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    재조합돼지오제스키병바이러스
    31.
    发明授权
    재조합돼지오제스키병바이러스 有权
    重组猪猪Okiki病毒

    公开(公告)号：KR100318093B1

    公开(公告)日：2002-09-26

    申请号：KR1019980037509

    申请日：1998-09-11

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

    IPC: C12N15/63 ,  C12N15/86

    Abstract: 본 발명은 돼지의 주요 전염병을 예방하기 위한 벡터백신으로 사용될 수 있는 재조합 돼지오제스키병 바이러스에 관한 것으로, 돼지오제스키병 바이러스 양산주(KFCC-11048)의 TK(Thymidine kinase)유전자를 결실시키고, TK 프로모터하에서 돼지 인터류킨-2(Interleukin-2; IL-2) 유전자가 발현될 수 있도록 삽입하는 것에 의해 병원성이 감소되고 세포면역 향상능을 갖는 벡터백신을 제공할 수 있다. 더구나, TK 유전자 결실 및 IL-2 유전자의 삽입에 더하여, gI 유전자를 결실시키고, β-갈락토시다제 유전자를 마커(marker) 유전자로 하여 삽입, 발현시킴으로써, β-갈락토시다제 유전자 대신 바이러스 병원체에 대한 방어항원을 코딩하는 유전자를 외래 유전자로 삽입, 발현할 수 있는 다가 벡터백신을 제공할 수 있다. 따라서, 본 발명의 벡터백신은 종래 예방약보다 면역 효과가 우수한 돼지 오제스키병의 예방약 생산에 사용될 수 있으며, 다른 바이러스등의 병원체에 대한 항원을 코딩하는 유전자를 외래유전자로 삽입하는 경우 다른 병원체의 예방약 생산에도 사용될 수 있다.

    재조합 단백질을 항원으로 이용한 소 바이러스성 설사증의진단방법
    32.
    发明公开
    재조합 단백질을 항원으로 이용한 소 바이러스성 설사증의진단방법 有权
    使用重组蛋白作为抗原的牛血清病毒（BVD）诊断方法

    公开(公告)号：KR1020010056362A

    公开(公告)日：2001-07-04

    申请号：KR1019990057805

    申请日：1999-12-15

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

    IPC: A61K39/15

    Abstract: PURPOSE: Provided is a diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) using a recombinant protein consisting of gp53 protein of bovine viral diarrhea virus(BVDV) expressed in an insect cell, as an antigen. CONSTITUTION: The diagnosis method of bovine viral diarrhea(BVD) detects a neutralization antibody of BVDV by indirect Sandwich enzyme linked immunosorbent assay(IS-ELISA) using gp53 protein of BVD expressed in an insect cell. The recombinant protein is produced by an expression vector of gp53 protein of BVD in a transformed insect cells.

    Abstract translation: 目的：提供使用由在昆虫细胞中表达的牛病毒性腹泻病毒（BVDV）的gp53蛋白质构成的重组蛋白作为抗原的牛病毒性腹泻（BVD）的诊断方法。 构成：牛病毒性腹泻（BVD）的诊断方法使用在昆虫细胞中表达的BVD的gp53蛋白通过间接夹心酶联免疫吸附测定（IS-ELISA）检测BVDV的中和抗体。 重组蛋白由转化的昆虫细胞中BVD的gp53蛋白的表达载体产生。

    소전염성 비기관염 바이러스의 gD 단백질을 이용한 효소면역측정방법에 의한 중화항체 검사방법
    33.
    发明授权
    소전염성 비기관염 바이러스의 gD 단백질을 이용한 효소면역측정방법에 의한 중화항체 검사방법 有权
    感染性牛中毒病毒中毒试验

