Abstract:
본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다. 본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다. 본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다. 유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신
Abstract:
PURPOSE: Ubiquitin-specific proteases from chick muscle and gene thereof are provided. The enzymes remove ubiquitin bound to p53 protein to stabilize p53 protein in a cell, so that they can be useful for development of anticancer drugs related to p53 protein. CONSTITUTION: The ubiquitin-specific proteases from chick muscle are UBP75a, UBP75b and UBP135, wherein the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by alpha-peptide bond; the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by epsilon-peptide bond; the ubiquitin-specific protease comprises the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:4, SEQ ID NO:5 or SEQ ID NO:6; and UBP75a, UBP75b and UBP135 have molecular weight of 75 kDa, 75 kDa and 135 kDa, respectively. The ubiquitin-specific protease genes are ubp75a, ubp75b and ubp135, wherein the ubiquitin-specific protease genes are isolated from cDNA of chicken; genes ubp75a, ubp75b and ubp135 have the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1, SEQ ID NO:2 and SEQ ID NO:3, respectively. The expression vectors pBS-UBP75a, pBS-UBP75b and pBS-UBP135 contains the genes ubp75a, ubp75b and ubp135, respectively.
Abstract translation:目的:提供来自鸡肌肉的泛素特异性蛋白酶及其基因。 酶除去与p53蛋白结合的泛素以稳定细胞中的p53蛋白,从而可用于开发与p53蛋白相关的抗癌药物。 构成:来自鸡肌肉的泛素特异性蛋白酶是UBP75a,UBP75b和UBP135,其中泛素特异性蛋白酶通过α-肽键消化与泛素结合的蛋白质或肽; 通过ε-肽键,泛素特异性蛋白酶消化与泛素结合的蛋白质或肽; 泛素特异性蛋白酶包含SEQ ID NO:4,SEQ ID NO:5或SEQ ID NO:6的氨基酸序列的全部或部分; UBP75a,UBP75b和UBP135的分子量分别为75kDa,75kDa和135kDa。 泛素特异性蛋白酶基因是ubp75a,ubp75b和ubp135,其中泛素特异性蛋白酶基因从鸡的cDNA中分离出来; 基因ubp75a,ubp75b和ubp135分别具有SEQ ID NO:1,SEQ ID NO:2和SEQ ID NO:3的核苷酸序列的全部或部分。 表达载体pBS-UBP75a,pBS-UBP75b和pBS-UBP135分别含有基因ubp75a,ubp75b和ubp135。
Abstract:
A novel protease is provided to show the specific protease activity on Ufm1, which acts on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 2(UfSP2) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. A method for preparing the UfSP2 comprises the steps of: (a) culturing a transformant which is prepared by transforming E. coli BL21 using an expression plasmid of pMAL-c2X-UfSP2; and (b) obtaining the UfSP2 from the cultured fungus bodies.
Abstract translation:提供了一种新型蛋白酶,以显示Ufm1的特异性蛋白酶活性,其作用于细胞中的重要机制,从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶2(UfSP2)包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。 1.一种制备UfSP2的方法,包括以下步骤:(a)培养通过使用pMAL-c2X-UfSP2的表达质粒转化大肠杆菌BL21而制备的转化体; 和(b)从培养的真菌体获得UfSP2。
Abstract:
본 발명은 새로운 유비퀴틴-프로테아제 (ubiquitin-specific protease, UBP) 및 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 닭의 근세포에 존재하는 분자량 75 킬로달톤 (UBP75a, UBP75b) 및 135 킬로달톤 (UBP135)의 새로운 유비퀴틴 분해효소들과 그들의 유전자, 그리고 각 유전자를 함유하는 발현 플라스미드와 이를 이용하여 단백질 분해효소를 발현시키는 방법에 관한 것이다. 유비퀴틴, 유비퀴틴-프로테아제, UBP75a, UBP75b, UBP135
Abstract:
PURPOSE: SUMO-specific protease, mUlpB from mouse brain and gene thereof are provided, which are useful for development of anticancer drugs including acute leukemia. CONSTITUTION: The SUMO-specific protease, mUlpB is isolated from mouse brain, wherein the SUMO-specific protease digests protein or peptide bound to SUMO; the SUMO-specific protease has the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:2; and the SUMO-specific protease has molecular weight of 55 kDa. The SUMO-specific protease gene has the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. The expression plasmids pET32a-mUIpB and pCMV-Tag-mUIpB contain the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. A transformant is produced by transforming microorganism BL21 with the expression plasmid pET32a-mUIpB.
Abstract translation:目的:提供SUMO特异性蛋白酶,来自小鼠脑的mUlpB及其基因,其可用于开发抗癌药物,包括急性白血病。 构成:SUMO特异性蛋白酶mUlpB从小鼠脑中分离,其中SUMO特异性蛋白酶消化与SUMO结合的蛋白质或肽; SUMO特异性蛋白酶具有SEQ ID NO:2的氨基酸序列的全部或部分; 并且SUMO特异性蛋白酶的分子量为55kDa。 SUMO特异性蛋白酶基因具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列的全部或部分。 表达质粒pET32a-mUIpB和pCMV-Tag-mUIpB含有SEQ ID NO:1的核苷酸序列的全部或部分。 通过用表达质粒pET32a-mUIpB转化微生物BL21产生转化体。
Abstract:
본 발명은 유비퀴틴-유사 단백질의 하나인 SUMO의 C-말단을 특이적으로 절단하는 단백질 분해효소인 SUMO-프로테아제, mUlpB와 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 쥐의 뇌 조직 mRNA에서 SUMO-특이 단백질 분해효소를 찾아내는 5'-RACE 방법과 이 방법으로 찾은 SUMO-프로테아제의 유전자, mUlpB 단백질 그리고 이 단백질을 발현하는 벡터에 관한 것이다. 유비퀴틴-유사 단백질, 단백질 분해효소, SUMO-프로테아제, mUlpB, 5'-RACE
Abstract:
A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) is provided to be able to show the protein decomposing activity on Ufm1 acting on an important mechanism in a cell, thereby being widely utilized for investigating the important mechanism in the cell where the Ufm1 involves. A Ufm1-specific protease 1(UfSP1) includes an amino acid sequence of SEQ ID : NO. 1. An expression plasmid includes a gene having a sequence of SEQ ID : NO. 2 AND encoding the UfSP1 and is pMAL-c2X-UfSP1. A method for preparing the UfSP1 comprises the steps of: (a) culturing a transformant prepared by transforming E. coli BL21 using the expression plasmid; and (b) obtaining the UfSP1 from the cultured fungus bodies.
