公开(公告)号：CN109971696A

公开(公告)日：2019-07-05

申请号：CN201910212743.8

申请日：2019-03-20

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘延峰 ,  堵国成 ,  刘龙 ,  李江华 ,  赵林 ,  陈坚

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/61 ,  C12N15/60 ,  C12N15/75 ,  C12P13/02 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了一种全细胞转化法高产N‑乙酰神经氨酸的重组菌及应用，属于遗传工程领域。本发明以枯草芽孢杆菌作为表达宿主，过量表达来源于鱼腥藻的N‑乙酰氨基葡萄糖异构酶(AGE)和来源于溶血性葡萄球菌的N‑乙酰神经氨酸醛缩酶(ShNanA)，并将基因tufA的N末端编码序列进一步融合到ShNanA编码序列的5'‑末端，通过敲除生成副产物乙偶姻的相关基因alsS和alsD基因，得到一株高产N‑乙酰神经氨酸的重组枯草芽孢杆菌，能够全细胞转化生产N‑乙酰神经氨酸，产量达93.78g/L，N‑乙酰氨基葡萄糖的摩尔转化率为50.54％，为枯草芽孢杆菌工程化生产N‑乙酰神经氨酸奠定了基础。

公开(公告)号：CN108285886A

公开(公告)日：2018-07-17

申请号：CN201810090664.X

申请日：2018-01-30

Applicant: 江南大学

Inventor： 陈坚 ,  堵国成 ,  刘延峰 ,  李江华 ,  赵林

IPC: C12N1/21 ,  C12N15/75 ,  C12P19/26 ,  C12R1/125

Abstract: 本发明公开了重组枯草芽孢杆菌全细胞转化生产N-乙酰神经氨酸的方法，属于遗传工程领域。本发明是以枯草芽孢杆菌作为表达宿主，通过游离质粒pP43NMK过量来源于念珠藻(Anabaena sp.CH1)的N-乙酰氨基葡萄糖异构酶(AGE)和来源于大肠杆菌(Escherichia coli K12)的N-乙酰神经氨酸醛缩酶(NanA)，得到了积累N-乙酰神经氨酸的重组枯草芽孢杆菌基因工程菌，以N-乙酰氨基葡萄糖和丙酮酸钠为底物进行全细胞转化，N-乙酰神经氨酸产量达到21.89g/L，为实现利用食品安全级的枯草芽孢杆菌生产N-乙酰神经氨酸工业化奠定了基础。