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公开(公告)号：CN102321598A
公开(公告)日：2012-01-18
申请号：CN201110260334.9
申请日：2011-09-05
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型果胶酶协同超声波破碎紫菜细胞的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型果胶酶加入水中混匀，于35～37℃下酶解反应30～45min，再于30～32℃下利用功率为730～750W的超声波破碎65～70min；本发明还公开了一种提取紫菜蛋白和紫菜多糖的方法，将上述紫菜细胞破碎后的细胞破碎液分离即可；本发明还公开了一种制备紫菜降血压肽的方法，即将分离的紫菜蛋白利用蛋白酶在在36～37℃下酶解反应130～133min即可。本发明的方法利用酵母展示果胶酶对紫菜细胞的细胞壁进行降解并协同超声波处理，高效破碎紫菜细胞，提高紫菜细胞破碎率，增加紫菜多糖、紫菜蛋白和紫菜降血压肽的得率。
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公开(公告)号：CN102296101A
公开(公告)日：2011-12-28
申请号：CN201110268705.8
申请日：2011-09-08
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种微胶囊包埋的紫菜降血压肽的制备方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率730～750W的超声波破碎1～2小时，分离纯化制得紫菜蛋白；将紫菜蛋白、酵母展示型蛋白酶加入水中混匀，于35～40℃搅拌反应2～2.5小时，分离纯化制得紫菜降血压肽；利用β-环糊精包埋紫菜降血压肽。本发明利用酵母表面展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理溶出紫菜蛋白，再经酵母表面展示型蛋白酶酶解及微胶囊包埋技术制备紫菜降血压肽微胶囊，能获得较高得率、较高活力持续性的紫菜降血压肽。
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公开(公告)号：CN102286110A
公开(公告)日：2011-12-21
申请号：CN201110263958.6
申请日：2011-09-07
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示型聚半乳糖醛酸酶协同超声波处理提取紫菜多糖的方法，包括：将紫菜干粉、酵母展示型聚半乳糖醛酸酶加入水中混匀，于35～37℃搅拌反应30～45分钟，再于28～35℃利用功率为730～750W的超声波破碎1～2小时，得到细胞破碎液，分离纯化制得紫菜多糖。本发明通过将聚半乳糖醛酸酶展示在毕赤酵母细胞外，利用该酶制剂协同超声波处理破碎紫菜细胞，工艺简便、条件温和、易于控制、安全可靠，能获得较高得率、较高纯度的紫菜多糖。
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公开(公告)号：CN102242089A
公开(公告)日：2011-11-16
申请号：CN201010172843.1
申请日：2010-05-14
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明的一种提高脂肪酶活性的方法，包括以下步骤：将脂肪酶基因(Genbank号：AF229435)连接在酿酒酵母细胞壁成份α凝集素序列(Genbank号：M28164)的N端，然后插入酿酒酵母表达载体GAL1启动子(Genbank号：AY428072)下游MFα1信号肽序列(Genbank号：M17301)的C端，构建成表达框，表达框从N端到C端：GAL1启动子+MFα1信号肽序列+脂肪酶基因+α凝集素序列；将包含该表达框的酵母质粒转化入酿酒酵母细胞。本发明的优点：将亚油酸异构酶展露表达在酿酒酵母细胞壁外表面，实现酶与细胞外底物的完全接触，从而显著提高亚油酸异构酶活性。
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公开(公告)号：CN102212601A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110110428.8
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的方法，包括：将维生素A醋酸酯和棕榈酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，无氧条件下于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得维生素A棕榈酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成维生素A棕榈酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN102212579A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110110318.1
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成葡萄糖豆蔻酸酯的方法，包括：将葡萄糖和豆蔻酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得葡萄糖豆蔻酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成葡萄糖豆蔻酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102212572A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110109010.5
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸油酸酯的方法，包括：将L-抗坏血酸和油酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，无氧条件下于50～60℃反应4～8小时，分离、纯化制得L-抗坏血酸油酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸油酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102212571A
公开(公告)日：2011-10-12
申请号：CN201110108792.0
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成L-抗坏血酸EPA酯的方法，包括：将L-抗坏血酸和EPA溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，无氧条件下于50～60℃反应4～8小时，分离、纯化制得L-抗坏血酸EPA酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成L-抗坏血酸EPA酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102212578B
公开(公告)日：2014-01-29
申请号：CN201110109007.3
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成果糖棕榈酸酯的方法，包括：将果糖和棕榈酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得果糖棕榈酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS 115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成果糖棕榈酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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公开(公告)号：CN102212601B
公开(公告)日：2013-08-14
申请号：CN201110110428.8
申请日：2011-04-28
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种酵母展示脂肪酶催化合成维生素A棕榈酸酯的方法，包括：将维生素A醋酸酯和棕榈酸溶于有机溶剂中，加入酵母展示脂肪酶，无氧条件下于50～60℃反应10～14小时，分离、纯化制得维生素A棕榈酸酯；将经线性化处理的重组质粒转入毕赤酵母(Pichia pastoris)GS115，将所得转化子接种于BMMY培养基中，诱导培养72～144小时后离心收集菌体，菌体经冲洗、生物印迹和冷冻干燥制得酵母展示脂肪酶；本发明通过将脂肪酶展示在细胞外，利用该酶制剂催化合成维生素A棕榈酸酯，不仅提高了转化效率，而且缩短了反应时间，降低了生产成本。
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