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公开(公告)号：CN114875003B
公开(公告)日：2024-05-24
申请号：CN202210358563.2
申请日：2022-04-06
Applicant: 浙江大学 , 杭州馨海酶源生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种短链脱氢酶的突变体，所述突变体为突变体L104A、突变体A150Y、突变体Y155A、突变体I158A、突变体I202A或者突变体T205A；所述短链脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的短链脱氢酶突变体相对野生型短链脱氢酶有更高的酶活性，可以泼尼松或者配合水解酶以醋酸泼尼松为底物制备泼尼松龙，底物的转化率高，产物的收率高，无副产物产生，而且反应可在更高的底物浓度水平下进行，适宜规模化生产。
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公开(公告)号：CN114875003A
公开(公告)日：2022-08-09
申请号：CN202210358563.2
申请日：2022-04-06
Applicant: 浙江大学 , 杭州馨海酶源生物科技有限公司
Abstract: 本发明属于生物工程技术领域，具体涉及一种短链脱氢酶的突变体，所述突变体为突变体L104A、突变体A150Y、突变体Y155A、突变体I158A、突变体I202A或者突变体T205A；所述短链脱氢酶的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明的短链脱氢酶突变体相对野生型短链脱氢酶有更高的酶活性，可以泼尼松或者配合水解酶以醋酸泼尼松为底物制备泼尼松龙，底物的转化率高，产物的收率高，无副产物产生，而且反应可在更高的底物浓度水平下进行，适宜规模化生产。
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公开(公告)号：CN113817693A
公开(公告)日：2021-12-21
申请号：CN202111123587.1
申请日：2021-09-24
Applicant: 杭州馨海酶源生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及睾酮制备技术领域，公开了可用于不对称催化制备睾酮的短链羰基还原酶PpYSDR突变体，该突变体由短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列的第85位甲硫氨酸突变为谷氨酰胺、第88位亮氨酸突变为天冬酰胺、第136位亮氨酸突变为丙氨酸和第143位天冬氨酸突变为丙氨酸中的一种或几种后得到；短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。上述突变得到的短链羰基还原酶PpYSDR的突变体具有很高的催化雄烯二酮转化成睾酮的活性，可以游离酶、固定化酶或重组游离细胞的形式催化合成睾酮，雄烯二酮的转化率高，睾酮的收率高，选择性高。
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公开(公告)号：CN113817693B
公开(公告)日：2022-11-11
申请号：CN202111123587.1
申请日：2021-09-24
Applicant: 杭州馨海酶源生物科技有限公司
Abstract: 本发明涉及睾酮制备技术领域，公开了可用于不对称催化制备睾酮的短链羰基还原酶PpYSDR突变体，该突变体由短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列的第85位甲硫氨酸突变为谷氨酰胺、第88位亮氨酸突变为天冬酰胺、第136位亮氨酸突变为丙氨酸和第143位天冬氨酸突变为丙氨酸中的一种或几种后得到；短链羰基还原酶PpYSDR的氨基酸序列如SEQ ID NO.2所示。上述突变得到的短链羰基还原酶PpYSDR的突变体具有很高的催化雄烯二酮转化成睾酮的活性，可以游离酶、固定化酶或重组游离细胞的形式催化合成睾酮，雄烯二酮的转化率高，睾酮的收率高，选择性高。
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公开(公告)号：CN118440832A
公开(公告)日：2024-08-06
申请号：CN202410527388.4
申请日：2024-04-29
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产类视黄醇的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。本发明以产类视黄醇的工程菌株为出发菌，导入多向耐药性蛋白编码基因PDR3、PDR8、PDR10、PDR11、PDR12、PDR18、AUS1、SNQ2、YOR1、透明颤菌血红蛋白编码基因VGB中的一个或多个，提升合成产物转运，进一步的，将线粒体融合相关蛋白编码基因MGM1导入工程菌株细胞内，通过促进线粒体融合提升ATP供应改善类视黄醇的分泌和合成。本发明通过基因改造，显著提高类视黄醇的产量，优于现有报道，具有良好的应用前景。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN114196560B
