公开(公告)号：CN105603027A

公开(公告)日：2016-05-25

申请号：CN201610039583.8

申请日：2016-01-21

Applicant: 遵义医学院

Inventor： 陈富超 ,  孙万邦 ,  罗军敏 ,  张磊 ,  刘凯山 ,  温琼娜

IPC: C12P21/02 ,  C12N15/81 ,  A61K38/20 ,  A61P37/06

CPC classification number: C07K14/5428 ,  A61K38/13 ,  A61K38/2066 ,  A61K2300/00

Abstract: 本发明公开了医药生物技术领域的一种白细胞介素-10的制备工艺及应用，制备工艺包括：PCR扩增hIL-10基因、构建hIL-10表达载体、转化DH5α感受态细胞、重组质粒鉴定、电转化毕赤酵母X-33菌株重组酵母菌的筛选、rhIL-10蛋白表达及鉴定试剂配制、rhIL-10的诱导表达、rhIL-10的检测、分离、Westernblot鉴定、分装保存，制备的rhIL-10，在自身免疫性疾病、感染性疾病、肿瘤及移植免疫等多种疾病中发挥重要作用。本发明主要关键技术包括hIL-10在毕赤酵母X-33中诱导表达的培养基改良配方、培养条件、起始酵母菌浓度、目的蛋白收集时间、rhIL-10的纯化技术，rhIL-10在抗皮肤抑制排斥反应的家兔皮肤移植模型及动物试验中的用药,rhIL-10在抗佐剂性关节炎大鼠模型的实验治疗应用等。