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公开(公告)号：CN102286110B
公开(公告)日：2012-11-21
申请号：CN201110263958.6
申请日：2011-09-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖。本发明通过将聚半乳糖醛酸酶展示在毕赤酵母细胞外，利用该酶制剂协同超声波处理破碎紫菜细胞，工艺简便、条件温和、易于控制、安全可靠，能获得较高得率、较高纯度的紫菜多糖。
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公开(公告)号：CN102321596B
公开(公告)日：2012-11-14
申请号：CN201110260328.3
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型脂肪酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型脂肪酶加入水中混匀，35～37℃下酶解反应30～45min后于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示脂肪酶对紫菜细胞的细胞膜进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102517225A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110446693.3
申请日：2011-12-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表面展示淀粉酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将淀粉酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将淀粉酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示淀粉酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的淀粉酶，且酵母发酵培养后可直接作为淀粉酶制剂使用。
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公开(公告)号：CN102321598A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110260334.9
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀，于35～37℃下酶解反应30～45min，再于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示果胶酶对紫菜细胞的细胞壁进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102296101A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110268705.8
申请日：2011-09-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种微胶囊包埋的紫菜降血压肽的制备方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率730～750W的超声波破碎1～2小时，分离纯化制得紫菜蛋白；将紫菜蛋白、酵母展示型蛋白酶加入水中混匀，于35～40℃搅拌反应2～2.5小时，分离纯化制得紫菜降血压肽；利用β-环糊精包埋紫菜降血压肽。本发明利用酵母表面展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理溶出紫菜蛋白，再经酵母表面展示型蛋白酶酶解及微胶囊包埋技术制备紫菜降血压肽微胶囊，能获得较高得率、较高活力持续性的紫菜降血压肽。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102286110A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110263958.6
申请日：2011-09-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖。本发明通过将聚半乳糖醛酸酶展示在毕赤酵母细胞外，利用该酶制剂协同超声波处理破碎紫菜细胞，工艺简便、条件温和、易于控制、安全可靠，能获得较高得率、较高纯度的紫菜多糖。
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公开(公告)号：CN102321596A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110260328.3
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型脂肪酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型脂肪酶加入水中混匀，35～37℃下酶解反应30～45min后于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示脂肪酶对紫菜细胞的细胞膜进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102517224A
公开(公告)日：2012-06-27
申请号：CN201110446673.6
申请日：2011-12-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种表面展示纤维素酶的重组酿酒酵母及构建方法和应用。该重组酿酒酵母的构建方法为：将纤维素酶基因插入酿酒酵母表达载体pGMAK中GAL1启动子下游MFα1信号肽与酿酒酵母的细胞壁α凝集素基因之间，构建获得重组质粒；采用同源重组技术将酿酒酵母的GAL1基因替换为GAL4基因，将所述重组质粒转入该细胞，获得重组酿酒酵母。本发明通过同源重组技术获得了具有双重GAL4基因的重组酿酒酵母，可有效提高GAL1启动子表达效率；同时，细胞壁α凝集素能将纤维素酶高密度展示表达在酿酒酵母细胞壁外表面。利用该重组酿酒酵母表面展示纤维素酶，表达效率较高，表达量较大，能获得较高酶活的纤维素酶，且酵母发酵培养后可直接作为纤维素酶制剂使用。
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公开(公告)号：CN102321598B
公开(公告)日：2013-07-24
申请号：CN201110260334.9
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀，于35～37℃下酶解反应30～45min，再于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示果胶酶对紫菜细胞的细胞壁进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102296101B
公开(公告)日：2013-06-05
申请号：CN201110268705.8
申请日：2011-09-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种微胶囊包埋的紫菜降血压肽的制备方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率730～750W的超声波破碎1～2小时，分离纯化制得紫菜蛋白；将紫菜蛋白、酵母展示型蛋白酶加入水中混匀，于35～40℃搅拌反应2～2.5小时，分离纯化制得紫菜降血压肽；利用β-环糊精包埋紫菜降血压肽。本发明利用酵母表面展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理溶出紫菜蛋白，再经酵母表面展示型蛋白酶酶解及微胶囊包埋技术制备紫菜降血压肽微胶囊，能获得较高得率、较高活力持续性的紫菜降血压肽。
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