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    겔 또는 면역증강물질을 흡착시킨 겔첨가 희석액을 사용하는 생균백신의 제조방법
    22.
    发明授权
    겔 또는 면역증강물질을 흡착시킨 겔첨가 희석액을 사용하는 생균백신의 제조방법 有权
    使用稀释剂添加凝胶或凝胶吸附免疫增强剂的活疫苗的制备方法

    公开(公告)号：KR100753674B1

    公开(公告)日：2007-08-31

    申请号：KR1020060007211

    申请日：2006-01-24

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 김종만 ,  강현미 ,  장금찬 ,  정석찬

    IPC: A61K39/39 ,  A61K39/12

    Abstract: 동결건조 약독화 생백신의 면역효능을 향상시키기 위하여 생백신의 희석액에 겔 또는 면역증강물질을 흡착시킨 겔을 첨가하고 시험모델로 돈단독 생균백신, 돼지위축성비염생균백신 및 개파보약독화바이러스백신을 대상으로 면역능에 미치는 효과를 시험하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
    1. 돈단독 생균백신의 면역원성에 미치는 효과
    겔 또는 겔에 항체 등 각종 면역증강물질을 흡착하여 희석액에 첨가하고 이 희석액으로 돈단독생균백신을 부유시켜 마우스에 접종하고 접종 2주후의 항체가를 조사한 결과, 기존의 겔을 첨가하지 않은 희석액으로 부유하여 접종한 마우스의 항체가 1:128보다 2%의 겔을 첨가한 희석액으로 부유시킨 백신의 항체가가 1:256으로 높게 나타났다. 그러나 첨가한 겔농도가 높거나 겔에 면역증강제 등을 흡착시켜 희석액에 부유시켜 접종한 백신의 항체가는 겔을 첨가하지 않은 희석액을 사용한 백신의 항체가보다 낮았다.
    희석액별로 부유한 돈단독 생균백신의 공격접종에 따른 방어효과를 마우스를 공시하여 조사한 결과, 2%겔, 항체(1:20)흡착 겔, Glucan흡착 겔 및 돼지보체를 흡착시킨 겔을 첨가한 희석액으로 부유시킨 백신의 방어효과가 항체가와 상관없이 100% 방어효과를 나타내여서 기존의 희석액으로 부유시킨 백신의 방어효과 83.3%보다 우수하였으나 고농도의 겔(5-10%), 고역가 항체(1:320 이상) 및 개발 면역증강제로 흡착한 겔을 첨가한 희석액으로 부유시킨 백신접종군의 방어효과는 기존의 희 석액으로 부유시킨 백신의 방어효과와 유사하거나 낮았다.
    2. 돼지위축성비염 생균백신
    겔을 희석액에 2, 5%씩 첨가하고 이 희석액으로 돼지위축성비염 생균백신을 부유시켜 마우스에 접종하고 항체가를 조사한 결과, 기존의 백신희석액으로 부유하여 접종한 마우스의 항체가 1:128보다 2%의 겔을 첨가한 희석액으로 부유시킨 백신의 항체가가 1:512로 높았으나 이보다 높은 5%겔을 흡착시킨 희석액으로 부유시킨 백신의 항체가는 1:32로 기존의 백신희석액으로 부유시킨 백신의 항체가보다 낮았다. 10배로 희석한 각각의 백신을 마우스에 접종하고 공격접종한 후의 방어효과는 2%겔첨가희석액 백신과 겔 무첨가 희석액 백신의 방어가가 동일하게 62.5%로 나타났으나 5%겔 첨가희석액 백신은 50.0%로 이보다 낮았다.
    3. 개파보바이러스 약독화백신
    겔을 희석액에 2, 5%씩 첨가하고 이 희석액으로 개파보바이러스 생독백신을 부유시켜 국가검정동물용의약품 검정기준에 따라 기니픽에 2회 접종하고 항체가를 조사한 바, 1차접종 2주후의 혈청중에는 기존의 겔을 첨가하지 않은 희석액으로 부유하여 접종한 기니픽에서는 항체가 검출되지 않았으나 겔을 첨가한 군의 혈청에서는 1:8의 항체가 조기에 검출되었고, 2차접종 10일후의 항체가도 겔 무첨가 백신접종군의 항체가가 평균 1:24였으나 2%와 5% 겔을 첨가한 희석액으로 부유시켜 접종한 군의 항체가가 평균 1:106.7과 1:96(64, 128)으로 현저히 높았다.
    4. 돈단독 생균백신의 자돈에 대한 면역원성
    2%겔 또는 면역증강물질인 Glucan을 흡착시킨 겔을 희석액에 첨가하고 이 희 석액으로 돈단독생균백신을 부유시켜 돈단독 항체음성의 50일령 이유자돈에 피하접종하고 항체가를 조사한 바, 기존의 백신희석액으로 부유하여 접종한 자돈의 평균항체가 1:32보다 2%의 겔 또는 Glucan흡착 겔을 첨가한 희석액으로 부유시킨 백신접종 자돈의 평균항체가가 각 1: 128과 1:40으로 높았다.
    결론적으로 동결건조 약독화백신 희석액에 겔 또는 겔에 면역증강물질을 흡착시켜 첨가하여 사용할 경우 백신의 면역원성을 향상시킬 수 있음을 확인할 수 있었다.
    약독화백신, 희석액, 알루미늄 겔, 면역증강물질