    公开(公告)号：KR100272697B1

    公开(公告)日：2000-11-15

    申请号：KR1019980004830

    申请日：1998-02-17

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

    IPC: C12N15/86 ,  C12N15/33

    Abstract: PURPOSE: Provided is a method for detecting the infectious bovine rhinotracheitis virus(IBRV)-specific neutralizing antibody by ELISA using gD protein of IBRV, thereby the IBRV-specific neutralizing antibody can be rapidly and exactly detected. CONSTITUTION: The recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV is produced by the steps of: inserting the K gene fragment of an IBRV PQ strain into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare a plasmid pPQ8H; inserting the fragment of pPQ8H into a plasmid pBluescript SK(+) to prepare pPQM1.3; inserting the universal stop sequence 5'- TAATTAATTAA- 3' and a simian virus 40 polyadenylation signal into a plasmid pVL1393 to prepare a vector pVL-SV40p(A); ligating pVL-SV40p(A) with pPQ1.3 to produce the recombinant baculovirus that produces gD protein of IBRV. The method for detecting the IBRV-specific neutralizing antibody comprises the steps of: coating the purified anti-gD monoclonal antibody using a coating buffer and blocking-reacting with a blocking solution; coating-reacting gD protein of IBRV, which is produced by the recombinant baculovirus, by diluting it in PBS; reacting the coating-reacted gD protein with bovine serum and washing it with water; subjecting it to the anti-bovine conjugate-reaction with a serum diluting solution; and coloring it and measuring its optical density.

    Abstract translation: 目的：提供使用IBRV的gD蛋白通过ELISA检测感染性牛鼻气管炎病毒（IBRV）特异性中和抗体的方法，从而可快速准确地检测IBRV特异性中和抗体。 构成：通过以下步骤产生产生IBRV的gD蛋白的重组杆状病毒：将IBRV PQ菌株的K基因片段插入质粒pBluescript SK（+）中以制备质粒pPQ8H; 将pPQ8H的片段插入质粒pBluescript SK（+）中以制备pPQM1.3; 将通用终止序列5'-TAATTAATTAA-3'和猿病毒40多聚腺苷酸化信号插入质粒pVL1393中以制备载体pVL-SV40p（A）; 将pVL-SV40p（A）与pPQ1.3连接以产生产生IBRV的gD蛋白的重组杆状病毒。 用于检测IBRV特异性中和抗体的方法包括以下步骤：使用涂布缓冲液涂覆纯化的抗gD单克隆抗体并与封闭溶液进行封闭反应; 由重组杆状病毒产生的IBRV的包被反应gD蛋白通过在PBS中稀释; 将涂覆反应的gD蛋白与牛血清反应并用水洗涤; 用血清稀释液进行抗牛共轭反应; 并着色并测量其光密度。

    사람 아데노바이러스 2형으로부터 제작한 재조합 발현벡터 및 그를 이용한 돼지 오제스키병 바이러스 GP50 유전자 재조합 사람아데노바이러스를 선발하는 방법
    34.
    发明授权
    사람 아데노바이러스 2형으로부터 제작한 재조합 발현벡터 및 그를 이용한 돼지 오제스키병 바이러스 GP50 유전자 재조합 사람아데노바이러스를 선발하는 방법 有权
    一种用于选择重组表达载体和猪方法与他ohjeseuki从人腺病毒2型的瓶子GP50病毒基因的重组腺病毒的生产

    公开(公告)号：KR100267750B1

    公开(公告)日：2000-11-01

    申请号：KR1019980025040

    申请日：1998-06-29

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 현방훈 ,  송재영 ,  안동준 ,  박종현 ,  차상호 ,  안수환

