Abstract:
A production method of a transgenic cloned embryo having a goat somatic cell nucleus transfected with hGM-CSF(human granulocyte macrophage-colony stimulating factor) gene is provided to produce a cloned goat expressing the hGM-CSF from the mammary gland, thereby improving the production yield of hGM-CSF. A production method of a transgenic cloned goat embryo comprises the steps of: (1) transforming a somatic cell of goat with a recombinant expression vector containing an hGM-CSF gene to prepare a nucleus donor cell; (2) collecting an ovum from the goat to prepare a nucleus recipient ovum; and (3) denucleating the recipient ovum, transplanting the nucleus donor cell into the recipient ovum and fusing them to prepare the transgenic cloned embryo.
Abstract:
A transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene is provided to minimize complement activation by inhibiting cytotoxicity destruction in xenotransplantation, so that the cell line is useful for inhibition of hyperacute rejection occurred by xenotransplantation. A transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene(KCLRF-BP-00139) contains an expression cassette pcDNA-CD59(neo) encoding CD59 gene having the nucleotide sequence of SEQ ID NO:1. A method for manufacturing the transgenic pig clonal somatic cell line expressing protectin CD59 gene(KCLRF-BP-00139) comprises the steps of: (1) separating a somatic cell from the fetal pig by using primers of SEQ ID NOs:2 and 3; (2) preparing an expression vector containing a CD59 gene and transducing the expression vector into the somatic cell; and (3) selecting and culturing the transduced somatic cells. Further, the CD59 gene is SEQ ID NO:1.
Abstract translation:提供表达保护素CD59基因的转基因猪克隆体细胞系以通过抑制异种移植中的细胞毒性破坏来最小化补体激活,使得细胞系可用于通过异种移植发生的超急性排斥的抑制。 表达保护素CD59基因(KCLRF-BP-00139)的转基因猪克隆体细胞系含有编码具有SEQ ID NO:1的核苷酸序列的CD59基因的表达盒pcDNA-CD59(neo)。 用于制备表达保护素CD59基因(KCLRF-BP-00139)的转基因猪克隆体细胞系的方法包括以下步骤:(1)使用SEQ ID NO:2和3引物从胎猪分离体细胞; (2)制备含有CD59基因并将表达载体转导入体细胞的表达载体; (3)选择和培养转导的体细胞。 此外,CD59基因是SEQ ID NO:1。
Abstract:
본 발명은 HLA-G 유전자를 발현하는 형질전환 복제 돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것으로서, 보다 상세하게는 1) 돼지 태아로부터 체세포를 분리하는 단계; 2) HLA-G 유전자를 포함하는 발현벡터를 제조한 후 단계 1의 체세포에 도입시키는 단계; 3) 상기 발현벡터가 도입된 체세포를 선별한 후 배양하는 단계; 4) 모돈으로부터 채취한 난자의 핵을 제거하고 상기 체세포와 융합시키는 단계; 및 5) 상기 융합된 복제란을 대리모돈에 이식하고 자돈을 출산하는 단계를 포함하는 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지 및 그의 제조 방법에 관한 것이다. 본 발명의 제조 방법에 의한 HLA-G 유전자를 발현하는 형질 전환 복제돼지는 기존 방법의 후-번역 수정(post-translational modification) 또는 대량 생산등의 문제점을 극복할 수 있으며, 자연살해 세포(natural killer cell, NK cell)의 활성을 저해시켜 대상세포의 용해를 막아 이식 거부 반응을 억제함으로, 핵이식을 통한 HLA-G 유전자를 발현하는 돼지 생산 등 세포이용 치료 분야 및 이종 장기 이식 분야의 연구에 유용하게 사용할 수 있다. HLA-G