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公开(公告)号：CN108342458B
公开(公告)日：2020-07-10
申请号：CN201810331118.0
申请日：2018-04-13
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6876
Abstract: 本发明提供了一种基于基因表达监控的麦芽浸出率评价方法，涉及食品检测领域。该方法包括总RNA的提取与纯化、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细管电泳得到基因电泳图谱、图谱数据分析得到麦芽水解相关基因的表达峰高H、利用麦芽水解相关基因的表达峰高H计算麦芽浸出率，针对麦芽水解相关基因LD，AMY1，AMY4，GLU，ASP，CYS，SERⅠ，SERⅢ，MET，TRX，PDI，SEP，WRKY和内控基因ACT。该方法能够基于淀粉、蛋白水解酶的基因表达监控，建立预测麦芽浸出率的方法，从而用于评价麦芽浸出率；与传统的测定方法相比，准确度高，效率高且方法简便。
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公开(公告)号：CN109234273A
公开(公告)日：2019-01-18
申请号：CN201811203952.8
申请日：2018-10-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
Abstract: 本发明提出一种用于极限糊精酶基因克隆的引物、试剂盒及克隆方法，属于基因克隆技术领域，能够解决目前麦芽RNA提取较为困难，步骤繁琐复杂，而导致RNA纯度与质量不高，无法得到全长极限糊精酶基因的问题。该技术方案包括根据极限糊精酶基因序列设计五段基因序列，针对其中四段基因序列LD-2、LD-3、LD-4、LD-5设计上下游特异性引物，利用上下游引物克隆极限糊精酶基因，包括：极限糊精酶基因片段合成、重叠延伸PCR、全长基因的获得。本发明原理简单，操作简便，有效解决了大麦长片段目的基因难以扩增的难题；且该方法对麦芽RNA的纯度和产量要求较低；极限糊精酶的基因克隆及其N端序列优化为异源表达以及酶学性质研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN108913807A
公开(公告)日：2018-11-30
申请号：CN201810959649.4
申请日：2018-08-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明提出一种用于筛选低蛋白酶A基因表达的酵母菌株的多重引物、试剂盒及筛选方法，属于食品检测领域，能够解决传统的通过测定蛋白酶A活力筛选低蛋白酶A基因表达的酵母菌株耗时长、检测过程繁琐、检测周期长的问题。该技术方案包括多重引物的设计、以酵母菌株总RNA为模板依次进行反转录合成cDNA模板、多重PCR扩增反应、毛细管电泳分离，并利用GeXP系统对毛细管电泳分离结果进行分析；以内参基因为对照，结合关键基因对应峰的峰面积计算蛋白酶A基因的表达量，并根据蛋白酶A基因的表达量判断酵母菌株为低产蛋白酶A菌株、中产蛋白酶A菌株或高产蛋白酶A菌株。通过该方法，能够准确、快速地筛选出蛋白酶A基因表达量低的酵母菌株。
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公开(公告)号：CN108866167B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201810933959.9
申请日：2018-08-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/6851 , C12Q1/6895 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明提出一种用于评价啤酒酵母活力的多重引物、试剂盒及评价方法，属于食品检测领域，能够解决传统测定酵母活力的方法存在的评价结果不准确、评价范围小、操作要求高及操作复杂等问题。该技术方案包括多重引物的设计、以酵母菌株总RNA为模板依次进行反转录合成cDNA模板、多重PCR扩增反应、毛细管电泳分离，并利用GeXP系统对毛细管电泳分离结果进行分析；以内参基因为对照，结合关键基因对应峰的峰面积计算蛋白酶A基因的表达量，采用与荧光底物结合法测定蛋白酶A的活力，根据蛋白酶A基因表达量与蛋白酶A活力的比值判断酵母活力为较好、适中或较差。通过该方法，能够准确、快速地评价啤酒酵母活力，且结果可重复。
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公开(公告)号：CN108872501B
公开(公告)日：2021-01-22
申请号：CN201810825643.8
申请日：2018-07-25
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: G01N33/14
Abstract: 本发明提出一种基于人体饱腹感的啤酒及啤酒麦芽的可饮性评价方法，属于啤酒技术领域，建立了基于实验室的麦芽性能评价方法，有利于不同麦芽之间的性能评价，与大生产相比，操作简单，重复性好。该技术方案包括将小鼠称重后灌服啤酒，测试并计算小鼠胃排空率以及小鼠平均胃排空率，根据小鼠平均胃排空率评价人体饱腹感，根据人体饱腹感评价啤酒可饮性。本发明能够应用于麦芽的饱腹感及可饮性评价，进而可应用于啤酒饮用过程中的人体饱腹感评价，可直接确定啤酒可饮性强弱，为提高啤酒可饮性提供科学依据。
