公开(公告)号：CN117535362A

公开(公告)日：2024-02-09

申请号：CN202311488717.0

申请日：2023-11-09

Applicant: 江南大学 ,  鄂尔多斯市中轩生化股份有限公司

Inventor： 刘龙 ,  陈坚 ,  孙正艳 ,  吕雪芹 ,  李延福 ,  王宇 ,  堵国成 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  廖超

IPC: C12P19/26 ,  C12N1/21 ,  C12N15/56 ,  C12N15/55 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/61 ,  C12N15/62 ,  C12N15/70 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种基于蛋白组装支架合成乳酰‑N‑新四糖的方法，属于代谢工程技术领域。本发明基于合成乳酰‑N‑新四糖中关键酶在空间上分布分散，造成中间体扩散，最终导致胞内酶促反应速率降低的问题，使用质粒异源表达了含有融合小肽SH3lig的β‑1,3‑N‑乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶lgtA和含有融合小肽PDZlig的β‑1,4‑半乳糖基转移酶lgtB，同时融合表达蛋白组装支架PDZ和SH3，构建了一种基于蛋白组装支架合成乳酰‑N‑新四糖的重组大肠杆菌，使得关键酶基因在大肠杆菌中高效催化，最终乳酰‑N‑新四糖在摇瓶中的产量达到1699mg/L，为乳酰‑N‑新四糖的高效合成和进一步的产业化奠定了基础。

公开(公告)号：CN118064341A

公开(公告)日：2024-05-24

申请号：CN202410229553.8

申请日：2024-02-29

Applicant: 江南大学

Inventor： 刘龙 ,  陈坚 ,  吕雪芹 ,  堵国成 ,  徐显皓 ,  李江华 ,  刘延峰 ,  廖超

IPC: C12N1/21 ,  C12P19/26 ,  C12R1/19

Abstract: 本发明公开了一种合成乳酰‑N‑新四糖的无质粒重组大肠杆菌及其应用，属于代谢工程技术领域。本发明基于蛋白组装支架PDZ和SH3，连接表达β‑1,3‑N‑乙酰氨基葡萄糖氨基转移酶LgtA和β‑1,4‑半乳糖基转移酶LgtB，并将其在基因组位点进行整合表达，最终构建合成乳酰‑N‑新四糖的无质粒重组大肠杆菌。乳酰‑N‑新四糖的摇瓶产量达到1.99g/L，在不含有机氮源并以葡萄糖和乳糖作为碳源的培养基进行发酵时，乳酰‑N‑新四糖在3‑L发酵罐中的产量达到23.73g/L，为乳酰‑N‑新四糖的高效合成和进一步的产业化奠定了基础。