公开(公告)号：CN117646039A

公开(公告)日：2024-03-05

申请号：CN202311676546.4

申请日：2023-12-07

Applicant: 郑州大学

Inventor： 许敬亮 ,  古仕明 ,  吕迎珠 ,  李西子 ,  吕永坤 ,  熊文龙 ,  张申 ,  赵安琪

IPC: C12P7/04 ,  C12N15/60 ,  C12N15/53 ,  C12N1/19 ,  C12N15/81 ,  C12R1/645

Abstract: 本发明提供一种利用D‑葡萄糖为底物生物合成异戊醇的方法。涉及生物化工领域，其特征在于，以解脂耶氏酵母Po1g菌株为底盘细胞，通过筛选不同来源的酶优化Harris途径，在YPD培养基中利用D‑葡萄糖生物合成异戊醇。Harris途径涉及醇脱氢酶(EC 1.1.1.‑)和酮酸脱羧酶(EC 4.1.1.1)，利用上述2种酶构建共表达质粒，构建出产异戊醇的工程菌Po1g/pYLXP’‑kivd‑yqhd。结果表明，菌株Po1g/pYLXP’‑kivd‑yqhd可以在SD‑leu培养基中催化2g/L的α‑酮异己酸为底物生物合成51.9mg/L异戊醇；在YPD培养基中以40g/L的D‑葡萄糖为底物生物合成0.312mg/L异戊醇，是Po1g/pYLXP’菌株异戊醇产量的1.53倍。本发明是一种优化解脂耶氏酵母Po1g菌株Harris途径来提高生物合成异戊醇产量的方法，进一步的基因线路及发酵工艺优化有望大幅提高异戊醇产量。