反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒及其检测方法

    公开(公告)号:CN104513865B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201410690212.7

    申请日:2014-11-25

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12Q1/68 Y02A50/51

    Abstract: 本发明公开了一种反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒及其检测方法,本发明的一种反转录PCR检测基孔肯雅病毒的试剂盒,包括引物、探针和FRET-PCR标准品,所述引物为上游引物和下游引物;所述探针为6-FAM探针和LCRed640探针;所述上游引物具有SEQ ID No.1的核苷酸序列;所述6-FAM探针具有SEQ ID No.2的核苷酸序列;所述LCRed640探针具有SEQ ID No.3的核苷酸序列;所述下游引物具有SEQ ID No.4的核苷酸序列。本发明所建立的反转录PCR体系可以有效的扩增RNA,即可以快速、有效地扩增临床样品中基孔肯雅病毒RNA核酸。

    一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株构建方法与应用

    公开(公告)号:CN106148376B

    公开(公告)日:2020-08-11

    申请号:CN201610536854.0

    申请日:2016-07-09

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株的构建方法,包括如下步骤:1)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因进行无痕点突变:对无抗生素抗性基因的K88ac+产肠毒素大肠杆菌的LT I基因上的TCT突变成AAA,使其对应编码的63号位的丝氨酸(S)突变成赖氨酸(K);2)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因的敲除:在步骤1)的基础上,敲除K88ac+产肠毒素大肠杆菌的STⅡ基因,从而达到致弱K88ac+产肠毒素大肠杆菌的目的。使用本发明方法构建的致弱菌粘附性强、体内定植时间长、接种后能防止致病菌株的感染,可用于K88ac+ETEC引起的大肠杆菌病的生物预防。

    一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株构建方法与应用

    公开(公告)号:CN106148376A

    公开(公告)日:2016-11-23

    申请号:CN201610536854.0

    申请日:2016-07-09

    Applicant: 扬州大学

    CPC classification number: C12N15/70 A61K35/74 C07K14/245 C12N15/66

    Abstract: 本发明提供了一种K88ac+产肠毒素大肠杆菌致弱株的构建方法,包括如下步骤:1)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因进行无痕点突变:对无抗生素抗性基因的K88ac+产肠毒素大肠杆菌的LT I基因上的TCT突变成AAA,使其对应编码的63号位的丝氨酸(S)突变成赖氨酸(K);2)对K88ac+产肠毒素大肠杆菌肠毒素基因的敲除:在步骤1)的基础上,敲除K88ac+产肠毒素大肠杆菌的STⅡ基因,从而达到致弱K88ac+产肠毒素大肠杆菌的目的。使用本发明方法构建的致弱菌粘附性强、体内定植时间长、接种后能防止致病菌株的感染,可用于K88ac+ETEC引起的大肠杆菌病的生物预防。

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