    IPC: C12N15/86 ,  C12N15/33

    Abstract: 본 발명은 국내 돼지 사육농가에 심각한 경제적 피해를 야기시키는 돼지의 주요 전염병 중 하나인 돼지 오제스키병의 백신 제조에 사용될 수 있는 발현 벡터 및 이를 이용하여 재조합 바이러스를 선발하는 방법에 관한 것으로, 본 발명의 발현벡터는 사람아데노바이러스 2형의 E3 유전자 부위를 제거하여 E3 프로모터 또는 메이져 래이트 프로모터(major late promoter; MLP)하에 삽입된 외래 유전자가 발현될 수 있도록 제작한 플라스미드이고, 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 발현벡터에 외래 유전자로서 돼지 오제스키병 바이러스 중요 방어 항원을 코딩하는 gp50 유전자를 삽입한 후, 이를 사람아데노바이러스 2형 게놈 유전자와 대장균내에서 동질성 재조합(homologous recombination)하고, 이를 리포펙틴을 사용하여 포유동물세포에 형질도입시켜 gp50 유전� � 재조합 바이러스를 선발한 것이다.
    본 발명에 의해 선발된 gp50 유전자 재조합 사람아데노바이러스 2형은 축산 현장에서 많은 경제적 손실을 주는 돼지 오제스키병의 예방에 이용될 수 있다.

    면역크로마토그라피법을 이용한 돼지오제스키병 항체검사장치 및 이를 이용한 돼지오제스키병 진단방법
    35.
    发明公开
    면역크로마토그라피법을 이용한 돼지오제스키병 항체검사장치 및 이를 이용한 돼지오제스키병 진단방법 有权
    使用免疫层析法检测猪Ozeki病抗体的装置和使用该装置诊断猪Ozeki病的方法

    公开(公告)号：KR1019990065231A

    公开(公告)日：1999-08-05

    申请号：KR1019980000443

    申请日：1998-01-10

    Applicant: 대한민국(농림축산식품부 농림축산검역본부장)

    Inventor： 송재영 ,  차상호 ,  박종현 ,  현방훈 ,  안동준 ,  안수환

    IPC: G01N33/53

    Abstract: 면역크로마토그라피법 이용 돼지오제스키병 항체검출은 항체에 감작된 골드 또는 라텍스 입자를 사용하며 오제스키바이러스 항원이 고정된 나이트로셀룰로우스막을 항체가 포함된 완충액에 침지하여 단시간내에 특정 항체를 검출하는 방법으로 돼지의 혈액으로부터 신속하게 오제스키바이러스에 대한 항체를 검사할 수 있다. 이는 야외에서도 항체검사가 가능하므로 돼지오제스키병을 검색하고 진단하는데 유용한 항체검사 킷트 제조방법을 제공한다. 특히 돼지오제스키병의 경우와 같이 항체검사를 신속하게 농장에서 실시할 수 있는 검사방법이 절실하게 필요하므로 면역크로마토그라피법을 이용한 항체검출법을 사용하면 개체검사를 실시하여 돼지의 오제스키병에 대한 항체보유 여부를 신속하게 판단할 수 있다.

    돼지콜레라 바이러스 gp55 단백질과 돼지인터류킨 2와의 융합 단백질의 제조방법
    37.
    发明公开
    돼지콜레라 바이러스 gp55 단백질과 돼지인터류킨 2와의 융합 단백질의 제조방법 失效
    猪白细胞介素2融合蛋白制备猪霍乱病毒gp55蛋白的方法

    公开(公告)号：KR1019970043047A

    公开(公告)日：1997-07-26

    申请号：KR1019950051042

    申请日：1995-12-16

    Applicant: 대한민국(농촌진흥청장)

    Inventor： 송재영 ,  박종현 ,  현방훈 ,  안동준 ,  김병한 ,  안수환

    IPC: C12N15/62

    Abstract: 본 발명은 돼지콜레라 바이러스의 당단백 gp55유전자를 클로닝하여 돼지인터류킨2 유전자와 융합하여 곤충 바이러스인 바이클로바이러스에서 gp55와 돼지인터류킨 2와의 융합단백질을 발현하여 이 융합단백질을 생산하는 방법, 및 이렇게 하여 얻은 단백질을 이용하여 돼지콜레라 유전자재조합 백신을 생산하는 방법이다. 이 방법에 의하여 얻은 융합 단백질은 우수한 면역원성을 나타냄과 동시에 돼지에 대하여 아무런 부작용을 유발하지 않는 장점을 갖는다.

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