Abstract translation:提供Ufm1特异性蛋白酶1(UfSP1)能够显示Ufm1上的蛋白质分解活性,作用于细胞中的重要机制,从而广泛用于研究Ufm1所涉及的细胞中的重要机制。 Ufm1特异性蛋白酶1(UfSP1)包含SEQ ID NO:1的氨基酸序列。 表达质粒包含具有SEQ ID NO:1的序列的基因。 2编码UfSP1并且是pMAL-c2X-UfSP1。 制备UfSP1的方法包括以下步骤:(a)培养使用表达质粒转化大肠杆菌BL21制备的转化体; 和(b)从培养的真菌体获得UfSP1。
Abstract:
본 발명은 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법에 관한 것이다. 본 발명은 (1) 특정 기질단백질의 특이적 분해효소에 의해 절단되는 부위를 포함하는 폴리펩티드의 카르복시 말단에는 에코틴을 융합시키고 아미노 말단에는 GST,GFP,MBP로 이루어진 군에서 선택된 어느 하나의 단백질을 융합시켜서 융합 단백질을 얻는 단계; (2) 상기 융합 단백질을 기질로 상기 특정 기질단백질 분해효소와 기질-효소 반응을 수행하는 단계; 및 (3) 상기 기질-효소 반응의 반응물을 가열한 후 원심분리하여 상층액을 분리하고, 상기 상층액의 트립신 활성 억제도를 측정하는 단계를 포함하는 것을 특징으로 하는 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 제공한다. 본 발명의 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성 측정 방법을 사용할 경우 트립신 활성의 억제 정도를 통해 형광 측정기상에서 빠르게 그리고 간단하고 효율적으로 특정 기질단백질의 특이적 분해효소의 활성을 측정할 수 있다. 유비퀴틴, 유비퀴틴 유사 단백질, 단백질 분해효소, 에코틴, 트립신
Abstract:
PURPOSE: Ubiquitin-specific proteases from rat muscle and genes thereof are provided, which enzymes remove ubiquitin bound to p53 protein to stabilize p53 protein in a cell, and regulates differentiation process of muscle cells, so that they can be useful for development of anticancer drugs related to p53 protein. CONSTITUTION: The ubiquitin-specific proteases from rat muscle are UBP45 and UBP69, wherein the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by alpha-peptide bond; the ubiquitin-specific protease digests protein or peptide bound to ubiquitin by epsilon-peptide bond; the ubiquitin-specific protease comprises the total or portion of the amino acid sequence of SEQ ID NO:2; and the UBP45 and UBP69 have molecular weight of 45 kDa and 69 kDa, respectively. The ubiquitin-specific protease genes are ubp45 and ubp69, wherein the ubiquitin-specific protease genes are isolated from cDNA of rat cDNA; the ubiquitin-specific protease genes have the total or portion of the nucleotide sequence of SEQ ID NO:2. The expression vector pBS-Ubp45 contains the genes ubp45. A transformant is produced by transforming a host cell of bacteria JM109 strain with the expression vector pBS-Ubp45.
Abstract translation:目的:提供来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶及其基因,这些酶可以去除与p53蛋白结合的泛素,以稳定细胞中的p53蛋白,调节肌细胞的分化过程,从而可用于开发抗癌药物 与p53蛋白相关。 构成:来自大鼠肌肉的泛素特异性蛋白酶是UBP45和UBP69,其中泛素特异性蛋白酶通过α-肽键消化与泛素结合的蛋白质或肽; 通过ε-肽键,泛素特异性蛋白酶消化与泛素结合的蛋白质或肽; 泛素特异性蛋白酶包含SEQ ID NO:2的氨基酸序列的全部或部分; UBP45和UBP69的分子量分别为45kDa和69kDa。 泛素特异性蛋白酶基因是ubp45和ubp69,其中泛素特异性蛋白酶基因从大鼠cDNA的cDNA中分离; 泛素特异性蛋白酶基因具有SEQ ID NO:2的核苷酸序列的全部或部分。 表达载体pBS-Ubp45含有基因ubp45。 通过用表达载体pBS-Ubp45转化细菌JM109菌株的宿主细胞产生转化体。
Abstract:
본 발명은 새로운 유비퀴틴-프로테아제 (ubiquitin-specific protease, UBP) 및 그 유전자에 관한 것이다. 즉, 쥐의 새로운 유비퀴틴-프로테아제로 분자량 45 킬로달톤 및 69 킬로달톤의 유비퀴틴 단백질 분해효소, UBP45 및 UBP69와 그들의 유전자, 그리고 그 유전자를 함유하는 발현 플라스미드에 관한 것이다. 그리고, 이 플라스미드를 이용한 단백질 분해효소의 발현, 정제 방법과 UBP45 및 UBP69 단백질의 효소활성 및 그 특성에 관한 것이다. 유비퀴틴, 유비퀴틴-프로테아제, UBP45, UBP69