领域,涉及一种人源肺炎支原体培养基及其制备方法,培养基由基础培养基、培养基添加剂、胎牛血清和青霉素钠按体积比800 ml:(0.5~1.5)ml:(180~220)ml:(2.0~3.0)ml配制而成;基础培养基包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、细菌蛋白胨、丙酮酸钠、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、L‑半胱氨酸、葡萄糖和酚红;培养基添加剂中包含谷胱甘肽和维生素C。该培养基能够满足该人源肺炎支原体的生长需求,大大加快肺炎支原体的生长及繁殖速度,解决了现有肺炎支原体培养基存在的培养条件复杂、人源肺炎支原体生长速度缓慢、培养步骤繁琐等问题,对肺炎支原体抗原的获取及其科学研究具有重要意义。

    一种检测抗肺炎支原体抗体的天然抗原P1及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113817032A

    公开(公告)日:2021-12-21

    申请号:CN202111145464.8

    申请日:2021-09-28

    Abstract: 本发明属于生物学检测技术领域,具体涉及一种检测抗肺炎支原体抗体的天然抗原P1及其制备方法和应用,制备步骤为:取灭活的人肺炎支原体抗原培养液,离心得到肺炎支原体菌体,经支原体洗涤液洗涤后离心,弃上清,沉淀即为肺炎支原体;将其放入裂解液中,37℃水浴孵育,‑20℃冻存后复融,离心后的沉淀用支原体洗涤液重悬,离心留沉淀;将沉淀重悬在裂解液中,超声后离心,上清液即为抗原粗品;粗品过滤后的上清进行离心超滤,收集膜上的蛋白,即为天然抗原P1。该方法步骤简单,适于推广大量生产,制得的天然抗原P1对肺炎支原体抗体有很好的特异性和敏感性,从而进一步提高肺炎支原体抗体在疾病诊断中的临床检测敏感性和特异性。

    一种人源肺炎支原体培养基及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN113637613A

    公开(公告)日:2021-11-12

    申请号:CN202111089602.5

    申请日:2021-09-17

    Abstract: 本发明属于微生物技术领域,涉及一种人源肺炎支原体培养基及其制备方法,培养基由基础培养基、培养基添加剂、胎牛血清和青霉素钠按体积比800 ml:(0.5~1.5)ml:(180~220)ml:(2.0~3.0)ml配制而成;基础培养基包括胰蛋白胨、大豆蛋白胨、细菌蛋白胨、丙酮酸钠、牛肉浸粉、酵母浸粉、氯化钠、L‑半胱氨酸、葡萄糖和酚红;培养基添加剂中包含谷胱甘肽和维生素C。该培养基能够满足该人源肺炎支原体的生长需求,大大加快肺炎支原体的生长及繁殖速度,解决了现有肺炎支原体培养基存在的培养条件复杂、人源肺炎支原体生长速度缓慢、培养步骤繁琐等问题,对肺炎支原体抗原的获取及其科学研究具有重要意义。

    一种肺炎衣原体的高效培养方法及其天然抗原的制备方法与应用

    公开(公告)号:CN115786209B

    公开(公告)日:2025-01-28

    申请号:CN202211600864.8

    申请日:2022-12-13

    Abstract: 本发明公开了一种肺炎衣原体的高效培养方法及其天然抗原的制备方法与应用,肺炎衣原体的高效培养方法包括以下步骤:S1、肺炎衣原体释放:将肺炎衣原体从宿主细胞中进行裂解释放;S2、PEG预处理宿主细胞:在宿主细胞中加入5‑10%聚乙二醇,预处理1h;S3、肺炎衣原体侵染宿主细胞:将肺炎衣原体接种至宿主细胞中,进行孵育;60‑80r/min,摇床慢摇1h;S4、肺炎衣原体的培养:将上一步的混合培养液静置培养2h后,将培养基更换为含放线菌酮的肺炎衣原体生长液,继续培养3d‑7d;S5、肺炎衣原体的收集:镜检观察,收集细胞悬液,得到肺炎衣原体中间品。本发明还提供采用肺炎衣原体中间品制备天然抗原的方法。该培养方法制备的肺炎衣原体的产量高,成本低,适合大规模生产。

    一种抗SSA抗体重组蛋白抗原及其制备方法和应用

    公开(公告)号:CN117624377A

    公开(公告)日:2024-03-01

    申请号:CN202311369115.3

    申请日:2023-10-20

    Abstract: 本发明公开了一种抗SSA抗体重组蛋白抗原及其制备方法和应用,抗SSA抗体重组蛋白抗原,其包括抗SSA抗体Ro60蛋白片段和Ro52蛋白片段,其氨基酸序列如SEQ ID NO:1所示,所述抗SSA抗体Ro60蛋白从N‑末端第139位到第401位的263个氨基酸,Ro52蛋白从N‑末端第287位到第475位的189个氨基酸。本申请还提供一种上述的抗SSA抗体重组蛋白抗原的编码基因,其核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示。所述抗SSA抗体重组蛋白抗原具有特异性好、灵敏度高的特点,能够克服现有技术所存在的假阳性等问题,其产量高、操作简单、生产成本低,可借助现有的原核表达体系进行工业化生产。该重组抗原可用于制备抗核抗体的磁微粒化学反光检测试剂盒,该试剂盒的灵敏度高、线性范围宽、反应迅速、操作简单。

    分泌抗Trx蛋白单克隆抗体的杂交瘤细胞株、抗Trx蛋白单克隆抗体注意:申请人在申请日后补交了实验数据,但该数据并未包含在本授权公告文档中。

    公开(公告)号:CN113999819B

    公开(公告)日:2023-11-28

    申请号:CN202111327071.9

    申请日:2021-11-10

    Abstract: 其传代细胞株,命名为16H6,保藏于中国典型培本发明属于免疫学和体外诊断分支技术领 养物保藏中心,保藏编号为CCTCC NO.C2021186。域。用于Trx蛋白的单克隆抗体灵敏度、特异性以 本发明的杂交瘤细胞株能够稳定分泌抗Trx蛋白及亲和力上都存在一些缺陷,还有较大的改善空 单克隆抗体,分泌的抗体具有高亲和力和特异间,本领域对于Trx蛋白的单克隆抗体的仍然存 性,可用于体外诊断的多个分支领域。(56)对比文件滕宗艳、于维汉.硫氧还蛋白系统研究进展.《微量元素与健康研究》.2002,第19卷(第02期),第66-71页.Richard R. Dickason等.Versatile E.coli thioredoxin specific monoclonalantibodies afford convenient analysis andpurification of prokaryote expressedsoluble fusion protein《.Journal ofImmunological Methods》.1995,第185卷(第02期),第237-244页.唐文心等.抗人硫氧还蛋白-1单克隆抗体的制备与鉴定及初步应用《.细胞与分子免疫学杂志》.2008,第24卷(第06期),第597-600页.刘飞等.抗细菌硫氧化还原蛋白Thioredoxin单克隆抗体的制备、鉴定与初步应用《.细胞与分子免疫学杂志》.1999,第15卷(第03期),第221-224页.井金苗.家蝇硫氧还蛋白2单克隆抗体的制备及抗氧化研究《.中国优秀硕士学位论文全文数据库》.2021,基础科学专辑(2021年第09期),全文.Preparation and identification ofmonoclonal antibodies against recombinanthuman thioredoxins.Preparation andidentification of monoclonal antibodiesagainst recombinant human thioredoxins.《Hybridoma》.2007,第26卷(第05期),第338-341页.

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