    동물혈청을 첨가하지 않은 돈단독균 배지 및 그 배지에서 배양한 돈단독균으로 제조되는 생균 및 사균백신
    23.
    发明公开
    동물혈청을 첨가하지 않은 돈단독균 배지 및 그 배지에서 배양한 돈단독균으로 제조되는 생균 및 사균백신 有权
    ERIESIPELOTHRIX RHUSIOPATHIAE文化媒介没有动物血清和SWINE ERYSIPELAS活和灭活疫苗制备的培养基上培养的细菌

    公开(公告)号：KR1020070077587A

    公开(公告)日：2007-07-27

    申请号：KR1020060007212

    申请日：2006-01-24

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 김종만 ,  강현미 ,  장금찬 ,  정석찬

    IPC: C12N5/07 ,  C12N5/00

    Abstract: An Erysipelothrix rhusiopathiae culture medium is provided to significantly increase the number of the Erysipelothrix rhusiopathiae and maintain the pH of the culture medium without using animal serum, thereby contributing to improve the productivity and stability of an Erysipelothrix rhusiopathiae vaccine and reduce the cost. The Erysipelothrix rhusiopathiae culture medium is characterized in that it is prepared by adjusting a pH of a basic culture medium consisting of 3.5g of proteose peptone, 5g of yeast extract, 12g of NaHPO4, 2.1g of KH2PO4, 37g of BHI, and 1,000ml of D.W into 7.4-7.5, autoclaving it under 15lb for 20 minutes and then adding sterilized 0.05% arginine solution, 0.04% of glucose solution and 0.1% of Tween 80 thereto. The swine erysipelas live vaccine is prepared from Erysipelothrix rhusiopathiae cultured in the culture medium. The swine erysipelas-killed vaccine is prepared by inactivating the Erysipelothrix rhusiopathiae cultured in the culture medium.

    Abstract translation: 提供了一种白纹丝杆菌rhusiopathiae培养基，以显着增加Erysipelothrix rhusiopathiae的数量，并且不使用动物血清保持培养基的pH，从而有助于提高Erysipelothrix rhusiopathiae疫苗的生产力和稳定性并降低成本。 白纹丝毒杆菌培养基的特征在于，通过调节由3.5g蛋白胨，5g酵母提取物，12g NaHPO4，2.1g KH 2 PO 4，37g BHI和1,000ml 的DW至7.4-7.5，在15lb下高压灭菌20分钟，然后加入灭菌的0.05％精氨酸溶液，0.04％葡萄糖溶液和0.1％吐温80。 猪丹毒活疫苗由在培养基中培养的Erysipelothrix rhusiopathiae制备。 通过灭活培养基中培养的欧氏白僵菌来制备猪丹毒死亡疫苗。