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Patent Agency Ranking
公开(公告)号：CN109234273B
公开(公告)日：2020-09-11
申请号：CN201811203952.8
申请日：2018-10-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
Abstract: 本发明提出一种用于极限糊精酶基因克隆的引物、试剂盒及克隆方法，属于基因克隆技术领域，能够解决目前麦芽RNA提取较为困难，步骤繁琐复杂，而导致RNA纯度与质量不高，无法得到全长极限糊精酶基因的问题。该技术方案包括根据极限糊精酶基因序列设计五段基因序列，针对其中四段基因序列LD‑2、LD‑3、LD‑4、LD‑5设计上下游特异性引物，利用上下游引物克隆极限糊精酶基因，包括：极限糊精酶基因片段合成、重叠延伸PCR、全长基因的获得。本发明原理简单，操作简便，有效解决了大麦长片段目的基因难以扩增的难题；且该方法对麦芽RNA的纯度和产量要求较低；极限糊精酶的基因克隆及其N端序列优化为异源表达以及酶学性质研究奠定基础。
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公开(公告)号：CN108531565B
公开(公告)日：2020-08-04
申请号：CN201810331672.9
申请日：2018-04-13
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/686 , C12Q1/6876
Abstract: 本发明提供了一种基于基因表达监控的麦芽溶解度评价方法，涉及食品检测领域。该方法包括总RNA的提取与纯化、逆转录反应制备cDNA模板、多重PCR反应、毛细管电泳得到基因电泳图谱、图谱数据分析得到麦芽溶解相关基因的表达峰高H、利用麦芽溶解相关基因的表达峰高H计算麦芽溶解度库值，针对麦芽溶解相关基因LD，AMY1，AMY4，GLU，ASP，CYS，SER Ⅰ，SER Ⅲ，MET，TRX，PDI，SEP，WRKY和内控基因ACT。该方法能够基于淀粉、蛋白水解酶的基因表达监控，建立预测麦芽库尔巴哈值的方法，从而用于评价麦芽溶解度；与传统的测定方法相比，准确度高，效率高且方法简便。
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公开(公告)号：CN109182452B
公开(公告)日：2021-11-09
申请号：CN201811203927.X
申请日：2018-10-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
Abstract: 本发明提出一种基于麦芽淀粉水解能力调节麦芽配方的方法，属于啤酒技术领域。该技术方案包括根据啤酒品类和酵母对可发酵性糖比例的要求，确定配方麦芽应满足的淀粉水解能力系数及极限糊精酶活力条件，结合各麦芽淀粉水解能力系数及极限糊精酶活力条件调整配方中的各麦芽配比，得到具有稳定发酵度的麦芽配方。本发明通过建立准确预测麦芽淀粉水解能力的方法，结合调整麦芽配比，得到满足配方麦芽淀粉水解能力的配方，保证了麦汁组分的稳定性及啤酒风味的一致性。
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公开(公告)号：CN108913755B
公开(公告)日：2021-08-10
申请号：CN201810933989.X
申请日：2018-08-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/6851 , C12N15/11
Abstract: 本发明提出一种用于检测影响啤酒酵母蛋白酶A基因表达量的发酵条件的多重引物、试剂盒及检测方法，属于食品检测领域，能够解决传统的通过测定蛋白酶A活力来检测影响啤酒酵母蛋白酶A基因表达量的发酵条件时存在的耗时长、检测过程繁琐、检测周期长的问题。该技术方案包括多重引物的设计、以不同发酵条件下提取得到的酵母菌株总RNA为模板依次进行反转录合成cDNA模板、多重PCR扩增反应、毛细管电泳分离，并利用GeXP系统对毛细管电泳分离结果进行分析；以内参基因为对照，结合关键基因对应峰的峰面积计算蛋白酶A基因的表达量，并根据蛋白酶A基因的表达量判断影响啤酒酵母蛋白酶A基因表达量的发酵条件。
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公开(公告)号：CN108913807B
公开(公告)日：2021-04-20
申请号：CN201810959649.4
申请日：2018-08-16
Applicant: 青岛啤酒股份有限公司
IPC: C12Q1/6895 , C12Q1/686 , C12Q1/04 , C12N15/11
Abstract: 本发明提出一种用于筛选低蛋白酶A基因表达的酵母菌株的多重引物、试剂盒及筛选方法，属于食品检测领域，能够解决传统的通过测定蛋白酶A活力筛选低蛋白酶A基因表达的酵母菌株耗时长、检测过程繁琐、检测周期长的问题。该技术方案包括多重引物的设计、以酵母菌株总RNA为模板依次进行反转录合成cDNA模板、多重PCR扩增反应、毛细管电泳分离，并利用GeXP系统对毛细管电泳分离结果进行分析；以内参基因为对照，结合关键基因对应峰的峰面积计算蛋白酶A基因的表达量，并根据蛋白酶A基因的表达量判断酵母菌株为低产蛋白酶A菌株、中产蛋白酶A菌株或高产蛋白酶A菌株。通过该方法，能够准确、快速地筛选出蛋白酶A基因表达量低的酵母菌株。
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