에코틴-융합단백질을 기질로 사용한 특정 기질단백질의특이적 분해효소의 활성 측정방법
    1.
    发明公开
    에코틴-융합단백질을 기질로 사용한 특정 기질단백질의특이적 분해효소의 활성 측정방법 失效
    使用生态毒素融合蛋白作为底物来测量特定底物蛋白的特定蛋白酶活性的方法

    公开(公告)号:KR1020070034362A

    公开(公告)日:2007-03-28

    申请号:KR1020050088971

    申请日:2005-09-23

    CPC classification number: C12Q1/37 C07K14/47 C07K14/81 C07K2319/00 C12N15/63

    Abstract: 본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다.
    본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다.
    본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다.
    유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신

    Abstract translation: 本发明涉及测定特定底物蛋白质的特定降解酶活性的方法。

    닭 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자
    2.
    发明公开
    닭 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자 失效
    可用于开发与P53蛋白质及其基因相关的抗生素药物的鸡肉中的特异性蛋白质

    公开(公告)号:KR1020040087353A

    公开(公告)日:2004-10-14

    申请号:KR1020030021533

    申请日:2003-04-07

    CPC classification number: C12N9/6405 C12N15/74

    Abstract: PURPOSE: Ubiquitin-specific proteases from chick muscle and gene thereof are provided. The enzymes remove ubiquitin bound to p53 protein to stabilize p53 protein in a cell, so that they can be useful for development of anticancer drugs related to p53 protein. CONSTITUTION: The ubiquitin-specific proteases from chick muscle are UBP75a, UBP75b and UBP135, wherein the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by alpha-peptide bond; the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by epsilon-peptide bond; the ubiquitin-specific protease comprises the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 or SEQ ID NO:6; and UBP75a, UBP75b and UBP135 have molecular weight of 75 kDa, 75 kDa and 135 kDa, respectively. The ubiquitin-specific protease genes are ubp75a, ubp75b and ubp135, wherein the ubiquitin-specific protease genes are isolated from cDNA of chicken; genes ubp75a, ubp75b and ubp135 have the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:3, respectively. The expression vectors pBS-UBP75a, pBS-UBP75b and pBS-UBP135 contains the genes ubp75a, ubp75b and ubp135, respectively.

    Abstract translation: 目的:提供来自鸡肌肉的泛素特异性蛋白酶及其基因。 酶除去与p53蛋白结合的泛素以稳定细胞中的p53蛋白,从而可用于开发与p53蛋白相关的抗癌药物。 构成:来自鸡肌肉的泛素特异性蛋白酶是UBP75a,UBP75b和UBP135,其中泛素特异性蛋白酶通过α-肽键消化与泛素结合的蛋白质或肽; 通过ε-肽键,泛素特异性蛋白酶消化与泛素结合的蛋白质或肽; 泛素特异性蛋白酶包含SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸序列的全部或部分; UBP75a,UBP75b和UBP135的分子量分别为75kDa,75kDa和135kDa。 泛素特异性蛋白酶基因是ubp75a,ubp75b和ubp135,其中泛素特异性蛋白酶基因从鸡的cDNA中分离出来; 基因ubp75a,ubp75b和ubp135分别具有SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的核苷酸序列的全部或部分。 表达载体pBS-UBP75a,pBS-UBP75b和pBS-UBP135分别含有基因ubp75a,ubp75b和ubp135。

    유비퀴틴-유사 단백질 특이적인 단백질 분해효소 UfSP2및 그의 제조방법
    3.
    发明授权
    유비퀴틴-유사 단백질 특이적인 단백질 분해효소 UfSP2및 그의 제조방법 失效
    UBIQUITIN-like蛋白质特异性蛋白酶UFSP2及其制备方法

    公开(公告)号:KR100807182B1

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:KR1020060129759

    申请日:2006-12-19

    Abstract: A novel protease is provided to show the specific protease activity on Ufm1, which acts on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 2(UfSP2) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. A method for preparing the UfSP2 comprises the steps of: (a) culturing a transformant which is prepared by transforming E. coli BL21 using an expression plasmid of pMAL-c2X-UfSP2; and (b) obtaining the UfSP2 from the cultured fungus bodies.

    Abstract translation: 提供了一种新型蛋白酶,以显示Ufm1的特异性蛋白酶活性,其作用于细胞中的重要机制,从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶2(UfSP2)包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。 1.一种制备UfSP2的方法,包括以下步骤:(a)培养通过使用pMAL-c2X-UfSP2的表达质粒转化大肠杆菌BL21而制备的转化体; 和(b)从培养的真菌体获得UfSP2。

    닭 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자
    4.
    发明授权
    닭 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자 失效
    鸡肉中新的泛素蛋白酶及其基因

    公开(公告)号:KR100532234B1

    公开(公告)日:2006-01-10

    申请号:KR1020030021533

    申请日:2003-04-07

    Abstract: 본 발명은 새로운 유비퀴틴-프로테아제 (ubiquitin-specific protease, UBP) 및 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 닭의 근세포에 존재하는 분자량 75 킬로달톤 (UBP75a, UBP75b) 및 135 킬로달톤 (UBP135)의 새로운 유비퀴틴 분해효소들과 그들의 유전자, 그리고 각 유전자를 함유하는 발현 플라스미드와 이를 이용하여 단백질 분해효소를 발현시키는 방법에 관한 것이다.
    유비퀴틴, 유비퀴틴-프로테아제, UBP75a, UBP75b, UBP135