    발육계란 고증식성, 무병원성 인플루엔자 바이러스 제작용 재조합 발현 벡터
    26.
    发明公开
    발육계란 고증식성, 무병원성 인플루엔자 바이러스 제작용 재조합 발현 벡터 有权
    用于制备高产和流行性流感病毒的重组表达载体及其用途

    公开(公告)号：KR1020140010582A

    公开(公告)日：2014-01-27

    申请号：KR1020120076916

    申请日：2012-07-13

    Applicant: 서울대학교산학협력단 ,  대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 권혁준 ,  김재홍 ,  김일환 ,  최준구 ,  이윤정 ,  강현미

    IPC: C12N7/00 ,  C12N15/33 ,  C12N7/01 ,  C12N15/63

    Abstract: The present invention relates to: a composition for high productiveness of an embryonated egg of H1N1 family avian influenza and non-pathogenicity of a mouse including, as a active ingredient, a polynucleotide encoding a PB2 protein of a low pathogenic avian influenza virus; a recombinant expression vector including the polynucleotide; an attenuated recombinant virus transformed into the expression vector; and a vaccine composition including the recombinant expression vector. The recombinant expression vector of the present invention enhances chicken embryo productivity of a vaccine strain for preventing influenza, and thereby, having advantages of being capable of being effectively used in enhancing efficacy and productivity of killed vaccines, and additionally, has no pathogenicity for mice and has immunogenicity, and thereby having advantages of being capable of being effectively used as live vaccines. [Reference numerals] (AA) Inserting into the inside of pHW2000-BsmBI

    Abstract translation: 本发明涉及一种用于H1N1家禽禽流感的胚胎卵和非致病性的高生产力的组合物，其包含作为活性成分的编码低致病性禽流感病毒的PB2蛋白的多核苷酸; 包含该多核苷酸的重组表达载体; 减毒的重组病毒转化成表达载体; 以及包含重组表达载体的疫苗组合物。 本发明的重组表达载体增强用于预防流感的疫苗株的鸡胚生产力，从而具有能够有效地用于提高杀死疫苗的功效和生产力的优点，此外，对小鼠没有致病性， 具有免疫原性，因此具有能够有效地用作活疫苗的优点。 （标号）（AA）插入pHW2000-BsmBI的内部

    세균 및 이스트의 세포벽 용균 조성물 및 이를 제조하는방법
    28.
    发明公开
    세균 및 이스트의 세포벽 용균 조성물 및 이를 제조하는방법 有权
    细菌和细胞壁的细胞分析组合物及其制备方法

    公开(公告)号：KR1020080032809A

    公开(公告)日：2008-04-16

    申请号：KR1020060098780

    申请日：2006-10-11

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 김종만 ,  김재명 ,  장금찬 ,  박중원 ,  강현미 ,  정석찬

    IPC: A61K35/74 ,  A61K36/06 ,  C12N1/20 ,  C12N1/16

    CPC classification number: Y02A50/473 ,  A61K35/74 ,  A61K36/06 ,  C12N1/16 ,  C12N1/20

