公开(公告)号：CN117646039A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202311676546.4

申请日：2023-12-07

Applicant: 郑州大学

Inventor： 许敬亮 ,  古仕明 ,  吕迎珠 ,  李西子 ,  吕永坤 ,  熊文龙 ,  张申 ,  赵安琪

IPC: C12P7/04 ,  C12N15/60 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种利用D‑葡萄糖为底物生物合成异戊醇的方法。涉及生物化工领域，其特征在于，以解脂耶氏酵母Po1g菌株为底盘细胞，通过筛选不同来源的酶优化Harris途径，在YPD培养基中利用D‑葡萄糖生物合成异戊醇。Harris途径涉及醇脱氢酶(EC 1.1.1.‑)和酮酸脱羧酶(EC 4.1.1.1)，利用上述2种酶构建共表达质粒，构建出产异戊醇的工程菌Po1g/pYLXP’‑kivd‑yqhd。结果表明，菌株Po1g/pYLXP’‑kivd‑yqhd可以在SD‑leu培养基中催化2g/L的α‑酮异己酸为底物生物合成51.9mg/L异戊醇；在YPD培养基中以40g/L的D‑葡萄糖为底物生物合成0.312mg/L异戊醇，是Po1g/pYLXP’菌株异戊醇产量的1.53倍。本发明是一种优化解脂耶氏酵母Po1g菌株Harris途径来提高生物合成异戊醇产量的方法，进一步的基因线路及发酵工艺优化有望大幅提高异戊醇产量。

公开(公告)号：CN119193658A

公开(公告)日：2024-12-27

申请号：CN202411462978.X

申请日：2024-10-20

Applicant: 郑州大学

Inventor： 许敬亮 ,  李西子 ,  古仕明 ,  吕永坤 ,  熊文龙 ,  张申 ,  赵安琪

IPC: C12N15/81 ,  C12P7/04 ,  C12N15/53 ,  C12N15/54 ,  C12N15/60 ,  C12N15/62 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明涉及一种利用线粒体区室化提高解脂耶氏酵母菌中异戊醇产量的方法，本发明以解脂耶氏酵母Po1f为出发菌株，将异戊醇途径中的部分酶使用线粒体定位标签定位在解脂耶氏酵母的区室化中，形成相对独立的异戊醇合成途径，同时也将异戊醇合成所需前体物质富集起来，在同一区室中，酶与酶之间的转化效率提高，减少作用底物的损失，最终在SD‑Leu‑Ura培养基中，将异戊醇产量提升88.72％，达到0.412mg/L。