-
公开(公告)号：CN108410845B
公开(公告)日：2020-09-04
申请号：CN201810311758.5
申请日：2018-04-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的D,D‑羧肽酶DacA突变体及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明公开了由大肠杆菌(Escherichia coli)BL21来源的D,D‑羧肽酶DacA为母本，基于酶结构解析确定关键位点及突变方式，经分子生物学技术进行定点突变而获得催化效率提高的DacA突变体。在此改造条件下，E.coli D,D‑羧肽酶DacA的突变体K113G催化效率常数kcat值提高最多，由6543.4s‑1提高至9428.1s‑1。利用此策略可以显著提高D,D‑羧肽酶DacA的催化效率，为其在代谢改造E.coli提高其胞外分泌水平等方面的应用提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
-
公开(公告)号：CN105837543B
公开(公告)日：2018-11-09
申请号：CN201610202443.8
申请日：2016-04-01
Applicant: 江南大学
IPC: C07D309/40
Abstract: 本发明公开一种从发酵液中提取精制曲酸的方法，属于提取技术领域，解决提取技术中的提取方法脱色率低、耗时、得率低等问题。具体步骤为：将曲酸发酵液过滤除菌、阳离子交换树脂去除杂质阳离子、浓缩结晶、活性炭脱色和浓缩重结晶步骤，得到曲酸产品；所述活性炭脱色步骤采用粉末活性炭，在活性炭加量为发酵液的0.4～0.6％，脱色温度为75～85℃，保温0.5～1h，发酵液pH为3～4条件下进行的，最终获得了白色针状曲酸晶体，纯度达到98％以上。本发明具有曲酸发酵液脱色率高，曲酸损失率低等优点。
-
公开(公告)号：CN105837543A
公开(公告)日：2016-08-10
申请号：CN201610202443.8
申请日：2016-04-01
Applicant: 江南大学
IPC: C07D309/40
CPC classification number: C07D309/40
Abstract: 本发明公开一种从发酵液中提取精制曲酸的方法，属于提取技术领域，解决提取技术中的提取方法脱色率低、耗时、得率低等问题。具体步骤为：将曲酸发酵液过滤除菌、阳离子交换树脂去除杂质阳离子、浓缩结晶、活性炭脱色和浓缩重结晶步骤，得到曲酸产品；所述活性炭脱色步骤采用粉末活性炭，在活性炭加量为发酵液的0.4～0.6％，脱色温度为75～85℃，保温0.5～1h，发酵液pH为3～4条件下进行的，最终获得了白色针状曲酸晶体，纯度达到98％以上。本发明具有曲酸发酵液脱色率高，曲酸损失率低等优点。
-
Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN105779484A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610218659.3
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/485 , C12N15/66 , C12N2800/101 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种基于dacD提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至32.02％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
公开(公告)号：CN105755029A
公开(公告)日：2016-07-13
申请号：CN201610218976.5
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/67 , C12N2800/101 , C12P21/00
Abstract: 本发明公开了一种基于dacA提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至51.77％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
公开(公告)号：CN109234297A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811172964.9
申请日：2018-10-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，属于基因工程与发酵工程领域。本发明通过敲除D-丙氨酰-D-丙氨酸羧肽酶dacA和dacB基因(单敲除和双敲除)，获得重组蛋白胞外分泌水平显著提高的重组大肠杆菌突变株。采用绿色荧光蛋白(GFP)和淀粉酶为模式重组蛋白，证明了本发明方法可显著提高胞外蛋白的含量。单敲除和复合敲除dacA和dacB后，GFP胞外荧光值分别提高2.1、2.1和2.7倍；单敲除和复合敲除dacA和dacB后，淀粉酶胞外酶活力占总酶活力的比例分别由对照菌的40.7％提高至44.7％、62.1％和64.2％。本发明方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
公开(公告)号：CN108410845A
公开(公告)日：2018-08-17
申请号：CN201810311758.5
申请日：2018-04-09
Applicant: 江南大学
Abstract: 本发明公开了一种催化效率提高的D,D-羧肽酶DacA突变体及其制备方法，属于遗传工程和酶工程领域。本发明公开了由大肠杆菌(Escherichia coli)BL21来源的D,D-羧肽酶DacA为母本，基于酶结构解析确定关键位点及突变方式，经分子生物学技术进行定点突变而获得催化效率提高的DacA突变体。在此改造条件下，E.coli D,D-羧肽酶DacA的突变体K113G催化效率常数kcat值提高最多，由6543.4s-1提高至9428.1s-1。利用此策略可以显著提高D,D-羧肽酶DacA的催化效率，为其在代谢改造E.coli提高其胞外分泌水平等方面的应用提供了基础。此策略对其它酶的性质改造具有重要的指导意义。
-
公开(公告)号：CN105779485A
公开(公告)日：2016-07-20
申请号：CN201610219101.7
申请日：2016-04-08
Applicant: 江南大学
CPC classification number: C12N15/70 , C12N9/2411 , C12N9/485 , C12N2800/101 , C12P21/005 , C12Y304/16004
Abstract: 本发明公开了一种基于dacB提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平的方法，涉及基因工程与发酵工程领域。本发明通过过量表达D?丙氨酰?D?丙氨酸羧肽酶基因，获得重组蛋白胞外分泌水平过了表达的重组大肠杆菌。本发明提供一种提高大肠杆菌重组蛋白胞外分泌水平方法。采用该方法可显著提高大肠杆菌菌株的重组蛋白分泌能力。采用淀粉酶为模式重组蛋白，通过该方法可将大肠杆菌胞外重组淀粉酶含量由对照组的8.54％提高至55.80％。该方法对重组蛋白在大肠杆菌中的高效分泌与生产具有重要指导意义。
-
-
-
-
-
-
-
Search Results
8
records
(took 0.019 seconds)
