公开(公告)号：CN107603957A

公开(公告)日：2018-01-19

申请号：CN201710935163.2

申请日：2017-10-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李拓凡 ,  孙舒 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢菁 ,  吕璐

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，本发明采用鸡肝细胞可高效扩增J亚群禽白血病病毒，利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，缩短J亚群禽白血病病毒分离检测时间，实现提早检测到病原，提高J亚群禽白血病病毒检测方法的敏感度。在J亚群禽白血病病毒感染MOI为0.001时，ELISA检测感染维持培养3天的鸡肝细胞的效果与感染维持培养7天的DF-1细胞相当。本发明建立发高效扩增方法的将加快J亚群禽白血病病毒的净化进程，节约时间、成本，本发明在J亚群禽白血病病毒净化检测中具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN107603957B

公开(公告)日：2020-12-29

申请号：CN201710935163.2

申请日：2017-10-10

Applicant: 扬州大学

Inventor： 叶建强 ,  李拓凡 ,  孙舒 ,  邵红霞 ,  秦爱建 ,  谢菁 ,  吕璐

IPC: C12N7/00 ,  C12N5/071

Abstract: 本发明涉及一种高效扩增J亚群禽白血病病毒的方法，本发明采用鸡肝细胞可高效扩增J亚群禽白血病病毒，利用鸡肝细胞可以更早产生高滴度病毒的特性，缩短J亚群禽白血病病毒分离检测时间，实现提早检测到病原，提高J亚群禽白血病病毒检测方法的敏感度。在J亚群禽白血病病毒感染MOI为0.001时，ELISA检测感染维持培养3天的鸡肝细胞的效果与感染维持培养7天的DF‑1细胞相当。本发明建立发高效扩增方法的将加快J亚群禽白血病病毒的净化进程，节约时间、成本，本发明在J亚群禽白血病病毒净化检测中具有很好的应用价值。

公开(公告)号：CN107365787A

公开(公告)日：2017-11-21

申请号：CN201710763557.4

申请日：2017-08-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  孙舒 ,  秦爱建 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  顾晨曦 ,  武宗仪

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/79

CPC classification number: C12N15/66 ,  C12N15/79

Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用，涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX-6p-1-p27/BL21质粒作为模板，采用特异性引物进行PCR扩增，回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接，得到阳性的重组质粒，即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理，真核表达载体转染细胞表达后，可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中，为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。

公开(公告)号：CN107365787B

公开(公告)日：2024-02-06

申请号：CN201710763557.4

申请日：2017-08-30

Applicant: 扬州大学

Inventor： 钱琨 ,  孙舒 ,  秦爱建 ,  程晓薇 ,  孔正茹 ,  顾晨曦 ,  武宗仪

IPC: C12N15/66 ,  C12N15/79

Abstract: 具有免疫抑制作用禽白血病病毒衣壳蛋白真核表达载体的构建方法及应用，涉及病毒编码蛋白表达及功能研究生物技术领域。本发明以pGEX‑6p‑1‑p27/BL21质粒作为模板，采用特异性引物进行PCR扩增，回收PCR片段后与pcDNA3.1载体链接，得到阳性的重组质粒，即具有抑制细胞对LPS和Poly(I:C)刺激免疫反应功能的真核表达载体。本发明构建方法简单、合理，真核表达载体转染细胞表达后，可应用于抑制LPS或Poly(I:C)刺激细胞免疫反应中，为抗禽白血病免疫抑制药物的研究与开发提供靶点。