公开(公告)号：KR1020070058732A

公开(公告)日：2007-06-11

申请号：KR1020050117353

申请日：2005-12-05

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  박희성 ,  남성훈 ,  김진현

IPC: C07K1/36

CPC classification number: C12N15/1027 ,  C12N9/78 ,  C12N9/88 ,  C12N15/1044

Abstract: A method for preparing a protein having new functions is provided to be widely utilized for developing protein for medicines and making industrial enzymes in the field of biotechnology. The method comprises the steps of: (a) designing function elements required for new functions which are desired to be provided to pre-existing protein scaffold; (b) simultaneously inserting at least two gene fragments corresponding to the designed function elements into a protein scaffold gene; and (c) selecting mutant having the new function from a library of mutants in which the new mutant genes are inserted and improving and adjusting the function of the selected mutant using a directed evolution technique such as an error prone-PCR and a DNA shuffling. The mutant protein evMBL8 of SEQ ID : NO. 29, in which function elements of a metallo beta-lactamase are introduced into a glyoxalase scaffold, is prepared by the method and deposited as a deposition number of KCTC 10877BP.

Abstract translation: 提供一种制备具有新功能的蛋白质的方法，被广泛用于开发生物技术领域的药物蛋白质和制造工业酶。 该方法包括以下步骤：（a）设计期望提供给预先存在的蛋白质支架的新功能所需的功能元件; （b）同时将至少两个对应于所设计的功能元件的基因片段插入到蛋白质支架基因中; 和（c）从其中插入新的突变基因的突变体的文库中选择具有新功能的突变体，并使用定向进化技术（例如易错PCR和DNA改组）改进和调整所选突变体的功能。 SEQ ID NO：1的突变蛋白evMBL8。 29，其中将金属β-内酰胺酶的功能元件引入乙二醛酶支架中，通过该方法制备并沉积为KCTC 10877BP的沉积数。

公开(公告)号：KR100575058B1

公开(公告)日：2006-05-04

申请号：KR1020040031878

申请日：2004-05-06

Applicant: 한국과학기술원

Inventor： 김학성 ,  천영훈 ,  박희성 ,  남성훈

IPC: C12N9/86 ,  C12N15/31

Abstract: 본 발명은 방향족 기질에 대한 효소활성이 향상된 히단토이나제(D-hydantoinase) 변이체에 관한 것으로서, 구체적으로 바실러스 스테아로써머필러스 SD1(
Bacillus stearothermophilus SD1) 유래의 야생형 히단토이나제의 활성부위를 구성하는 3개의 루프(loop)에 위치한 소수성의 아미노산을 다른 아미노산으로 치환하여 수득되는, 방향족 치환기를 갖는 기질에 대하여 효소활성이 증진된 새로운 히단토이나제 변이체에 관한 것이다.
본 발명에 따른 히단토이나제 변이체는 야생형 히단토이나제에 비하여 방향족 기질에 대한 기질 특이성이 최대 150배 이상 향상되어 산업적으로 매우 유용하다.
히단토이나제, D-아미노산, 하이드록시페닐히단토인, 변이, 기질 특이성