    Abstract translation: 本发明涉及新颖的泛素特异性蛋白酶(UBP)及其基因。 即,存在于鸡75千道尔顿至(UBP75a,UBP75b)和135千道尔顿(UBP135)新泛素分解酶及其基因,并通过使用这一点,含有基因的蛋白酶表达质粒的肌细胞中的分子量 Lt。

    생쥐 뇌에 있는 새로운 수모-프로테아제와 그 유전자
    5.
    发明公开
    생쥐 뇌에 있는 새로운 수모-프로테아제와 그 유전자 失效
    SUMO特异性蛋白酶,MULPB来自小鼠脑及其基因以开发包括急性淋巴细胞白血病的药物

    公开(公告)号:KR1020040087356A

    公开(公告)日:2004-10-14

    申请号:KR1020030021537

    申请日:2003-04-07

    CPC classification number: C12N9/6472 C12N15/74 C12Y304/22068

    Abstract: PURPOSE: SUMO-specific protease, mUlpB from mouse brain and gene thereof are provided, which are useful for development of anticancer drugs including acute leukemia. CONSTITUTION: The SUMO-specific protease, mUlpB is isolated from mouse brain, wherein the SUMO-specific protease digests protein or peptide bound to SUMO; the SUMO-specific protease has the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:2; and the SUMO-specific protease has molecular weight of 55 kDa. The SUMO-specific protease gene has the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. The expression plasmids pET32a-mUIpB and pCMV-Tag-mUIpB contain the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. A transformant is produced by transforming microorganism BL21 with the expression plasmid pET32a-mUIpB.

    Abstract translation: 目的:提供SUMO特异性蛋白酶,来自小鼠脑的mUlpB及其基因,其可用于开发抗癌药物,包括急性白血病。 构成:SUMO特异性蛋白酶mUlpB从小鼠脑中分离,其中SUMO特异性蛋白酶消化与SUMO结合的蛋白质或肽; SUMO特异性蛋白酶具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的全部或部分; 并且SUMO特异性蛋白酶的分子量为55kDa。 SUMO特异性蛋白酶基因具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列的全部或部分。 表达质粒pET32a-mUIpB和pCMV-Tag-mUIpB含有SEQ ID NO:1的核苷酸序列的全部或部分。 通过用表达质粒pET32a-mUIpB转化微生物BL21产生转化体。

    생쥐 뇌에 있는 새로운 수모-프로테아제와 그 유전자
    6.
    发明授权
    생쥐 뇌에 있는 새로운 수모-프로테아제와 그 유전자 失效
    小鼠脑中新的体液蛋白酶及其基因

    公开(公告)号:KR100532242B1

    公开(公告)日:2006-01-10

    申请号:KR1020030021537

    申请日:2003-04-07

    Abstract: 본 발명은 유비퀴틴-유사 단백질의 하나인 SUMO의 C-말단을 특이적으로 절단하는 단백질 분해효소인 SUMO-프로테아제, mUlpB와 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 쥐의 뇌 조직 mRNA에서 SUMO-특이 단백질 분해효소를 찾아내는 5'-RACE 방법과 이 방법으로 찾은 SUMO-프로테아제의 유전자, mUlpB 단백질 그리고 이 단백질을 발현하는 벡터에 관한 것이다.
    유비퀴틴-유사 단백질, 단백질 분해효소, SUMO-프로테아제, mUlpB, 5'-RACE

    Abstract translation: 本发明泛素相关的SUMO-蛋白酶蛋白酶切割与SUMO特异性相似的蛋白质的C-末端,并且所述基因mUlpB。 即,本发明涉及表达5'-RACE方法找到脑组织中SUMO-特异性蛋白酶的载体,大鼠基因的mRNA并以这种方式,mUlpB蛋白和蛋白质中找到的SUMO-蛋白酶。

    유비퀴틴-유사 단백질 특이적인 단백질 분해효소 UfSP1및 그의 제조방법
    7.
    发明授权
    유비퀴틴-유사 단백질 특이적인 단백질 분해효소 UfSP1및 그의 제조방법 失效
    UBIQUITIN-like蛋白特异性蛋白UFSP1及其制备方法

    公开(公告)号:KR100807184B1

    公开(公告)日:2008-02-27

    申请号:KR1020060129755

    申请日:2006-12-19

    Abstract: A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) is provided to be able to show the protein decomposing activity on Ufm1 acting on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. An expression plasmid includes a gene having a sequence of SEQ ID : NO. 2 AND encoding the UfSP1 and is pMAL-c2X-UfSP1. A method for preparing the UfSP1 comprises the steps of: (a) culturing a transformant prepared by transforming E. coli BL21 using the expression plasmid; and (b) obtaining the UfSP1 from the cultured fungus bodies.

