基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN111235172B

    公开(公告)日:2021-10-19

    申请号:CN202010113295.9

    申请日:2020-02-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统,该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子,Cat基因,rrnbT1T2,lambda t0转录终止子,源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI位点被沉默突变的lacZ基因。本发明还公开原核启动子报告系统的构建方法及应用。本发明构建的质粒pFGH06大小为4949bp,28℃培养条件下的背景活性仅为12.2±0.6,极显著低于低拷贝参考质粒pRCL的背景活性21.3±1.7,并应用于诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM的克隆及活性测定,在模拟应用于启动子筛选时,可通过蓝白斑筛选实现对目标启动子的100%识别。

    一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN104611441A

    公开(公告)日:2015-05-13

    申请号:CN201510056721.9

    申请日:2015-02-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1、2、3所示,所述探针1如SEQ ID NO.4、5、6所示,将上述引物和探针与PCR反应液组成定量PCR检测试剂盒。本发明根据衣原体23S rRNA基因的保守区域设计引物(2条上游引物和1条针对所有11种衣原体的下游引物)和探针(3条探针)。巧妙地设计PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有11种衣原体的核酸,并可依据熔解曲线Tm值分型,适用于大量临床样品的检测。

    一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒

    公开(公告)号:CN104611441B

    公开(公告)日:2016-02-24

    申请号:CN201510056721.9

    申请日:2015-02-03

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明提供了一种检测所有11种衣原体的定量PCR的引物、探针及试剂盒。所述引物序列如SEQ ID NO.1、2、3所示,所述探针1如SEQ ID NO.4、5、6所示,将上述引物和探针与PCR反应液组成定量PCR检测试剂盒。本发明根据衣原体23S rRNA基因的保守区域设计引物(2条上游引物和1条针对所有11种衣原体的下游引物)和探针(3条探针)。巧妙地设计PCR的引物和探针,可以特异地扩增所有11种衣原体的核酸,并可依据熔解曲线Tm值分型,适用于大量临床样品的检测。

    基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统及其构建方法和应用

    公开(公告)号:CN111235172A

    公开(公告)日:2020-06-05

    申请号:CN202010113295.9

    申请日:2020-02-24

    Applicant: 扬州大学

    Abstract: 本发明公开基于lacZ基因和pUC复制子的原核启动子报告系统,该报告系统包括源自pFLX107的pUC复制子,Cat基因,rrnbT1T2,lambda t0转录终止子,源自质粒pRCL且内部ClaI、SacI和NdeI位点被沉默突变的lacZ基因。本发明还公开原核启动子报告系统的构建方法及应用。本发明构建的质粒pFGH06大小为4949bp,28℃培养条件下的背景活性仅为12.2±0.6,极显著低于低拷贝参考质粒pRCL的背景活性21.3±1.7,并应用于诱导型启动子araBAD和组成型启动子rpsM的克隆及活性测定,在模拟应用于启动子筛选时,可通过蓝白斑筛选实现对目标启动子的100%识别。

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