公开(公告)日：2024-02-09
申请号：CN202111571019.8
申请日：2021-12-21
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种分阶段多层次调控异源合成的基因工程菌及其构建方法，属于基因工程技术领域。所述基因工程菌中构建有参与目标产物异源合成的酶编码基因和温度敏感蛋白编码基因，其中参与中间产物合成过程的酶的编码基因上游具有葡萄糖响应启动子，参与中间产物转化成目标产物过程的酶的编码基因上游具有由温度敏感蛋白控制激活的启动子。本发明利用葡萄糖响应控制中间产物合成途径，并利用温度调控系统控制下游模块，通过碳源和温度双重信号将细胞生长、中间产物积累和中间产物转化分成三个阶段，该调控手段可同时解决细胞生长与产物积累之间的矛盾以及细胞内部途径竞争这两大关键问题，为微生物异源合成叶黄素及其他天然产物提供了新的思路。
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公开(公告)号：CN113604374B
公开(公告)日：2023-09-15
申请号：CN202110958208.4
申请日：2021-08-20
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产类胡萝卜素的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述基因工程菌以产类胡萝卜素的工程菌株为出发菌，其染色体上整合了多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3；或者，所述基因工程菌以产类胡萝卜素的工程菌株为出发菌，宿主菌内含有包含了多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3的重组表达质粒。本发明通过在产类胡萝卜素的工程菌株中导入多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3，使得相应转录调控因子在菌株内成功表达，促进类胡萝卜素的合成，显著提高类胡萝卜素的产量，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113604374A
公开(公告)日：2021-11-05
申请号：CN202110958208.4
申请日：2021-08-20
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种高效生产类胡萝卜素的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程技术领域。所述基因工程菌以产类胡萝卜素的工程菌株为出发菌，其染色体上整合了多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3；或者，所述基因工程菌以产类胡萝卜素的工程菌株为出发菌，宿主菌内含有包含了多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3的重组表达质粒。本发明通过在产类胡萝卜素的工程菌株中导入多向耐药性转录因子编码基因PDR1或PDR3，使得相应转录调控因子在菌株内成功表达，促进类胡萝卜素的合成，显著提高类胡萝卜素的产量，具有良好的应用前景。
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公开(公告)号：CN113265344A
公开(公告)日：2021-08-17
申请号：CN202110545875.X
申请日：2021-05-19
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种选择性生产视黄醇的基因工程菌及其构建方法和应用，属于基因工程领域。所述基因工程菌为以产β‑胡萝卜素的工程菌株为出发菌，导入β‑胡萝卜素15，15’‑双加氧酶编码基因以及醛还原酶编码基因或/和视黄醇脱氢酶编码基因，实现以细胞工厂选择性地生产视黄醇。为进一步提高视黄醇的产量，所述基因工程菌还导入了香叶基香叶基焦磷酸合酶突变体编码基因、切除N端线粒体定位肽的NADH激酶的编码基因，同时其甲羟戊酸途径转录抑制因子基因被敲除，增加前体和辅酶的供应。本发明还提供了利用该基因工程菌生产视黄醇的方法，在发酵过程中添加亚铁离子和抗氧化剂，使视黄醇产量得到进一步提高。
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公开(公告)号：CN112574898A
公开(公告)日：2021-03-30
申请号：CN202011310379.8
申请日：2020-11-20
Applicant: 浙江大学
Abstract: 本发明公开了一种用于生产叶黄素的重组酵母，在酵母中外源导入八氢番茄红素合酶基因、八氢番茄红素脱氢酶基因、番茄红素ε‑环化酶基因、番茄红素β‑环化酶基因、胡萝卜素β‑羟化酶基因和胡萝卜素ε‑羟化酶基因。本发明通过基因克隆和密码子优化，获得六个可以在酵母中成功表达的酶，构建得到生产叶黄素的基因工程酵母菌株。在八氢番茄红素合酶、八氢番茄红素脱氢酶、番茄红素ε‑环化酶的催化下生产δ‑胡萝卜素，然后在番茄红素β‑环化酶、胡萝卜素β‑羟化酶、胡萝卜素ε‑羟化酶的催化下将δ‑胡萝卜素转化成叶黄素。
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