    Abstract translation: 提供Ufm1特异性蛋白酶1(UfSP1)能够显示Ufm1上的蛋白质分解活性,作用于细胞中的重要机制,从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶1(UfSP1)包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。 表达质粒包含具有SEQ ID NO:1的序列的基因。 2编码UfSP1并且是pMAL-c2X-UfSP1。 制备UfSP1的方法包括以下步骤:(a)培养使用表达质粒转化大肠杆菌BL21制备的转化体; 和(b)从培养的真菌体获得UfSP1。

    에코틴-융합단백질을 기질로 사용한 특정 기질단백질의특이적 분해효소의 활성 측정방법
    8.
    发明授权
    에코틴-융합단백질을 기질로 사용한 특정 기질단백질의특이적 분해효소의 활성 측정방법 失效
    利用生物素融合蛋白测定基质特异性蛋白酶活性的方法

    公开(公告)号:KR100736743B1

    公开(公告)日:2007-07-09

    申请号:KR1020050088971

    申请日:2005-09-23

    Abstract: 본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다.
    본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다.
    본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다.
    유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신

    쥐 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자
    9.
    发明公开
    쥐 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자 失效
    来自大鼠肌肉的UBIQUITIN特异性蛋白质及其与其相关的基因,其中所述酶具有用于开发与P53蛋白相关的抗药性药物

    公开(公告)号:KR1020040087363A

    公开(公告)日:2004-10-14

    申请号:KR1020030021548

    申请日:2003-04-07

    CPC classification number: C12N9/6421 C12N15/74

    Abstract: PURPOSE: Ubiquitin-specific proteases from rat muscle and genes thereof are provided, which enzymes remove ubiquitin bound to p53 protein to stabilize p53 protein in a cell, and regulates differentiation process of muscle cells, so that they can be useful for development of anticancer drugs related to p53 protein. CONSTITUTION: The ubiquitin-specific proteases from rat muscle are UBP45 and UBP69, wherein the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by alpha-peptide bond; the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by epsilon-peptide bond; the ubiquitin-specific protease comprises the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:2; and the UBP45 and UBP69 have molecular weight of 45 kDa and 69 kDa, respectively. The ubiquitin-specific protease genes are ubp45 and ubp69, wherein the ubiquitin-specific protease genes are isolated from cDNA of rat cDNA; the ubiquitin-specific protease genes have the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:2. The expression vector pBS-Ubp45 contains the genes ubp45. A transformant is produced by transforming a host cell of bacteria JM109 strain with the expression vector pBS-Ubp45.

    Abstract translation: 目的:提供来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶及其基因,这些酶可以去除与p53蛋白结合的泛素,以稳定细胞中的p53蛋白,调节肌细胞的分化过程,从而可用于开发抗癌药物 与p53蛋白相关。 构成:来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶是UBP45和UBP69,其中泛素特异性蛋白酶通过α-肽键消化与泛素结合的蛋白质或肽; 通过ε-肽键,泛素特异性蛋白酶消化与泛素结合的蛋白质或肽; 泛素特异性蛋白酶包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的全部或部分; UBP45和UBP69的分子量分别为45kDa和69kDa。 泛素特异性蛋白酶基因是ubp45和ubp69,其中泛素特异性蛋白酶基因从大鼠cDNA的cDNA中分离; 泛素特异性蛋白酶基因具有SEQ ID NO:2的核苷酸序列的全部或部分。 表达载体pBS-Ubp45含有基因ubp45。 通过用表达载体pBS-Ubp45转化细菌JM109菌株的宿主细胞产生转化体。

    쥐 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자
    10.
    发明授权
    쥐 근육에 있는 새로운 유비퀴틴-프로테아제 및 그 유전자 失效
    大鼠肌肉中新的泛素蛋白酶及其基因

    公开(公告)号:KR100532199B1

    公开(公告)日:2006-01-10

    申请号:KR1020030021548

    申请日:2003-04-07

    Abstract: 본 발명은 새로운 유비퀴틴-프로테아제 (ubiquitin-specific protease, UBP) 및 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 쥐의 새로운 유비퀴틴-프로테아제로 분자량 45 킬로달톤 및 69 킬로달톤의 유비퀴틴 단백질 분해효소, UBP45 및 UBP69와 그들의 유전자, 그리고 그 유전자를 함유하는 발현 플라스미드에 관한 것이다. 그리고, 이 플라스미드를 이용한 단백질 분해효소의 발현, 정제 방법과 UBP45 및 UBP69 단백질의 효소활성 및 그 특성에 관한 것이다.
    유비퀴틴, 유비퀴틴-프로테아제, UBP45, UBP69

    Abstract translation: 本发明涉及新颖的泛素特异性蛋白酶(UBP)及其基因。 也就是说,在大鼠新泛素 - 到分子量为45千道尔顿和69千道尔顿的泛素蛋白酶,UBP45和UBP69和关于他们的基因,以及含有该基因的表达质粒的蛋白酶。 本发明还涉及使用该质粒的蛋白水解酶的表达和纯化,以及UBP45和UBP69蛋白的酶活性和特征。

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