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公开(公告)号：CN114606147A
公开(公告)日：2022-06-10
申请号：CN202210253230.3
申请日：2022-03-15
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N9/04 , C12N9/90 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12P33/02 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种同时增强和抑制酿酒酵母7‑脱氢胆固醇合成中多个关键基因的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过dCpf1‑VP激活系统和dCas9‑RD抑制系统，实现13个P450酶的同时表达和抑制的目的，构建出一种高产7‑脱氢胆固醇的工程酵母菌，使得7‑DHC的产量达到464mg/L。
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公开(公告)号：CN116790393B
公开(公告)日：2024-05-31
申请号：CN202310742722.3
申请日：2023-06-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造酿酒酵母菌以葡萄糖为底物合成活性VD3的方法，属于生物技术领域。本发明通过导入DHCR24，强化ERG1，ERG11，tHMG1，ERG7，ERG2，敲除ERG6基因，并通过导入不同的羟化酶确定最合适的维生素D3羟化酶，发现在酵母中VDH无需提供额外的电子传递链便可以发挥作用，将合成的VD3转化为25‑OH‑VD3，并且合成25‑OH‑VD3的量是suaC的5倍。在以葡萄糖为底物的发酵生产中，最终合成5.02mg/L的活性体25‑OH‑VD3，解决了现有技术中仅能以VD3作为底物转化活性体25‑OH‑VD3的问题。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN116790393A
公开(公告)日：2023-09-22
申请号：CN202310742722.3
申请日：2023-06-21
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种改造酿酒酵母菌以葡萄糖为底物合成活性VD3的方法，属于生物技术领域。本发明通过导入DHCR24，强化ERG1，ERG11，tHMG1，ERG7，ERG2，敲除ERG6基因，并通过导入不同的羟化酶确定最合适的维生素D3羟化酶，发现在酵母中VDH无需提供额外的电子传递链便可以发挥作用，将合成的VD3转化为25‑OH‑VD3，并且合成25‑OH‑VD3的量是suaC的5倍。在以葡萄糖为底物的发酵生产中，最终合成5.02mg/L的活性体25‑OH‑VD3，解决了现有技术中仅能以VD3作为底物转化活性体25‑OH‑VD3的问题。
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公开(公告)号：CN114606147B
公开(公告)日：2022-12-16
申请号：CN202210253230.3
申请日：2022-03-15
Applicant: 江南大学
IPC: C12N1/19 , C12N9/04 , C12N9/90 , C12N9/02 , C12N9/10 , C12N15/53 , C12N15/54 , C12N15/61 , C12N15/81 , C12P33/02 , C12R1/865
Abstract: 本发明提供了一种同时增强和抑制酿酒酵母7‑脱氢胆固醇合成中多个关键基因的方法，属于生物工程技术领域。本发明通过dCpf1‑VP激活系统和dCas9‑RD抑制系统，实现13个P450酶的同时表达和抑制的目的，构建出一种高产7‑脱氢胆固醇的工程酵母菌，使得7‑DHC的产量达到464mg/L。
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公开(公告)号：CN119979588A
公开(公告)日：2025-05-13
申请号：CN202411961026.2
申请日：2024-12-30
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种降低副产物的甾醇C24‑还原酶突变体及产7‑脱氢胆固醇的酿酒酵母，属于生物技术领域。本发明为了解决目前7‑DHC合成过程中，由于关键酶DHCR24底物谱广而导致副产物产生和催化活性低的问题，通过酶工程改造探究，对DHCR24第162位的亮氨酸和386位的天冬氨酸进行突变，获得一种甾醇C24‑还原酶突变体DHCR24M。将该突变体导入酿酒酵母出发菌株中，经过发酵验证发现，相对于未突变菌株，突变菌株的副产物cholest‑7‑en‑3‑ol和cholesta‑5,7‑dien‑3‑ol分别降低31.5％和46.1％，目标产物提升90.2％，为工业生产7‑脱氢胆固醇和活性维生素D3提供新的思路和方法，具有十分广阔的应用前景。
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公开(公告)号：CN112813129B
公开(公告)日：2023-09-08
申请号：CN202110160871.X
申请日：2021-02-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种利用区室化提高酵母菌中7‑脱氢胆固醇产量的方法，本发明以酵母菌为出发菌株，表达异源的甾醇△24‑还原酶和△‑胆甾烯醇酶，在酿酒酵母S288C中经过检测7‑DHC的产量为10.15mg/L，通过我们的发明，将7‑DHC合成路径中的部分酶使用氧化酶体和线粒体定位标签定位在酿酒酵母中各区室化中，形成相对独立的7‑DHC合成途径，同时也增加了7‑DHC合成所需前体物质的储存空间，也减少了反馈作用，在同一区室中，酶与酶之间的转化效率提高，减少作用底物的损失，最终实现7‑DHC产量提升4倍，达到53.31mg/L。
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公开(公告)号：CN112813129A
公开(公告)日：2021-05-18
申请号：CN202110160871.X
申请日：2021-02-05
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明涉及一种利用区室化提高酵母菌中7‑脱氢胆固醇产量的方法，本发明以酵母菌为出发菌株，表达异源的甾醇△24‑还原酶和△‑胆甾烯醇酶，在酿酒酵母S288C中经过检测7‑DHC的产量为10.15mg/L，通过我们的发明，将7‑DHC合成路径中的部分酶使用氧化酶体和线粒体定位标签定位在酿酒酵母中各区室化中，形成相对独立的7‑DHC合成途径，同时也增加了7‑DHC合成所需前体物质的储存空间，也减少了反馈作用，在同一区室中，酶与酶之间的转化效率提高，减少作用底物的损失，最终实现7‑DHC产量提升4倍，达到53.31mg/L。
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