    Abstract: A method for preparing a cell lysis composition of bacterial and yeast cell wall is provided to improve yield of cell wall, and selectively employ antigen substances and immune-enhancing substances in the cell wall by using biochemical and chemical treatment, so that the composition is useful as vaccine antigen, heterologous delivery system, immune enhancer, vaccine assistant and complex feed additive. A method for preparing a cell lysis composition of bacterial and yeast cell wall comprises the steps of: culturing gram positive bacteria, gram negative bacteria and yeast; treating the cultured gram positive bacteria, gram negative bacteria and yeast biochemically and chemically by using transparent outer membrane extraction, TNT(Tris-HCl, sodium chloride, Triton X-114) method, NaOH-EDTA(sodium hydroxide-(ethylene dinitrilo) tetraacetic acid), TMC(Tris-HCl, magnesium chloride, calcium chloride) method or TET(Tris-HCl, EDTA, Triton X-100) method; and extracting useful ingredients of cell wall from the treated gram positive bacteria, gram negative bacteria and yeast, wherein the gram negative bacteria include Escherichia coli 055 and Bordetella pertussis; the gram positive bacteria include Staphylococcus aureus Cowan 1 and Erysipelothrix rhusiopathiae T2; and the yeast is Saccharomyces cerevisiae or Candida albicans. Further, the useful ingredients of cell wall are selected from a group consisting of a transparent cell outer membrane, a cell wall and bacteriolysant.

    Abstract translation: 提供细菌和酵母细胞壁细胞裂解组合物的制备方法，以提高细胞壁的产量，并通过生物化学和化学处理选择性地在细胞壁中使用抗原物质和免疫增强物质，使组合物有用 作为疫苗抗原，异源递送系统，免疫增强剂，疫苗助剂和复合饲料添加剂。 制备细菌和酵母细胞壁的细胞裂解组合物的方法包括以下步骤：培养革兰氏阳性菌，革兰氏阴性细菌和酵母; 通过使用透明的外膜提取，TNT（Tris-HCl，氯化钠，Triton X-114）方法，NaOH-EDTA（氢氧化钠 - （亚乙基二硝基）四乙酸）处理培养的革兰氏阳性细菌，革兰氏阴性细菌和酵母生物化学和化学 酸），TMC（Tris-HCl，氯化镁，氯化钙）法或TET（Tris-HCl，EDTA，Triton X-100）法; 并从经处理的革兰氏阳性细菌，革兰氏阴性细菌和酵母提取细胞壁的有用成分，其中革兰氏阴性细菌包括大肠杆菌055和百日咳博德特氏菌; 革兰氏阳性细菌包括金黄色葡萄球菌Cowan 1和Erysipelothrix rhusiopathiae T2; 酵母是酿酒酵母或白色念珠菌。 此外，细胞壁的有用成分选自透明细胞外膜，细胞壁和细菌悬液。

    동물혈청을 첨가하지 않은 돈단독균 배지 및 그 배지에서 배양한 돈단독균으로 제조되는 생균 및 사균백신
    29.
    发明授权
    동물혈청을 첨가하지 않은 돈단독균 배지 및 그 배지에서 배양한 돈단독균으로 제조되는 생균 및 사균백신 有权
    不含动物血清和猪丹毒的白纹丝杆菌血管病毒培养基用在该培养基上培养的细菌制备的活的和灭活的疫苗

    公开(公告)号：KR100769356B1

    公开(公告)日：2007-11-01

    申请号：KR1020060007212

    申请日：2006-01-24

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 김종만 ,  강현미 ,  장금찬 ,  정석찬

    IPC: C12N5/07 ,  C12N5/00

    Abstract: 본 발명자는 돈단독균의 발육능을 향상시키기 위하여 개발한 배지에서의 돈단독균 발육성과 이 배지에서 배양한 돈단독균으로 만든 불활화백신의 마우스에서의 면역원성을 시험하여 다음과 같은 결과를 얻었다.
    돈단독 생균수는 기존의 브레인 하트 인퓨전(Brain Heart Infusion, BHI) 배지에 5-10% 소혈청을 첨가하여 배양하는 것보다 약 10배 이상의 균수 향상을 보였다.
    37℃에서 18-20시간 배양후 배양배지의 pH가 7.0으로 매우 안정적인 pH를 나타내었다.
    상기의 개발 배지에서 배양한 돈단독균으로 제조한 돈단독불활화 백신의 마우스에서의 항체형성능은 양호하였다.
    돈단독 배양배지, 동물혈청 무첨가

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